资料摘要
课题三血红蛋白的提取和分离【学习目标】(一)知识与技能1、尝试从血液中提取和分离血红蛋白2、了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理(二)过程与方法体验血红蛋白提取和分离的实验的严格要求,注意按照操作提示进行相关步骤(三)情感、态度与价值观初步形成科学的思维方式,发展科学素养和人文精神【学习重难
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课题3 血红蛋白的提取和分离第一课时教学设计
未知
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关键词:课题3 血红蛋白�…第一课时教学设计
正文
课题三
血红蛋白的提取和分离
【学习目标】
(一)知识与技能
1、尝试从血液中提取和分离血红蛋白
2、了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理
(二)过程与方法
体验血红蛋白提取和分离的实验的严格要求,注意按照操作提示进行相关步骤
(三)情感、态度与价值观
初步形成科学的思维方式,发展科学素养和人文精神
【学习重难点】
重点:凝胶色谱法的原理和方法
难点:样品的预处理;色谱柱填料的处理和色谱柱的装填
【学法指导】
启发式教学,拓展视野,感受科学技术的重要价值。
【知识链接】
1、DNA的复制方向是从
到
端。
2、DNA析出时,最适宜的盐浓度是
。
3、固定化技术包括
法、
法和
法。
4、、PCR一般要经历30多次循环,每次循环可以分为
、
和
。
5、粗提取的DNA,在
的条件下,用
检验,被染成
。
【学习内容】
一、
自主学习:
(一)、基础知识
蛋白质的各种特性的差异,如分子的
和大小、所带
和多少、
、
和对其他分子的亲和力,等等,可以用来分离不同的种类的
。
一、凝胶色谱法:
1、凝胶色谱法也称做
法,是根据相对
的大小分离蛋白质的有效方法。所用的凝胶实际上是一些微小的
,大多是由多糖类化合物构成的,如
或
。在小球内部有许多贯穿的
,当相对分子质量不同的
通过凝胶时,相对分子质量较小的蛋白质容易进入
的通道,路程较长,移动速度
;而相对分子质量
的蛋白质无法
凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度
。这样,相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。
二、缓冲溶液:
1、缓冲溶液的缓冲作用体现在:在一定范围内,缓冲溶液能够抵制外界的
或
对溶液PH值的影响,维持PH基本不变。缓冲溶液通常由1-2种
溶于水中配制而成。调节缓冲剂的
就可以制得在不同PH范围内使用的
。
2、生物体内进行的各种生物化学反应都是在一定的PH下进行的,为了能够在
下,准确模拟生物体内的过程
,就必须保持体外溶液的
与
环境中的PH基本一致。因此,缓冲溶液的正确
和PH的
,在生物
化学的研究工作中有着极其重要的意义。
三、电泳
电泳是指带电粒子在
的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物大分子,如
、
等都具有可解离的
,在一定的PH下,这些基团会带上
或
。在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷
的电极移动。电泳利用了待分离样品中各种分子
的差异以及分子本身的大小、
的不同,使带电分子产生不同的
,从而实现样品中各种分子的分离。
(二)实验操作:
1、蛋白质的提取和分离一般分为四步:
、
、
和
。
2、血红蛋白分离的步骤:
①红细胞的
:其目的是去除
,以利于后续步骤的
②血红蛋白的
:加
和40%的
,使
破裂,释放出血红蛋白。
③
溶液:放入
管中,用离心机离心,于分液漏斗中分出下层的红色透明液体,即
溶液。
④
:装入
中,
12h. 3、凝胶色谱操作:
①凝胶色谱柱的制作
②凝胶色谱柱的
③样品的加入和
课堂总结
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关于本教案的常见问题
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