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复习:DNA与蛋白质技术清远市清新区第一中学 胡秋丽一、考纲与考点1.DNA粗提取与鉴定的原理;2.PCR技术的原理;3.血红蛋白的提取和分离技术的原理、方法步骤等。二、考情分析 近几年本专题内容在高考选修一部分考查的机会非常少甚至未列入考纲要求,今年最新考纲中增加了此内容,导致对于考查的难度
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复习与测试含PPT的教学设计及点评
未知
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关键词:复习与测试含PPT的教学设计及点评
正文
复习:DNA与蛋白质技术
清远市清新区第一中学 胡秋丽
一、考纲与考点
1.DNA粗提取与鉴定的原理;
2.PCR技术的原理;
3.血红蛋白的提取和分离技术的原理、方法步骤等。
二、考情分析
近几年本专题内容在高考选修一部分考查的机会非常少甚至未列入考纲要求,今年最新考纲中增加了此内容,导致对于考查的难度和深度不太容易掌握,但也可能是这两年高考中的高频考点。
三、教学方法
归纳、比较法。
四、教学课时
1 五、教学过程
教学内容
考纲和考点展示
教师组织和引导
1.DNA粗提取与鉴定的原理
2.PCR技术的原理
3.血红蛋白的提取和分离技术的原理、方法步骤等
学生活动
明确考纲和考点,清楚学习内容
教学意图
指导学生复习的方向
一、生物大分子提取的基本思路
二、通过完成下列表格,复习分离DNA、PCR技术和分离蛋白分离质的相关知识:
DNA、
1
选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。
回答
明确思路,形成认识
引导学生回归
PCR技术、分离蛋白质的比较
分离DNA PCR技术
利用DNA热变性原理体外扩增DNA
分离蛋白质
依据相对分子质量的大小不同来分离蛋白质
样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定
实验DNA在不同浓度原理
NaCl溶液中溶解度不同,且不溶于冷酒精
实验选取材料→破变性→复性→过程
碎细胞释放DNA延伸
→去除杂质→
DNA析出与鉴定
实验结果
获得较纯净的DNA
获得大量DNA 相对分子质量
不同的蛋白质得以分离
结合教材第54、58、60页相关内容,完成表格。
教材,培养学生主动获取知识的能力
三、
利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差
DNA异,提取DNA,去除其他成分。
粗提
取与(二)提取DNA的原理:
鉴定
1.DNA在NaCl溶液中的溶解度不同 (通过曲线表示):学生进行活
动,并派代表
到讲台展示
曲线
当NaCl的物质的量浓度为0.14 mol/L时,DNA的溶解度最
低。利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。
2.DNA在酒精溶液中的溶解性:
DNA不溶于酒精溶液,细胞中的某些物质(蛋白质)则可学生回忆所
学知识,加深溶于酒精,将DNA与蛋白质进一步分离。
印象
3.DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性:
①蛋白酶:水解蛋白质,对DNA没有影响。。
(一)提取DNA的基本思路:
学生体会知识,教师检查学生对知识点的掌握程度
2
四、
血红蛋白的提取和分离
②高温:大多数蛋白质不能忍受60-80℃的高温,而DNA在80℃以上才会变性。
③洗涤剂:溶解细胞的细胞膜,去除脂质和蛋白质,但对DNA没有影响。
(三)DNA鉴定原理
沸水浴
DNA+二苯胺 蓝色
(四)实验步骤的注意事项:
1.
材料选择
2.
加入洗涤剂和食盐的作用
(一)血红蛋白的提取和分离的原理与方法:
(1)原理:利用蛋白质各种特性的差异,如分子的形状和_____、所带____的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等,来分离不同种类的蛋白质。
(2)分离方法:
①凝胶色谱法:也称做_________,是根据_______的大小分离蛋白质的有效方法。
②电泳法:是指带电粒子在______的作用下发生迁移的过程。
常用的电泳法有______________和________。
纯度鉴定常用________________________法。
凝胶色谱法:
蛋
白
目
项凝胶内部
运动方式
经过路程
洗脱次序
电泳法:
①在一定pH下,蛋白质分子的某些基团解离后带上正电或负电。在电场的作用下,带电分子会向着与其所带电荷_____的
3
相对分子质量大
质
相对分子质量小
默写重点知识
思考判断
不断发现问题,修改答案
以填空的形式,完成基础知识的复习
(1)大小、电荷
(2)分配色谱法、相对分子质量、电场、琼脂糖凝胶电泳法、聚丙烯酰胺凝胶电泳法、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法)
(不能进入、能进入、垂直向下、垂直向下和无规则扩散运动、较短、较长、先流出、后流出)
(相反)
重点知识,深入记忆
变化知识考查形式
,让学生回归教材,重视教材基础知识的识记
②由于待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身
的大小、形状的不同,使带电分子产生不同的迁移速度,从而
实现样品中各种分子的分离。
(二)实验操作
蛋白质的提取和分离一般分为四步:
(1)样品处理:包括洗涤红细胞;血红蛋白稀释;离心等操
阅读教材,
作收集到的血红蛋白溶液。
回答相关内容
(2)粗分离:透析除去相对分子质量较小的杂质。
(3)纯化:通过凝胶色谱法将分子量较大的杂质蛋白质除去。
(4)纯度鉴定:通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定。
有机溶剂
(
无色透明的甲苯层)
脂类物质(
白色脂溶性物质沉淀)
观察、分析、血红蛋白溶液
(红色透明液体)
归纳
红细胞破碎物沉淀
(
暗红色沉淀物)电极移动。
回归教材,
回顾重点知识,加深印象
图文转换,培养学生的识图和析图能力
五、课堂演练
1、
关于“DNA的粗提取和物理性状观察”实验:
完成检测练习,查漏补缺,完善知识网络
(1)DNA;
⑴实验材料选用鸡血球液,而不用鸡全血,主要原因是鸡血球液中含有较高含量的 。图A中实验材料为洋葱。研磨前溶解细胞膜,检查利于DNA的释学生对易考和加入的B为洗涤剂和食盐,加入洗涤剂的目的是____________;放;利于DNA的溶解;
加入食盐的目的是_____________。
4
⑵在图A所示的实验步骤中加蒸馏水的目的是 ,通过图B所示的步骤取得滤液,再在溶液中加入2摩尔/升NaCl溶液的目的是 ,图中C所示实验步骤中加蒸馏水的目的是 (升高或降低)NaCl浓度,使DNA (溶解或(2)使血细胞破裂;过滤除去不溶的易错知识点的能力及掌握程度,
及时查漏补缺,完善知识
杂质;降低;辨析析出;
析出)。
(3)二苯胺;(3)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA,可在沸水浴中蓝色;(4)多聚酶链式反滴加 溶液,结果丝状物被染成 。
应;氢。
(4)提取到的DNA想在体外迅速扩增,可采用PCR技术即
_________________,加热使DNA双链打开,这一步是打开
(1)血红蛋________键,称为变性。
白的释放;凝
胶色谱柱的2.请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题:
装填;
(2)相对分子质量的大小;
(3)杂蛋白;离心后的上清液中没有(1)将实验流程按先后顺序补充完整:_________、________。
黄色;柠檬酸(2)凝胶色谱法的基本原理是根据____________分离蛋白质。
钠;
(4)甲苯层;(3)洗涤红细胞的目的是去除__________,洗涤干净的标志是血红蛋白溶_________________________。为防止血液凝固,在采血容器中液;
除去样品中相对分要预先加入____________。
子质量较小(4)将处理破碎后的红细胞混合液经离心后,离心管从上到的杂质;
下分为四层,其中第一层和第三层分别是__________ 、(5)气泡会___________;透析的目的是__________________________。
搅乱洗脱液中蛋白质的(5)在装填色谱柱时不得有气泡存在,因为_______________。 洗脱次序,降在凝胶色谱操作过程中,不能发生____________________低分离效果;的情况,一旦发生这种情况,需重新装填凝胶色谱柱。如果红色洗脱液流干、露出凝胶颗区带___________________,说明色谱柱制作成功。
粒;均匀一致
地移动。3.凝胶色谱技术是六十年代初发展起来的一种快速而又简单
的分离技术,目前不但应用于科学实验研究,而且已经大规
5
(1)a;a相对分子质量(1)a、b均为蛋白质分子,其中先从色谱柱中洗脱出来的是大,无法进入凝胶内部________,原因是 __________________________________。
的通道,只能(2)自己制作凝胶色谱柱时,在色谱柱底部d位置相当于多在凝胶外部孔板的结构可由______________ 替代。
移动,路程较短,移动速度(3)洗脱用的液体应尽量与浸泡凝胶所用的液体______(填较快;“相同”或“不同”),洗脱时,对洗脱液的流速要求____。
(2)尼龙网和尼龙纱;
(3)相同;保持稳定。
模地用于工业生产。据图回答问题:
六、课堂小结
七、课后作业
(结合板书)
1.完成《创新设计》P 252 第1.2题
2.归纳血红蛋白样品处理及粗分离的步骤及注意事项。
【板书设计】
复习:DNA与蛋白质技术
一、DNA粗提取与鉴定的原理
1.
粗提取原理:溶解性不同 2.
耐受性不同 沸水浴
2.鉴定原理:DNA+二苯胺 → 蓝色
二、PCR技术原理:DNA热变性
三、血红蛋白提取与分离
1.原理:根据蛋白质相对分子质量分离
2.常用方法:凝胶色谱法、电泳法
3.步骤:样品处理→
粗分离→
纯化→
纯度鉴定
6
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关于本教案的常见问题
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