课题3　血红蛋白的提取和分离教案及板书设计

专题五 课题3 血红蛋白的提取和分离

【本节目标】掌握血红蛋白的提取和分离的实验原理和方法

【预习导学】

(请同学们认真阅读选修一课本64-67页，完成下列知识填空）

一、凝胶色谱法

1、概念：也称做

_______；是根据

分离蛋白质的有效方法。

2、原理

（1）由

______构成的凝胶，是一些微小的___________，内部有许多贯穿的

。

（2）当

不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量

的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程

，移动速度

；而相对分子质量

的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在

移动，路程

，移动速度

，从而使相对分子质量不同的蛋白质分子得以分离。

二、缓冲溶液

1、作用：在一定范围内，抵制

的

___对溶液pH的影响，维持pH

。

2、配制：由

种缓冲剂溶解于

中配制而成，通过调节缓冲剂的

____就可以得到不同pH范围内使用的缓冲液。

三、电泳

1、概念：指

在电场的作用下发生

的过程。

2、原理：

、

等生物大分子的可解离基团，在一定的

下，会带上

或

，在

的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷

的电极移动。

3、作用：电泳利用了待分离样品中各种分子

__的差异及分子本身的

、

的不同，使带电分子产生不同的

____，从而实现样品中

的分离。

4、方法：常用的电泳方法有

______________和

__________________。测定蛋白质分子量时通常使用

______________________________。

【当堂检测与训练】

1.凝胶色谱法分离蛋白质的原理依据是(

) A．根据蛋白质分子与凝胶的亲和力的大小 B．根据蛋白质相对分子质量的大小

C．根据蛋白质所带电荷的多少 D．根据蛋白质溶解度的大小

2．缓冲液的作用是：在一定范围内，抵制外界的影响来维持（ ）基本不变。

A温度 B pH C渗透压 D氧气浓度

3．电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷（ ）的电极移动。

A相同 B相反 C相对 D相向

4.用凝胶色谱法分离蛋白质时，分子量大的蛋白质（

）

A路程较长，移动速度较慢

B路程较长，移动速度较快

C路程较短，移动速度较慢

D路程较短，移动速度较快

5.凝胶色谱分离法分离蛋白质时，凝胶的种类较多，但其作用的共同点是

(

) A、改变蛋白质分子通过凝胶时的路径

B、吸附一部分蛋白质，从而影响蛋白质分子的移动速度

C、将酶或纽胞固定在凝胶中

D、与蛋白质分子进行化学反应，从而影响其移动速

1

6.利用凝胶色谱法，什么样的蛋白质先洗脱出来（

）

A、相对分子质量大的

B、溶解度高的

C、相对分子质量小的

D、所带电荷多的

7.下图中，可表示为相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的移动过程的是（ ）

8.下列各项中不属于电泳使样品中各分子分离的原因的是(

) A．分子带电性质的差异 B．分子的大小

C．分子的形状 D．分子的变性温度

9.使用SDS-聚丙烯酰胺电泳过程中，蛋白质的电泳迁移率完全取决于（ ）

A 电荷的多少 B 分子的大小

C 肽链的多少 D 分子形状的差异

10. 选用哺乳动物的红细胞作为分离蛋白质的实验材料，有何好处（ ）

A. 血红蛋白是有色蛋白 B. 红细胞无细胞核

C. 红细胞蛋白质含量高 D. 红细胞DNA含量高

11. 血红蛋白因含有（ ）而呈红色

A. O2 B. CO C. CO2 D.血红素

12.(2011·广东)以下关于猪血红蛋白提纯的描述，不正确的是(

) A．洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止红细胞破裂

B．猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少

C．血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测

D．在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢

13.下面说法不正确的是(

)。

A．在一定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸、碱对溶液pH的影响，维持pH基本不变

B．缓冲溶液通常由1～2种缓冲剂溶解于水中配制而成

C．电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程

D．透析袋能使大分子自由进出，而将小分子保留在袋内

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专题五 课题3 血红蛋白的提取和分离

【预习导学】

一、1.分配色谱法 相对分子质量的大小 2.多糖类化合物 多孔球体 通道 相对分子质量不同 较小 较长 较慢 较大 凝胶外部 较短 较快

二、1.外界 酸和碱 基本不变 2.1-2 水 使用比例 三、1.带电粒子 迁移 2.多肽 核酸 pH 正电 负电 电场 相反

3.带电性质 大小 形状 迁移速率 多种分子

4.琼脂糖凝胶电泳 聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

【当堂检测与训练】

1-5BBBDA

6-10ABDBB

11-13DDD

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