课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课件配套优秀教案案例

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（复习课） 一、考纲展示

二、重难点

理解选择培养基的使用原理及学会微生物分离与计数的方法

三、教学过程

1.基础自填（巩固基础知识）

2.易错诊断小练

正误判断

(1)对细菌进行计数只能采用稀释涂布平板法，而不能用平板划线法(

) (2)筛选能分解尿素的细菌所利用的培养基中，尿素是唯一的氮源(

) (3)分解尿素的细菌在分解尿素时，可以将尿素转化为氨，使得培养基的酸碱度降低(

) (4)纤维素是构成植物细胞壁的主要成分，在纤维素酶的作用下，纤维素可以水解成葡萄糖(

)(5)刚果红可以与纤维素形成透明复合物，所以可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌(

)

(6)在筛选能分解纤维素的细菌的实验中，选择培养的目的是增大样品中目的菌株的浓度(

) (7)刚果红染色法只能在培养微生物的时候加入刚果红(

)

3.巩固练习

例1．利用农作物秸秆为原料可生产乙醇，生产过程中可采用微生物将秸秆水解或用酶水解，其主要技术流程如下图所示，下列相关说法错误的是

秸秆碎屑①,反应罐水解②,过滤出渣③,酒精发酵④,真空分馏

A．可用刚果红染色法筛选过程①所需的纤维素分解菌

B．过程①加入的是葡萄糖苷酶

C．酒精发酵接种的酵母菌需在无氧条件下发酵

D．酒精发酵前需对培养基进行高压蒸汽灭菌

核心要点整合

1．筛选菌株的原则是：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括________________________等)，同时______________________其他微生物的生长。

2．探究菌株筛选原理的不同点

土壤中分解尿素的细菌

分解纤维素的微生物

①选择培养基的成分：_______①选择培养基的成分：______作为唯一的碳源

作为唯一的氮源

②鉴定方法：刚果红染色法，即②鉴定方法：在培养基中加入刚果红与纤维素形成____指示剂，若指示剂____，____________，当纤维素被分解pH升高，说明细菌能分解尿素

后，培养基出现以纤维素分解菌为中心的透明圈

3.在微生物的筛选与计数实验中，设置对照实验的目的是：排除实验组中___________因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。

4．怎样设置证明培养基未被污染的对照？

用空白培养基作对照。

5．怎样设置证明选择培养基选择作用的对照？

用牛肉膏蛋白胨培养基接种等量同种菌液作对照。

【易错警示】

(1)为了使结果接近真实值，应设置三个或三个以上的平板，计算出菌落平均数。

(2)计算时明显偏离实际值(本组实验其他平板计数值)的要舍弃掉后求平均值。

(3)对照实验的设计首先要明确设计的目的，分析出实验的自变量之后才能准确设计。

综合能力提升

【技法提炼】

统计菌落数目的方法

(1)显微镜直接计数法

①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。

②方法：用计数板计数。

③缺点：不能区分死菌与活菌。

(2)间接计数法(活菌计数法) ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

②计算公式：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M，其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。

③操作：设置重复组，增强实验的说服力与准确性。同时为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。

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高考真题演练

37【生物—选修1：生物技术实践】（15分）

将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培养基。

回答下列问题：

（1）

M培养基若用于真菌的筛选，则培养基中应加入链霉素一抑制_________的生长，加入了链霉素的培养基属于__________培养基。

（2）

M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质，营养物质类型除氮源外还有___________________（答出两点即可）。氮源进入细菌后，可参与合成的生物大分子有_________________（答出两点即可）。

（3）

若在M培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养，平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产生淀粉酶的微生物，加入的显色剂是__________，该方法能筛选出产生淀粉酶微生物的原理是_______________________________。

（4）

甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：

甲同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是110、140和149，取平均值133. 乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是27、169和176，取平均值124. 有人认为这两位同学的结果中，乙同学的结果可信度低，其原因是：____________。

37.【答案】（1）细菌（等原核生物）

选择

（2）碳源、无机盐、生长因子

蛋白质、DNA、RNA （3）碘液（或碘化钾）

碘液和淀粉反应呈蓝色，而能产生淀粉酶的微生物可以将淀粉分解，淀粉的分解产物不能和碘液反应呈蓝色。

（4）正确稀释后涂布平板，平板上的菌落数为30-300之间，乙同学的结果中三个平板的菌落数有一个只有27。