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专题2 微生物的培养和应用课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数背景:不能直接被农作物吸收,它被细菌产生的酶分解成才可以被农作物直接吸收方程式:一、筛选菌株:例如:Taq酶在热泉中筛选培养基:本课题使用的是以为唯一氮源的培养基。二、统计菌落数目1、法。成功地统计菌落数目的关键是。公式:每克样品中的
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课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数优质课教学设计
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关键词:课题2 土壤中分�…优质课教学设计
正文
专题2
微生物的培养和应用
课题2
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
背景:
不能直接被农作物吸收,它被细菌产生的
酶分解成
才可以被农作物直接吸收
方程式:
一、筛选菌株:
例如:Taq酶在热泉中筛选
培养基:本课题使用的是以
为唯一氮源的
培养基。
二、统计菌落数目
1、
法。成功地统计菌落数目的关键是
。
公式:每克样品中的菌落数=(C÷V)×M,C代表
,
V代表
,M代表
。
注:①选择菌落数为
的平板计数;
②统计的菌落数比活菌的实际数目
。原因是
。
2、 法。即血球板计数法
三、设置对照
1、目的:排除
组中
因素对实验结果的影响,提高实验的可信度。
2、设置对照:(目的)
(1)空白对照(相同条件下不接种):培养基是否有
。
(2)牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基对照(接种后):选择培养基是否有
作用。
★选择培养基上的菌落数较少。
四、实验设计
(一)土壤取样:一般要铲去3cm表层土,铁铲取样放入信封(铁铲信封都要灭菌)
(二)制备培养基:选择性培养基(以
为唯一氮源)和牛肉膏蛋白胨培养基
(判断选择培养基是否
)
(三)样品的稀释:
1、不同的微生物要采用不同的稀释度。
、如:细菌为104、105106,放线菌为103、104、105,真菌为102、103、104
。
2、每个稀释度需倒6个平板:4个选择性培养基,3个涂布,1个空白;
2个牛肉膏蛋白胨培养基,1个涂布,1个空白
3、分别取0.1 mL菌液接种到制备好的平板
①称取土壤和每一步稀释都应在火焰旁
②标记好培养皿、培养基种类、培养日期、
平板上样品的稀释度
(四)涂布培养及观察计数:
1、不同微生物需要不同的培养温度和时间
如:细菌
30~37℃
1~2d,
放线菌25~28℃
5~7d,
真菌
25~28℃
3~4d
2、选择菌落数在
之间、适于计数的平板
3、选取菌落数目
时的记录作为结果(防止因培养时间不足导致遗漏菌落数目)
4、统计并计算同一稀释度下3个平板菌落数目的平均数。
五、实验结果的分析、评价
1、空白对照(成功):对照培养基无菌落生长,无杂菌污染
2、选出菌落:牛肉膏蛋白胨培养基菌落数明显大于选择培养基
3、稀释成功:同一稀释度,获得30~300菌落数的平板,至少两个平板菌落数相近。
4、重复组实验结果相近
六、实验结果的鉴定
1、操作:在以_______为唯一氮源的培养基中加入
。(
培养基)
2、结果:细菌合成的
酶将尿素分解成
,使PH值
,酚红指示剂变
,初步鉴定该细菌能够分解尿素
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