课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教案设计（一等奖）

专题2

微生物的培养与应用

课题2

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

教学设计

一、教学目标

1.利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数

2.分析研究思路的形成过程，找出共性和差异性

3.形成无菌不在的概念，养成讲究卫生的习惯

二、教学重点

对土样的选取和选择培养基的配制

三、教学难点

对分解尿素的细菌的计数

四、教学方法

启发式教学

五、教学工具

多媒体课件

六、教学过程

教学内容

思考以下问题：

1.微生物的营养有哪些？

2.培养基的制备包括那哪些步骤？

3.无菌操作技术: 4.微生物接种的方法有哪些？

一．基础知识

尿素是一种重要的氮肥，农作物________（能，不能）直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为

，这是因为细菌能合成

。

二.

筛选菌株

提问:生物与环境之间的关系?

生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用特殊的培养基能筛选出特殊的微生物吗? 本课题实验使用的培养基的特点与功能是什么呢? 三.

统计菌落数目

常用来统计样品中活菌数目的方法是

。

1.为什么是活菌数?怎么计算? 在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。

除此之外，

显微镜直接计数

也是测定微生物数量的常用方法

四.设置对照

1.怎么设置对照说明培养基是无菌的? 2. 怎么设置对照说明培养基发挥了选择功能? 3. 怎么设置对照说明菌落数是有效的? 五.实验设计: 1.有哪些重要环节? 取样

稀释

涂平板

培养与观察

计数

鉴定

1 学生活动

复习微生物培养的基础知识

学生阅读课题背景交流表述尿素的特点及作用

阅读筛选菌株,思考问题,回答.

阅读后思考回答问

2.各环节需要哪些工具? 3.操作时注意的问题? 土壤微生物主要分布在距地表3～8cm的近中性土壤中，约70％～80％为细菌。

分离不同的微生物采用不同的稀释度，其原因是___________________，其目的是保证获得______________________的平板。细菌稀释度为_________，放线菌稀释度为_________，真菌稀释度为_________。

培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌一般在_________℃培养1～2d，放线菌一般在________℃培养5～7d，霉菌一般在_________℃的温度下培养3～4d。

取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。

1）应在火焰旁称取土壤

10 g。将称好的土样倒入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，塞好棉塞。

2）在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行。

3）实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。

4)为了提高效率，在操作时更加有条不紊，应当事先规划时间。

4.怎么鉴定? 在以

尿素

为唯一氮源的培养基中加入

酚红

指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变

红

，说明该细菌能够

分解尿素

。

课堂总结：

人为

有利于目的菌株生长

土壤

分离筛选微生物的原理

条件

抑制或阻止其他微生物生长

中尿

素分

稀释涂布平板法

解菌

微生物计数方法与原理

显微镜直接计数

的分

对照设置与重复设置

离与

计数

实验方案

实验操作

结果与分析

实验设计

题

分析思考和回答.

阅读分析思考和回答.

引导学生归纳记忆

1.使用选择培养基的目的是（

）

A.培养细菌

B.培养真菌

C.使需要的微生物大量繁殖

D.表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别

2.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是(

)

A.CO2和N2

B.葡萄糖和NH3

C.CO2和尿素

D.葡萄糖和

课堂练习

尿素

3.下列说法不正确的是（

）

A.科学家从70－80度热泉中分离到耐高温的TaqDNA聚合酶

2

B.统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5，以M3作为该样品菌落数的估计值

C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度

D.同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多。

4.酵母菌能在青霉素的环境中生存而细菌一般不能，为培养和分离出酵母菌并淘汰杂菌，常在培养基中加入（

）

A.较多的氮源物质

B.较多的碳源物质

B. C.青霉素类药物

D.高浓度食盐 5. 用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是

A．未接种的选择培养基

B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基

C．接种了的选择培养基

D．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基

6. 请选出下列正确的取样培养操作步骤

①土壤取样

②称取10g土壤取出加入盛有90ml无菌水的锥形瓶中

③吸取0.1ml进行平板涂布

④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度

A．①

②

③

④

B．①

③

②

④

C．①

②

④

③

D．①

④

②

③

7.下列关于微生物分离和培养的有关叙述，错误的是(

) A．微生物培养前，需对培养基进行消毒

B．测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法

C．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度

D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源

8.可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是(

) A．以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂

B．以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂

C．以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂

D．以尿为唯一氮源的培养基加入双缩脲试剂

七．教学反思：

本节课可以从尿素在农业上的重要应用切入，介绍能分解尿素的细菌，进而说明这种细菌的作用是能够合成分解尿素的酶。在教学过程中，可以联系生产生活实际，使学生对尿素以及分解尿素的细菌形成一定的感性认识。同时通过课题背景的介绍，可以进行STS教育。对于实验中的对照原则，可以指导学生分组讨论，在掌握微生物分离技术的同时巩固实验设计的基本原则。

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