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5.3血红蛋白的提取和分离教学设计一、样品的处理和粗分离(合作学习)实验步骤①洗涤红细胞②释放血红蛋白③分离血红蛋白溶液④透析初步得到血红蛋白溶液去掉液体中的小分子物质实验目的获取较纯净的红细胞破裂红细胞,释放血红蛋白分离低渗溶液中红细胞破裂;甲苯溶解膜脂,加速细胞破裂(相似相溶原理)通过离心将密度

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课题3 血红蛋白的提取和分离多媒体教学设计及其点评

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课题3 血红蛋白的提取和分离多媒体教学设计及其点评

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正文

5.3血红蛋白的提取和分离

教学设计

一、样品的处理和粗分离(合作学习)

实验步骤

①洗涤红细胞

②释放血红蛋白

③分离血红蛋白溶液

④透析

初步得到血红蛋白溶液

去掉液体中的小分子物质

实验目的

获取较纯净的红细胞

破裂红细胞,释放血红蛋白

分离

低渗溶液中红细胞破裂;甲苯溶解膜脂,加速细胞破裂(相似相溶原理)

通过离心将密度不同的物质分离

小分子物质容易透出透析袋

透析(12小时)

离心(较高速)

试管溶液分为4层

透析袋中物质的颜色更红

实验原理

通过离心将密度不同的物质操作方法

低速离心,去除上清液,反复加生理盐水并离心

加蒸馏水,再加甲苯,无明显现象

磁力搅拌器充分搅拌

结果判断

直到上清液未呈现黄色为止

二、凝胶色谱柱的装填(合作学习)

步骤

①

固定色谱柱

②

计算称量凝胶

③

配制悬浮液

④

装填悬浮液

⑤

缓冲液洗涤平衡

操作要求

色谱柱垂直固定在支架上

根据色谱柱体积计算凝胶用量

凝胶颗粒+蒸馏水→充分溶胀

凝胶颗粒+洗脱液→沸水浴

一次性缓慢倒入;轻轻敲打

立刻用磷酸缓冲液洗涤平衡12h

三、样品的加入与洗脱(合作探究)

请将操作步骤补充完整

1、打开下端出口,调节缓冲液面下降到与凝胶面平齐

2、滴加1ml透析样品到色谱柱的顶端

3、样品渗入凝胶床

4、等样品完全进入凝胶层后,关闭下端出口

5、小心加入磷酸缓冲液到适当高度,连接缓冲液洗脱瓶

6、打开下端出口进行洗脱

7、收集流出液,每5ml收集一试管

请结合操作步骤填写屏幕上对应的编号

四、实验流程归纳(知识总结)

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