资料摘要
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、实验目标1、从土壤中分离出能分解尿素的细菌2、统计每克土壤样品含有多少这样的细菌二、实验步骤1.土壤取样:从(肥沃、湿润)的土壤中取样。先铲去表层土3 cm左右,再取样,将样品装入事先准备好的信封中。2.制备培养基:准备(牛肉膏蛋白胨)培养基和(选择)培养基将菌液
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课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教学实录
未知
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关键词:课题2 土壤中分�…教学实录
正文
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
一、实验目标
1、从土壤中分离出能分解尿素的细菌
2、统计每克土壤样品含有多少这样的细菌
二、实验步骤
1.土壤取样:从(肥沃、湿润)的土壤中取样。先铲去表层土3 cm左右,再取样,将样品装入事先准备好的信封中。
2.制备培养基:准备(牛肉膏蛋白胨)培养基和(选择)培养基将菌液稀释相同的倍数,在(牛肉膏蛋白胨)培养基上生长的菌落数目应明显多于(选择)培养基上的数目,因此,(牛肉膏蛋白胨培养基)可以作为对照,用来判断(选择)培养基是否起到了选择作用。
3.微生物的培养与观察:参考课本中图2-7的实验流程示意图,将10 g土样加入盛有(90 mL无菌生理盐水)的锥形瓶中(锥形瓶体积为250 mL),充分摇匀,吸取上清液1 mL,转移至盛有9 mL的生理盐水的无菌大试管中,依次等比稀释至77310稀释度,并按照由10~10稀释度的顺序分别吸取0.1 mL进行平板涂布操作。按照浓度从低到高的顺序涂布平板,不必更换移液管。
将涂布好的培养皿放在(30 ℃)温度下培养。随着培养时间的延长,会有不同的菌落产生。比较牛肉膏培养基和选择培养基中菌落的数量、形态等,并做好记录。
挑选选择培养基中不同形态的菌落接入含(酚红)培养基的斜面中,观察能否产生如课本中图2-10的颜色反应。
4.细菌的计数
当菌落数目稳定时,选取菌落数在30~300的平板进行计数。在同一稀释度下,至少对3个平板进行重复计数,然后求出(平均值),并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。
三、实验思考
1.想一想,如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数?
答:统计某一稀释度下平板上的菌落数,最好能统计3个平板,计算出平板菌落数的平均值,然后按课本旁栏的公式进行计算。
2.为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度?测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量,选用的稀释范围相同吗?
答:这是因为土壤中各类微生物的数量(单位:株/kg)是不同的,例如在干旱土壤中的上层样本中:好氧及兼性厌氧细菌数约为2 185万,放线菌数约为477万,霉菌数约为23.1万。因此,为获得不同类型的微生物,就需要按不同的稀释度进行分离,同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。
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