课题3　分解纤维素的微生物的分离第二课时教学实录

玉燕中学电子文档教案

课题名称：分解纤维素微生物的分离

设计者：高二生物备课组

教材版本

章节名称

授课时间：

授课教师

知识目标

1．简述纤维素酶的种类及作用

2.从土壤中分离出分解纤维素的微生物

3.掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术

能力目标

张雪美

新人教版

年级科目

高二生物选修1

分解纤维素的微生物的分离

2018年3月29日 第 5 周 星期三

授课班级

高二(15)班

类别：【原创】

教学目标

1.分析分离分解纤维素的微生物的实验流程，弄懂实验操作的原理

情感目标

1.领悟科学探究的方法，发展科学思维和创新能力

重点

难点

教具

主要教学法

从土壤中分离分解纤维素的微生物

从土壤中分离分解纤维素的微生物

多媒体课件

讨论法和讲授法相结合

教学过程

一、复习导入：

纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质。植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。其中棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。对人有很大的价值。清除肠道内毒素物质，有肠道清道夫的美称。保持苗条身材。平衡膳食结构。有助于糖尿病、冠心病、高血脂症的预防等。并能作为生物燃料。

设问：人能不能对纤维素消化吸收？牛等反刍动物呢？为什么？

（设计意图：介绍纤维素的作用，激发学生兴趣，并通过设问解疑引入本节课题：分解纤维素微生物的分离）

二、新授讲授

（一）纤维素酶的组成及作用

纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶(外切酶)、CX酶(内切酶)和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。

1

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设问：如何证明纤维素酶能够分解纤维素？

（二）实验：纤维素酶分解纤维素的实验

方法：滤纸崩溃法

①取二支20mL的试管,各加入一张滤纸条

②各加入pH4.8，物质量为0.1mol/L的醋酸－醋酸钠缓冲液11ml和10ml在乙试管中加入1mL纤维素酶

③两支试管固定在锥形瓶中，放在140r/min的摇床上振荡1h,观察滤纸条的变化

甲 乙

讨论：乙试管的滤纸条为什么会消失？甲试管的作用是什么？

（三）纤维素分解菌的分离纯化

思考：本实验的流程与课题2中的实验流程有哪些异同？（选择培养） （四）纤维素分解菌的选择培养 a.旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？

b.这个培养基对微生物是否具有选择作用？如果有，是如何进行选择的？

c.你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用。

d.为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？

2

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（五）纤维素分解菌的筛选原理

1.方法：刚果红染色法

2.原理：刚果红（CR)能与纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中就会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，这样我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

（六）纤维素分解菌的鉴别

3.鉴别的过程

（1）制备鉴别培养基:

（2）涂布平板：将稀释度为104～106的菌悬液各取0.1ml涂布在培养基上，30℃倒置培养。

（3）挑取产生明显的透明圈的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。

（4）接种到纤维素分解菌的选择培养基上，在30℃－37℃培养，可获得纯化培养。

4.刚果红染色法：

方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应。

方法二：在倒平板时就加入刚果红。

〖旁栏思考5〗这两种方法各有哪些优点与不足？

◎方法一加入中NaCl溶液的作用？

漂洗作用，洗去与纤维素结合不牢的刚果红，以免出现的透明圈不够清晰。

（七）课题延伸

本课题对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选，但是这只是分离纯化的第一步。为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验。

纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵两种。

纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。

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三、课堂小结

四、比较

板书设计

课题3 分解纤维素的微生物的分离

1.基础知识 2．实验设计

3．结果分析与评价

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