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课题三血红蛋白的提取和分离【学习目标】(一)知识与技能1、尝试从血液中提取和分离血红蛋白2、了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理(二)过程与方法体验血红蛋白提取和分离的实验的严格要求,注意按照操作提示进行相关步骤(三)情感、态度与价值观初步形成科学的思维方式,发展科学素养和人文精神【学习重难

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课题3 血红蛋白的提取和分离第一课时教学设计

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课题3 血红蛋白的提取和分离第一课时教学设计

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关键词:课题3 血红蛋白�…第一课时教学设计

正文

课题三

血红蛋白的提取和分离

【学习目标】

(一)知识与技能

1、尝试从血液中提取和分离血红蛋白

2、了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理

(二)过程与方法

体验血红蛋白提取和分离的实验的严格要求,注意按照操作提示进行相关步骤

(三)情感、态度与价值观

初步形成科学的思维方式,发展科学素养和人文精神

【学习重难点】

重点:凝胶色谱法的原理和方法

难点:样品的预处理;色谱柱填料的处理和色谱柱的装填

【学法指导】

启发式教学,拓展视野,感受科学技术的重要价值。

【知识链接】

1、DNA的复制方向是从

到

端。

2、DNA析出时,最适宜的盐浓度是

。

3、固定化技术包括

法、

法和

法。

4、、PCR一般要经历30多次循环,每次循环可以分为

、

和

。

5、粗提取的DNA,在

的条件下,用

检验,被染成

。

【学习内容】

一、

自主学习:

(一)、基础知识

蛋白质的各种特性的差异,如分子的

和大小、所带

和多少、

、

和对其他分子的亲和力,等等,可以用来分离不同的种类的

。

一、凝胶色谱法:

1、凝胶色谱法也称做

法,是根据相对

的大小分离蛋白质的有效方法。所用的凝胶实际上是一些微小的

,大多是由多糖类化合物构成的,如

或

。在小球内部有许多贯穿的

,当相对分子质量不同的

通过凝胶时,相对分子质量较小的蛋白质容易进入

的通道,路程较长,移动速度

;而相对分子质量

的蛋白质无法

凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度

。这样,相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。

二、缓冲溶液:

1、缓冲溶液的缓冲作用体现在:在一定范围内,缓冲溶液能够抵制外界的

或

对溶液PH值的影响,维持PH基本不变。缓冲溶液通常由1-2种

溶于水中配制而成。调节缓冲剂的

就可以制得在不同PH范围内使用的

。

2、生物体内进行的各种生物化学反应都是在一定的PH下进行的,为了能够在

下,准确模拟生物体内的过程

,就必须保持体外溶液的

与

环境中的PH基本一致。因此,缓冲溶液的正确

和PH的

,在生物

化学的研究工作中有着极其重要的意义。

三、电泳

电泳是指带电粒子在

的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物大分子,如

、

等都具有可解离的

,在一定的PH下,这些基团会带上

或

。在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷

的电极移动。电泳利用了待分离样品中各种分子

的差异以及分子本身的大小、

的不同,使带电分子产生不同的

,从而实现样品中各种分子的分离。

(二)实验操作:

1、蛋白质的提取和分离一般分为四步:

、

、

和

。

2、血红蛋白分离的步骤:

①红细胞的

:其目的是去除

,以利于后续步骤的

②血红蛋白的

:加

和40%的

,使

破裂,释放出血红蛋白。

③

溶液:放入

管中,用离心机离心,于分液漏斗中分出下层的红色透明液体,即

溶液。

④

:装入

中,

12h. 3、凝胶色谱操作:

①凝胶色谱柱的制作

②凝胶色谱柱的

③样品的加入和

课堂总结

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