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课题3分解纤维素的微生物的分离学习目标1.了解纤维素与纤维素酶。2.理解纤维素分解菌的筛选原理。(重点) 3.简述从土壤中分离出分解纤维素的微生物的方法。预先提纲1.纤维素(1)元素组成:C、H、O三种元素。(2)组成单体:葡萄糖。(3)种类:除天然纤维素外,还有水溶性的羧甲基纤维素钠、不溶于水的微

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课题3 分解纤维素的微生物的分离课堂实录及点评

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课题3 分解纤维素的微生物的分离课堂实录及点评

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正文

课题3

分解纤维素的微生物的分离

学习目标

1.了解纤维素与纤维素酶。

2.理解纤维素分解菌的筛选原理。(重点) 3.简述从土壤中分离出分解纤维素的微生物的方法。

预先提纲

1.纤维素

(1)元素组成:C、H、O三种元素。

(2)组成单体:葡萄糖。

(3)种类:除天然纤维素外,还有水溶性的羧甲基纤维素钠、不溶于水的微晶纤维素等。

2.纤维素酶

(1)组成:纤维素酶是一种复合酶,包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶三种组分。

(2)作用

C1酶、CX酶葡萄糖苷酶纤维素―――――――→纤维二糖―――――――→葡萄糖

3.纤维素分解菌的筛选

(1)方法

刚果红方法一:先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应

染色法方法二:在倒平板时就加入刚果红(2)原理:

刚果红形成红色+――→复合物

纤维素培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,据此筛选

教学过程

[合作探讨]

探讨1:草食性动物是怎样消化食物中的纤维素的?

提示:反刍动物的瘤胃中生活着大量的可以分解纤维素的微生物。微生物能够产生纤维素酶,最终将纤维素分解成葡萄糖。

探讨2:培养基中出现透明圈一定是纤维素分解菌的作用吗?

提示:不一定。刚果红与多糖类化合物产生红色复合物,若多糖为淀粉,产生淀粉酶的微生物也可使培养基产生透明圈。

[思维升华]

1.实验原理

即可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

2.两种刚果红(CR)染色法的比较

方法一

培养基经涂布培养长出菌落→覆盖质量浓度为1 mg/mL10~15 min后的CR溶液―――――→倒去过程

CR溶液→加入物质的量浓度为1 mol/L的NaCl溶液15 min后――→倒掉NaCl溶液→出现透明圈

区别

优点

缺点

先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应

显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用

倒平板时就加入刚果红

操作简便,不存在菌落混杂问题

配制质量浓度为10 mg/mL的CR溶液→灭菌→按照每200 mL培养基加入1 mL的比例加入CR溶液→混匀→倒平板→接种后培养→出现透明圈

方法二

操作繁琐,加入刚果红溶液会①由于在纤维素粉、琼脂和

使菌落之间发生混杂

土豆汁中都含有淀粉类物质,可以使能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应

②有些微生物具有降解色素的能力,长时间培养会降解刚果红,从而形成明显的透明圈,这些微生物与纤维素分解菌不易区分

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