课题3　分解纤维素的微生物的分离教学实录及点评

分解纤维素的微生物的分离导学案

编写人：朱君君 使用日期:3月25日

【学习目标】

1．能简述纤维素酶的种类及作用，

2．能从土壤中分离出分解纤维素的微生物，了解这类微生物的应用。

3．能掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术。

【学习过程】

【预习学案】

一、纤维素与纤维素酶

1．纤维素的化学组成： 三种元素，是一种 糖。

2．纤维素的分布： 是自然界中纤维素含量最高的天然产物，此外，木材、作物秸秆等也富含纤维素。

3．纤维素酶的作用：纤维素酶是一种 ，一般认为它至少包括三种组分，即 酶、 酶 酶，前两种酶使纤维素分解成 ，第三种酶将纤维二糖分解成 。

二、纤维素分解菌的筛选 1．筛选方法： 染色法。

2．筛选原理：刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成 ，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以 为中心的透明圈，我们可以通过 来筛选纤维素分解菌。

【教学学案】

三、试验设计

土壤中纤维素分解菌的分离的实验方案

：

分解纤维素的微生物的分离的试验流程

、

、

、

、

1．土壤取样：采集土样时，应选择富含 的环境。

2．选择培养：

阅读资料二“选择培养基”，回答以下三个问题：

〖思考1〗纤维素分解菌选择培养基属于 培养基，原因是什么？。

〖思考2〗培养基选择作用机制是什么？

〖思考3〗若设置一个对照实验说明选择培养的作用，应控制的变量是什么？

(1)目的：增加纤维素分解菌的 ，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。

(2)制备选择培养基：参照课本旁栏中的比例配制。

(3)选择培养：称取土样20 g，在无菌条件下加入装有30mL培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在 上，在一定温度下振荡培养1～2 d，直至培养液变 。也可重复选择培养。

（4）梯度稀释：

依次将培养液稀释10～10倍。思考是如何操作的？

(5)．将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上

<1>制备培养基：参照课本旁栏中的比例。 <2>倒平板操作。 <3>涂布平板：将稀释度为104～106的菌悬液各取0．1 mL涂布在平板培养基上，30℃倒置培养。

(6)．刚果红染色法：挑选产生 的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。

〖思考4〗本实验流程与尿素分解菌的分离实验流程有哪些异同？[来源:学|科|网]17

3刚果红染色法：常用的刚果红染色法有两种即

。

阅读资料三“刚果红染色法”，填表比较两种染色法的各自的优缺点

是 、 。

染色法

优点

阅读资料三“刚果红染色法”，填表比较两种染色法的各自的优缺点：

方法一

缺点

〖思考5〗为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？

方法二

四：结果分析与评价

1为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行 实验，纤维素酶的发酵方法有 发酵和 发酵。

2纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的

含量进行定量测定。

【练习学案】

1．下列材料中纤维素含量最高的是( ) A．杨树 B．小麦 C．玉米 D．棉花

2．纤维素酶能够分解（ ） A．纤维素的微生物 B．淀粉的微生物 C．纤维素 D．淀粉

3．刚果红能与哪项物质形成红色复合物( )[来源:学_科_网]

A．纤维二糖 B．纤维素

C．葡萄糖 D．麦芽糖

4．寻找纤维素分解菌应到…（ ） A．湿润的环境中 B．富含纤维素的环境中

C．富含无机盐的环境中 D．池塘中

5．纤维素分解菌的选择培养基有选择作用，原因在于其含有…( ) A．NaNO3

B．KCl C．酵母膏 D．纤维素粉

6．下列哪种生物能产生纤维素酶( ) A纤维素分解菌 B．牛 C．羊 D．兔

7．选择培养时应将锥形瓶固定在( ) A．桌子上 B．温箱里 C．窗台上 D．摇床

8．选择培养的结果：培养液变…（ ） A．清澈 B．浑浊 C．红色 D．产生透明圈

9．刚果红染色时，加入刚果红可在……( ) ①制备培养基时 ②梯度稀释时 ③倒平板时 ④涂布时 ⑤培养基上长出菌落时

A．①③ B．②⑤ C．③⑤ D．④⑤

10．两种刚果红染色法的结果是（ ） A．均会出现透明圈

B均不会出现透明圈

D方法一不出现方法二出

C方法一出现方法二不出现 【学后反思】

同学们，通过这节课学习，你有哪些收获和体会，存在哪些疑问，请把它填在下面的表格中，以便及时总结、弥补知识缺漏，不吃夹生饭，不做欠账人。

收获

疑点

内容

内容

分解纤维素的微生物的分离导学案答案

【学习过程】

【预习学案】

一、1.C H O 多糖 2.棉花 3.复合酶C1 菜纤维素

葡萄糖纤维二糖

二 1. 刚果红 2.红色复合物，纤维素分解菌，是否产生透明圈

【教学学案】

三 1. 纤维素 2〖思考1〗液体，没有添加琼脂成分. 〖思考2〗以纤维素粉为唯一碳源，只有纤维素分解菌才能生存。

〖思考3〗将纤维素粉改为葡萄糖。

(1)纯度 (3).摇床

混浊(4)参照专题1的稀释操作， (6).透明圈

〖思考4〗尿素分解菌的分离实验流程是将土样制成的菌悬液直接涂布在选择培养基上；本课题通过选择培养使细菌增殖后，再涂布在鉴别培养基上。其它操作基本基本共同。

3填表

染色法

方法一

纤维素分解菌的作用

操作简便

方法二

不存在菌落混杂问题

有些微生物能降解色素，形成明显的透明圈。

〖思考5〗在选择培养条件下，可使能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。

四 1 发酵产纤维素酶

，

液体 发酵和 固体 发酵

【练习学案】

1．D 2．C 3．B 4．B 5．D 6．A 7．D 8．B 9．C 10．A

刚果红会使菌落之间发生混杂

产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈，

优点

颜色反应基本上是

缺点

操作繁琐