课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教案1

高二生物 SW-17--02-38 探索的旅程不在于发现新大陆，而在于培养新视角。

《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》导学案

编写人：吕自军

审核人：高二生物备课组 编写时间：2018-3-19 学习小组编号___________ 姓名___________ 【学习目标】

1.能掌握实验室中微生物筛选的原理

2能掌握土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的方法

【重点难点】：能掌握土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的方法

【学法指导】：

预习法、自学法、探究法

【学习过程】 一、自主学习：

1、尿素[CO(NH2)2]——重要的农业氮肥。只能被土壤中细菌分解为NH才能被植物吸收利用。

3

细菌脲酶2、 CO(NH2)2 + H2O CO2+2NH3

（一）筛选菌株（研究思路）：

1、实例----耐高温DNA聚合酶的寻找

美国科学家布鲁克（1966年）--在美国黄石公园的一个热泉中发现耐热细菌。这说明寻找菌株要到期相应的 中寻找。

2、实验室中微生物的筛选原理

人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。

要分离一种微生物，必须根据该微生物的特点，包括营养、生理、生长条件等，采用选择培养分离的方法，或抑制使大多数微生物不能生长，或造成有利于该菌生长的环境，经过一定时间培养后使该菌在群落中的数量上升，再通过平板稀释等方法对它进行纯培养分离。

3、选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。

二 合作探究

1.见P22页的培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质？ 碳源：______ _____ 氮源： 2、此配方能否筛选出产生脲酶的细菌？为什么？

3. 统计菌落数目有哪几种方法？统计原则是什么？

4. 统计结果统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，为什么？

5.在对照实验中，设置对照的目的和步骤是什么？

6.怎样进行土壤取样？要注意什么？微生物样品稀释到什么程度？

7.微生物培养的温度和时间的要求是什么？ 8.鉴定分解尿素的细菌的培养基是哪种？原理是什么？

高二生物 SW-17--02-38 探索的旅程不在于发现新大陆，而在于培养新视角。

【当堂训练】

1：土壤中的细菌能分解尿素，是因为它们能合成一种(

) A．尿素酶 B．脲酶 C．蛋白酶 D．肽酶

2：在培养基中加入尿素(惟一氮源)，以分离出能分解尿素的细菌，这种加入尿素的培养基在功能上属于(

) A．选择培养基

B．固体培养基 C．液体培养基 D．半固体培养基 3：实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应，用3种细菌在事先准备好的琼脂平板上画3条等长的平行线(3条线均与图中的链霉素带接触)，将平板置于37 ℃条件下恒温培养3天，结果如图所示。从实验结果分析，以下叙述不正确的是(

) ．A．链霉素能阻止结核菌的生长

B．链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效

C．链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效

D．链霉素可以用于治疗伤寒病人

4564：测定土壤中细菌数量一般选用10、10和10倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的234数量一般选用10、10和10倍稀释，其原因是(

) A．细菌个体小，真菌个体大 B．细菌易稀释，真菌不易稀释

C．细菌在土壤中数量比真菌多 D．随机的，没有原因

5：用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是(

) A．未接种的选择培养基 B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基

C．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基 D．接种了的选择培养基

6：通常用来作为菌种鉴定的重要依据是(

) A．菌落 B．细菌形态 C．细菌体积 D．细菌结构

7：下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是(

) A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水

B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、水

C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、水

D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水

8：在涂布平板操作时错误的是(

) A．将涂布器在酒精灯火焰上灼烧，直到烧红 B．取少量菌液滴加在培养基表面

C．将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃待酒精燃尽后，冷却8 s～10 s再用

D．涂布时可转动培养皿，使涂布均匀

9：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养能分解尿素的细菌后，指示剂的颜色是(

) A．蓝色 B．红色 C．黑色 D．棕色

10：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时又能抑制或者阻止其他种类微生物生长的培养基称做(

) A．鉴别培养基 B．加富培养基 C．选择培养基 D．基础培养基

11：分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是(

) ①加尿素

②不加尿素

③加琼脂

④不加琼脂

⑤加葡萄糖

⑥不加葡萄糖

⑦加硝酸盐

⑧不加硝酸盐

A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧ C．①③⑤⑧ D．①④⑥⑦

12：在寻找目的菌株时，要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找，下列不属．于厌氧细菌生存环境的是(

) A．土壤深层 B．人或动物体内寄生 C．真空 D．池塘淤泥

13：下列是关于检测土壤中细菌总数实验操作的叙述，其中错误的是(

) A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板

456B．取10、10、10倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上

C．将实验组和对照组平板倒置，37 ℃恒温培养24～48小时

D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数

14：可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是(

) A．以尿素为惟一氮源的培养基中加入二苯胺试剂

B．以尿素为惟一氮源的培养基中加入酚红指示剂

C．以尿素为惟一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂 D．以尿素为惟一氮源的培养基中加入双缩脲试剂