课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数PPT专用教学设计内容

课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

项目

课题

内容

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

1.从土壤中分离出能够分解尿素的细菌

知识目标

修改与创新

2.统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌

通过研究，培养学生分析和合作交流的能力。

形成无菌不在的概念，养成讲究卫生的习惯。

教学

目标

能力目标

情感目标

教学重点：对土样的选取和选择培养基的配制

重、

难点：对分解尿素的细菌的计数

难点

教学1.实验相关器材准备；

准备

2.完成导学案。

课时1课时

安排

〖引入〗

尿素[CO(NH2)2]——重要的农业氮肥。

只有被土壤中细菌分解为NH3才能被植物吸收利用。

检查导学案，对学生的预习有初步掌握。

教学

过程

1

一、实验室中微生物的筛选原理

人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。

【思考】

【小组分享交流】

（1）该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质？

——①碳源：葡萄糖、尿素 ②氮源：尿素

（2）此配方能否筛选出产生脲酶的细菌？为什么？

——原则上能。只有产生脲酶的细菌能利用尿素作为氮源而生存。

（一）选择培养基

在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基

结果：培养一定时间后，该菌数量上升，再通过稀释涂布平板等方法对它进行纯化培养分离。

(二)统计菌落数目

1.方法：运用稀释涂布平板法来间接统计样品中的活菌数。

2.原理：1个菌落←1个活菌

3.注意事项

①选择菌落数在30～300的平板上计数。

②需培养计算出三个或三个以上的平板菌落求平均数。

③统计的菌落往往比活菌的实际数目低。

【讨论】

阅读课本P22，并讨论你认为这两位同学的作法正确吗？如果有问题，错在哪？

——第一位同学：没有重复实验（至少涂布3个平板）

——第二位同学：A组结果误差过大，不应用于计算平均值

【例】某同学在稀释倍数为106

的培养基中测得平板上菌落数的平均数为234，

那么每克样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1ml）

(

) A. 2.34×108

B. 2.34×109

C. 234

D. 23.4 每克样品中的菌株数

=（C÷V）×M=（234÷0.1）

×106=2.34 ×109

C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数

V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL）

M代表稀释倍数

合作探究，精讲点拨

2

(三)设置对照实验

设置对照的目的：排除实验组中非测试因素对试验结果的影响，提高实验结果的可信度。

阅读P22～23页“（三）设置对照”一段讨论教材中提出的问题。

1.A同学出现此结果的可能原因？

⑴土样不同

⑵培养基污染

(或混入了其他的含氮物质) 2.设置对照实验，帮助A同学排除上述两个可能影响实验结果的因素？

方案一：由其他同学用与A同学相同土样进行实验

结果预测：如果结果与A同学一致，则证明A无误；如果结果不同，则证明A同学存在培养基的配制有问题。

方案二：将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养，作为空白对照，以证明培养基是否受到污染。

【总结】

这个实例可以看出，实验结果要有说服力，对照的设置是必不可少。

二、实验设计

（一）土壤取样

1.优点：“微生物的天然培养基”；数量最大、种类最多；大约70%—90%是细菌

2.操作：从肥沃、酸碱度接近中性的湿润土壤中取样。先铲去表层土3cm左右，

再取样，将样品装入事先准备好的信封中。

（二）样品稀释涂布平板

【PPT】

（三）微生物的培养与观察

1.培养不同微生物往往需要不同培养温度。

细菌：30～37℃培养1～2d

放线菌：25～28℃培养5～7d

霉菌：25～28℃的温度下培养3～4d。

2.操作：在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。

3

选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。

不同种类的细菌形成的菌落，在大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等方面具有一度的特征，菌落特征可作为菌种鉴定的重要依据。

【PPT】

三、操作提示

[一]无菌操作

1、取土用的小铁铲的盛土样的信封在使用前都需要灭菌。

2、应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中，塞好棉塞。

3、在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁操作。

[二]做好标记

注明培养基种类、培养日期、平板培养样品的稀释度等。

[三]制定计划

四、结果分析与评价

1.培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出菌落？

——对照的培养皿无菌落说明培养基没有污染。牛肉膏培养基的菌落数目多余选择培养基的菌落数目，说明选择培养基已筛选出一些菌落。

2.获得某一稀释度下，菌落数30～300的平板，在这以稀释度下是否至少有两个平板的菌落数相接近？

——相接近，说明操作成功。

五、课题延伸

1.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素。

2.测定饮水中大肠杆菌数量的方法是将一定体积的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到

伊红-美蓝

培养基上培养，大肠杆菌菌落呈现黑色，通过记算得出水样中大肠杆菌的数量。

六、巩固练习

【小组展示实验结果】

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一、实验室中微生物的筛选原理 三、结果分析与评价

二、实验设计 板书

设计

教学

本实验考查的是学生的综合能力，因此有必要培养学生主动搜寻资料，合作交流的意识。警惕老师让学反思

生学，让学生做，而是真正让学生动起来，学起来。

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