课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数第二课时教案

2.2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

（第一课时教学设计）

【学习目标】

1、理解筛选菌株的基本原理，掌握筛选土壤中分解尿素的细菌的基本思路。

2、理解选择性培养基对微生物的选择作用。

3、进一步掌握细菌计数的基本方法。

4、掌握进行土壤中分解尿素细菌的分离与计数基本步骤及其要求。

5、能将分解尿素的细菌的统计方法应用于其它微生物的检测与计数。

【重点难点】

课题重点：筛选特定细菌的基本方法

课题难点: 对分解尿素的细菌的计数

【教学过程】

一

课题背景

阅读教材P21 “课题背景”，了解尿素的化学本质及其作用（即为什么土壤中会有分解尿素的细菌）

二、研究思路

阅读教材P21“（一）筛选菌株”，回答下列几个问题：

1、DNA聚合酶有什么作用？化学本质是什么？

2、在PCR技术中为什么需要耐高温的DNA聚合酶？

3、如何获取耐高温的DNA聚合酶？

4、你能否根据上述原理提出一种分离土壤中分解尿素的细菌的基本方法？

5、什么是选择性培养基？常见的选择性培养基有哪些？

三、细菌数目的统计方法

阅读教材P22“（二）统计菌落数目、（三）设置对照”，回答下列问题：

1、什么是菌落？为什么统计菌落即可知道土壤中某种细菌的密度？

2、统计土壤中某种微生物的数量的常见方法有哪些？这些方法（菌落统计与显微镜直接计数）之间有哪些差别？

3、要使统计结果更加接近实际情况，在操作中必须注意哪些方面（或有什么样的统计标准）？

4、为什么要设置对照组？如何设置对照组？

四、实验设计

阅读P23――26，归纳回答下列问题：

1、什么是实验设计？它包括哪些内容？

2、分离土壤中分解尿素的细菌的实验的基本步骤有哪些？

3、样品为什么要稀释？如何稀释（复习前面知道）？对于不同的微生物，稀释倍数有什么差异？对于分离土壤中分解尿素的细菌的稀释倍数由什么来具体决定？

4、为什么可以根据菌落数可以推测土壤中分解尿素的细菌的密度？为什么根据菌落可以基本推断细菌的种类？细菌培养的时间长短由什么来决定？为什么？

5、细菌数目的计数公式是什么？

五、知识小结

六、课堂练习：

1、判断正误

（1）选择培养基筛选出的微生物只有一种（ ）

（2）筛选分解尿素的细菌的培养基上不需要添加尿素（ ）

（3）只要培养基中有尿素就可以筛选出分解尿素的细菌（ ）

（4）

稀释涂布平板法既可用于统计活菌数也可用于统计样品中死菌数（ ）

（5）统计菌落数目也可以用平板划线法（ ）

2、分解尿素的细菌的培养基，从物理性质划分该培养基属于 ，从功能划分该培养基属于 [来源:学科网ZXXK]

3、在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别 和 。

4、比较显微镜直接计数与稀释涂布平板法计数

项目

显微镜直接计数法

稀释涂布平板法

利用特定细菌计数板或当样品的 时，培养基表面生

原理

血细胞计数板，在显微长的 ，来源于样品稀释液中的镜下计算一定容积的样一个活菌。通过统计平板上的 ，品中微生物的数量

就能推测出样品中大约含有多少活菌。

主要用具

血细胞计数板

固体

培养基

计数依据

优点

缺点

计数方便，操作简单

计数的是

、活菌都计数在内

操作较复杂，有一定误差

一般来说，统计的菌落数往往比活菌的实际数目

。这是因为

。因此，统计结果一般用

而不是活菌数来表示。

5、设置对照的主要目的是排除实验组中

对实验结果的影响，提高实验结果的

。

【课后达标检测】

1.对细菌群体生长规律测定的正确的表述是（ ）

A.在液体培养基上进行

B.至少接种一种细菌

C.接种一个细菌 D.及时补充消耗的营养物质

2.使用选择培养基的目的是（ ）

A.培养细菌 B.培养真菌

C.使需要的微生物大量繁殖

D.表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别

3.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是(

)

A.CO2和N2

B.葡萄糖和NH3 C.CO2和尿素 D.葡萄糖和尿素

4.下列说法不正确的是（ ）

A.科学家从70－80度热泉中分离到耐高温的TaqDNA聚合酶

B.统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5，以M3作为该样品菌落数的估计值

C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度

D.同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多。[来源:学&科&

5.为培养和分离出酵母菌并淘汰杂菌，常在培养基中加入（ ）

A.较多的氮源物质 B.较多的碳源物质

C.青霉素类药物 D.高浓度食盐