复习与测试第二课时教案

专题五 DNA和蛋白质技术

课题1 DNA的粗提取和鉴定

一、考纲要求

1、理解DNA的理化特性及根据其理化特性而提取和鉴定的原理，初步掌握DNA的粗提取和鉴定方法。

2、理解相关溶液的作用机理，培养学生的分析能力，通过实验使学生能够简述科学探究的基本过程。

3、通过探索培养科学的质疑精神和创新精神；通过实验结果，学生树立生命物质性的观点。

二、教学重点和难点

教学重点：

提取DNA的相关原理和步骤

教学难点：

提取DNA的相关原理和步骤

三、教学方法

讲授法、问题引导法

四、教学用具

教学课件

五、教学过程

（一）.导入新课

蛋白质的变性和盐析

（二）、提取生物大分子的基本思路

1、学生完成学案的内容并说出提取大分子的思路。

2、实验原理：

屏幕展示坐标图并分析：

引导学生分析坐标图曲线说出盐析法提取DNA的原理。

3.DNA的粗提取实验原理

1）不同浓度NaCl中DNA溶解度不同。 2）DNA与其他细胞成分在酒精中溶解度不同，DNA不溶于酒精，细胞中某些蛋白质则溶于酒精。

3）DNA和蛋白质对酶耐受性不同：酶的专一性——蛋白酶水解蛋白质。但是对DNA没有影响。

4）DNA和蛋白质对高温耐受性不同：蛋白质、DNA热稳定性不同。大多数蛋白质不能忍受60～80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。

5）DNA和蛋白质对洗涤剂耐受性不同：洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。

提取DNA的原理包括DNA的溶解性和耐受性两个方面。

4.实验材料

提出问题：“DNA主要存在于什么结构上？”“如何提取DNA？”“选什么材料好？”

学生讨论：实验材料的选择原因。

达成共识：

1、适宜材料：选动物细胞，易打破细胞结构[来源:学_科_网Z_X_X_K]

2、破坏细胞膜、核膜结构，得核物质。

3、将DNA与蛋白质等物质分开，得DNA 4、去掉DNA中杂质，提纯DNA。

（三）、以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取

问题导思：

为什么用鸡血细胞做实验材

能否选用牛、羊、马血做实验材料？为什么？

提取DNA的具体步骤

（1）、制备鸡血细胞液 （2）、破碎细胞，释放DNA （3）、溶解细胞核内的DNA （4）、DNA的析出——提取

（5）、DNA的初步纯化——提纯 （6）、DNA的鉴定

为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？

（1）、用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质；

（2）、用低盐浓度使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。

因此，通过反复溶解与析出DNA，就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。

DNA的初步纯化——提纯：如果提取的DNA量不够多且其中含有较多杂质，或者加入溶液和搅拌等操作过程不规范，都会导致实验现象不明显，常常使制取的DNA粗制品不能显示出DNA的本色──白色。

学生讨论：方案二与方案三的原理有什么不同？

（四）DNA的鉴定

1、二苯胺法：

DNA与二苯胺沸水浴呈现蓝色。鉴定时溶液蓝色的深浅，与溶液中DNA含量的多少有关。 2、甲基绿染色法：

甲基绿与DNA反应呈绿色。

3、电泳法：

适合鉴定纯度较高的DNA。

六、小结：

投影展示实验设计思路：

鸡血细胞液①aDNA 释放

②bDNA与蛋白质的分离

③cDNA析出④dDNA浓缩（提纯）

实验结论：细胞中有DNA，DNA遇二苯胺试剂在沸水浴中变蓝色。

学生说出：两次蒸馏水，三次过滤，两次析出，六次搅拌发生的步骤，作用或目的

[七、板书设计

专题五

课题1 DNA的粗提取与鉴定

一、提取生物大分子的基本思路

二、以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取

1、制备鸡血细胞液 2、破碎细胞，释放DNA 3、溶解细胞核内的DNA 45、DNA的初步纯化——提纯 6三、提取DNA的其它方案

、DNA的析出——提取

、DNA的鉴定