课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数优秀教案内容

高二生物 课题

课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

课型

新授

课时

1 教师复备栏（学生笔记栏）

【学习目标】站得高——明确学习目标

1.从土壤中分离出能够分解尿素的细菌。

2.统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌。

【学习重点和难点】重点：对土壤的选取和选择培养基的配制。

难点：对分解尿素细菌的计数。

【学法指导】1. 结合图片并运用分子与细胞的知识，学习培养基微生物的分离与计数的基础知识。

2、通过亲身实验，体验具体实验操作及注意事项，并从中体会微生物分离技术的相关概念。

【知识链接】复习旧知，以旧带新

1、培养基的种类有 培养基和 培养基等， 是实验室中最常用的培养基之一。

2、获得纯净培养物的关键是防止 的入侵。

3、常用的消毒方法有： 消毒法、 消毒法、此外也常用 进行消毒，

4、常用的灭菌方法有 灭菌、 灭菌、 灭菌等

5、微生物的接种方法很多，最常用的是 法和 法

【学习内容】

一、

自主学习：起步稳——夯实基础促发展

学生阅读教材P21—26 ,完成下列学案

(一)、筛选菌株：

1、DNA多聚酶链式反应是一种在体外将少量DNA大量 的技术这种技术要求使用 的DNA聚合酶。科学家是从水生 Taq中分离到耐高温的TaqDNA聚合酶的。Taq细菌是美国微生物学家 于1966年在美国黄石国家公园的一个热泉中发现的。这说明，在寻找目的菌株时，要根据它对 的要求，到相应的 中去寻找。

2、实验室中微生物的筛选，人为提供有利于目的菌株生长的 ，包括 、 、 等，同时 或 其它微生物的生长。

3、在微生物学中，将 特定种类的微生物生长，同时 或 其他种类微生物生长的培养基，称做 。

（二）统计菌落数目

1、稀释涂布平板法常用来统计样品中 的数目。当样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于 中的一个 。通过统计平板上的 ，就能推测出样品中大约含有 活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在 的平板进行计数。

2、统计的菌落数往往比活菌的实际数目 。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是 。因此统计结果一般用 而

不是用活菌数来表示。除了上述的活菌计数法外，显微镜 也是测定微生物数量的常用方法。

（三）设置对照：设置对照的主要目的是排除实验组中 对实验结果的影响，提高结果的 。

（四）实验设计：实验设计包括对实验 ，所需 、 、 和 ，具体的实施步骤以及时间安排等的综合 和 。

1、土壤取样：土壤有“ ”之称。土壤中的微生物，数量 ，种类 。

2、样品的稀释：样品的稀释程度将直接影响平板上生长的 。在实际操作中，通常选用一定 范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数在 之间，适于计数的平板。

3、微生物的培养与观察：不同种类的微生物，往往需要不同的培养 和

培养 。一般来说，在一定的培养条件下，同种微生物表现出稳定的 。这些特征包括菌落的 、 、 和 等方面。

二、合作探究:走得欢——探索中收获，收获中提升

操作过程中的注意事项：

1、

操作

（1）取土壤用的小铁铲和盛土样的信封在使用前都需要

。

（2）应在火焰旁称取土壤。将称好的土壤倒入

中，塞好

。

（3）在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在

操作。

2、做好

：在使用前对

和

进行标记。

3、制定

：对于耗时较长的生物实验，需要事先制定

，以便提高工作

，在操作时做到

。

【整理学案】：构建网络，内化知识

土

壤中

研究思路

分

解

尿

素 的实验设计

细菌

的

分

离

与计

操作提示

数

【达标测评】步步高——巩固成果，对答如流

一、选择题

1．PCR技术要求使用耐高温的DNA聚合酶，这种酶要能忍受93℃左右的高温。如果请你来寻找这种耐高温的酶，你会去哪里寻找………( )

A．土壤中 B．海水中 C．热泉中 D．冷库中

2．下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是………………( )

A．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、尿素、琼脂、水

B．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、琼脂、水

C．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、尿素、琼脂、水

D．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水； 3.某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL)…( )

A．2.34×108 B．2.34×109 C．234 D．23.4 4.在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生原因( ) ①由于土样不同 ②由于培养基污染 ③由于操作失误 ④没有设置对照

A．①②③ B．②③④ C．①③④ D．①②④

5.关于土壤取样的叙述错误的是………( )

A．土壤取样，应选取肥沃、湿润的土壤 B．先铲去表层土3cm左右，再取样

C．取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌 D．应在火焰旁称取土壤

6.下列关于从土壤中分离细菌的操作步骤中，正确的是…………( )

①土壤取样 ②称取10g土壤取出加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中 ③吸取0.1mL进行平板涂布

④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度

A．①→②→③→④ B．①→③→②→④ C．①→②→④→③ D．①→④→②→③

7.下列关于测定土壤中细菌数量的叙述，正确的是………( )

A．一般选用103～107倍的稀液分别涂布

B．测定放线菌的数量，一般选用103、lO 4和105倍稀释

C．测定真菌的数量，一般选用103、104和105倍稀释

D．当第一次测量某种细菌的数量，可以将101～107倍的稀释液分别涂布到平板上培养

8.下列关于微生物的培养叙述错误的是( ) A．细菌一般在30～37℃的温度下培养1～2 d B．放线菌一般在25～28℃的温度下培养5～7 d C．霉菌一般在25～28℃的温度下培养3～4 d D．不同种类的微生物，一般需要相同的培养温度和培养时间

9.下列操作需要在火焰旁进行的一组是( ) ①土壤取样

②称取土壤 ③稀释土壤溶液 ④涂布平板

⑤微生物的培养

A．①②③④⑤ B．②③④⑤④⑤ C．③④⑤ D．②③④

10.土壤取样时最好选择哪种环境中的土壤做分离细菌的实验……( )

A．街道旁 B．花盆中 C．农田中 D．菜园里

二、非选择题

11.统计菌落数目一般用稀释涂布平板法，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个 ，来源于样品稀释液中的一个 。计数时一般选择菌落数在 的平板计数。

12.在进行操作本课题实验时应特别注意： 、 、 。

【学后反思】

参考答案：

一、1．C 2．A 3．B 4．A 5．C 6．C 7．B 8．D 9．D 10． D 二、11．菌落 活菌 30～300 12．无菌操作 作好标记 规划时间

习题：

一、选择题

1．PCR技术要求使用耐高温的DNA聚合酶，这种酶要能忍受93℃左右的高温。如果请你来寻找这种耐高温的酶，你会去哪里寻找………(

)

A．土壤中

B．海水中

C．热泉中

D．冷库中

2．下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是………………(

)

A．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、尿素、琼脂、水

B．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、琼脂、水

C．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、尿素、琼脂、水

D．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水；

3.某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL)…(

)

A．2.34×108

B．2.34×109

C．234

D．23.4

4.在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生原因(

)

①由于土样不同

②由于培养基污染

③由于操作失误

④没有设置 资源%库ziyuanku.com

对照

A．①②③

B．②③④

C．①③④

D．①②④

5.关于土壤取样的叙述错误的是………(

)

A．土壤取样，应选取肥沃、湿润的土壤

B．先铲去表层土3cm左右，再取样

C．取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌

D．应在火焰旁称取土壤

6.下列关于从土壤中分离细菌的操作步骤中，正确的是…………(

)

①土壤取样

②称取10g土壤取出加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中

③吸取0.1mL进行平板涂布

④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度WWW.ziyuanku.com

A．①→②→③→④

B．①→③→②→④

C．①→②→④→③

D．①→④→②→③

7.下列关于测定土壤中细菌数量的叙述，正确的是………(

)

A．一般选用103～107倍的稀液分别涂布

B．测定放线菌的数量，一般选用103、lO 4和105倍稀释

C．测定真菌的数量，一般选用103、104和105倍稀释

D．当第一次测量某种细菌的数量，可以将101～107倍的稀释液分别涂布到平板上培养

8.下列关于微生物的培养叙述错误的是(

)

A．细菌一般在30～37℃的温度下培养1～2 d

B．放线菌一般在25～28℃的温度下培养5～7 d

C．霉菌一般在25～28℃的温度下培养3～4 d

D．不同种类的微生物，一般需要相同的培养温度和培养时间

9.下列操作需要在火焰旁进行的一组是(

)

①土壤取样

②称取土壤

③稀释土壤溶液

④涂布平板

⑤微生物的培养

A．①②③④⑤

B．②③④⑤④⑤

C．③④⑤

D．②③④

10.下列可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是

…………(

)

A．以尿素为唯一氮源的培养基中加人酚红指示剂

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B．以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂

WWW.ziyuanku.com

C．以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂

D．以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂

11.土壤取样时最好选择哪种环境中的土壤做分离细菌的实验……(

)

A．街道旁

B．花盆中

C．农田中

D．菜园里

二、非选择题

12.统计菌落数目一般用稀释涂布平板法，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个

，来源于样品稀释液中的一个

。计数时一般选择菌落数

在

的平板计数。

13.在做本课题实验时，一位同学在稀释倍数为106的培养基中涂布了3个平板，统计的菌落数分别为21、212和256，该同学以这3个平板上菌落数的平均值163作为统计结果。你认为这一结果是否接近真实值?如果需要改进，如何改进?

14.在进行操作本课题实验时应特别注Ziyuanku.com 意：

、

、

。

15．在做本课题实验时，甲同学筛选出的菌落与其他同学不同，并且他在设计实验时并没有设置对照。思考下列问题：

(1)你认为出现甲同学这种结果的原因可能是什么?

(2)要帮助甲同学排除可能影响实验结果的因素，需要设置

，实验方案

有两种：一种方案是可以由其他同学用与甲同学

进行实验，如果结果与甲同学一致，则证明甲同学

，如果结果不同，则证明甲同学存在操作

或

的配制有问题。另一种方案是将甲同学配制的培养基在不加

的情况下进行培养，作为空白对照，以证明培养基是否受到

。

(3)由此问题你得出的启示是什么?

16．在105稀释度下求出3个平板上菌落数的平均值是63，那么每克样品中的菌落数是多少?

参考答案：

一、1．C

2．A

3．B

4．A

5．C

6．C

7．B

8．D

9．D

10．A

11．D

二、12．菌落

活菌

30～300

13．不接近真实值，需要重新实验。

14．无菌操作

作好标记

规划时间

15．(1)可能的原因有两种：一是由于土样不同，二是由于培养基污染或操作失误。

(2) 对照实验

一样的土样

，

无误，

失误

培养基

土样

污染。

(3)启示：做实验时一定要设置对照。

16．6.3×107。

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