复习与测试PPT及专用教学设计内容

实验室培养教学设计

《专题一

微生物的培养与分离》的具体实施计划& 微生物的实验室培养教学设计

实施计划

课时安排及计划

课题名称

微生物的实验室培养

分离土壤中分解尿素的细菌

分解纤维素的微生物的分离

课时数

说明

配养基的基本知识及配制方法1；配制培养基及倒平板1；纯化大肠杆菌和涂布接种1，观察分析1

基本原理及实验设计1；样品稀释及涂布接种1；对菌落进行统计及实验的分析与讨论1；在第二和第三课时之间需要间隔2天时间

基本原理及实验设计1；样品稀释及涂布接种1；对菌落进行统计及实验的分析与讨论1；在第二和第三课时之间需要间隔2天时间

4

3

3

提前准备好实验仪器、设备和药品

课题名称

微生物的实验室培养

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

分解纤维素的微生物的分离

实验仪器和设备

培养皿、试管、锥形瓶、量筒、酒精灯、电子天秤、高压蒸汽灭菌锅、移液管、接种环、涂布器、恒温箱、干热灭菌箱、小铁铲等

实验试剂或药品

牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、盐酸、氢氧化钠、琼脂等

除配制牛肉膏蛋白胨培养基所需物质外，增加KH2PO4

、NaHPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、酚红等

除配制牛肉膏蛋白胨培养基所需物质外，增加纤维素、NaNO3、Na2HPO4·7H2O、KH2PO4、KCl、酵母膏、水解酪素、CMC-Na(羧甲基纤维素钠)、土豆汁、刚果红等

说明

干热灭菌箱能够迅速地将洗干净的培养皿和试管烘干，小铁铲用于铲土

安排好教学班的实验顺序

微生物实验涉及较多的实验仪器，而且实验时需要课内和课外相结合，如实验室培养需要学生在课堂上完成两项重要的操作步骤，一是配制培养基并倒平板；二是接种操作。平板灭菌工作由于需要较长的时间，因此只能由教师在课间完成。为保证每位学生都能亲手操作，保证各个教学班能在有限时间内完成实验任务，教师要合理安排好教学班的实验顺序。

做好课后的观察与记录

配制培养基和接种操作可以在课堂上完成，但接种后的平板放入培养箱中需要培养2～3天，这期间可安排生物科代表或部分小组长进行定期观察，并做好计录，以便及时让其他学生观察到自己的实验成果。特别需要说明的是，如果学生不能及时观察，培养的时间过长，很多菌落就会联成一片，计数时就无法做到准确有效。

微生物的培养教学设计

教学目标：

（一）知识目标网]

了解有关培养基的基础知识

；掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线

法等基本操作技术

（二）能力目标

分析实验思路的确定和形成的原因，分析实验流程，对比前面的实验设计，归纳共性，分析差异，增加印象

（三）情感目标

形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神

教学重点：

无菌技术的操作

教学难点：

无菌技术的操作

教学过程：[来源:学_科_网Z_X_X_K][来源:学#科#网]

（一）导入

美媒：中国尝试用细菌吃掉大连港漏2010年7月29日新闻：上周中国北方大连港两根输油管发生爆炸后，北京一家生物科技公司提供了23吨吃油细菌，用于帮助清理港口周围183平方公里的浮

（二）具体过程

知识背景：

1

培养基的种类包括固体培养基和

液体

培养基等。

思考1：琼脂的化学成分是什么？在配制培养基中时的作用是？

【补充】培养基的类型及其应用：

培养基类型

固体培养基

配制特点

加入琼脂较多

加入琼脂较少

不加入琼脂

由已知成分配制而成，培养基成分明确

添加某种指示剂或化学药剂

添加（或缺少）某种化学成分

标准

主要应用

菌种分离,鉴定,计数

菌种保存

工业生产，连续培养

菌种分类、鉴定

菌种的鉴别

菌种的分离

物理性质

半固体培养基

液体培养基

化学组成

目的用途

合成培养基

天然培养基

鉴别培养基

选择培养基

由天然成分配制而成，培养基成分不明确

工业生，产降低成本

2

培养基的化学成分包括水、

无机盐

、

碳源

、

氮源

四类营养成分。

思考2：从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？

【补充】碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。

氮源：如N2、

氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。

3

培养基除满足微生物生长的 pH 、

特殊营养物质和氧气等要求。

思考3：牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供什么营养物质？

思考4：培养乳酸杆菌时需要添加

什么物质？

培养霉菌和细菌时分别需要怎样调节pH？

【补充】生长因子：某些微生物正常生长代谢过程中必须从培养基中吸收的微量有机小分子，如某些氨基酸、碱基、维生素等。

阅读“无菌技术”，讨论回答下列问题：

4

获得纯净培养物的关键是什么？

5

无菌技术包括哪些？

6

比较消毒和灭菌（填表）

比较项

理化因素的作用强度

消毒

灭菌

较为温和

强烈

消灭微生物的数量

部分生活状态的微生物

全部微生物

芽孢和孢子能否被消灭

不能

能

思考5：无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是？

7

消毒方法：

（1）日常生活经常用到的是煮沸消毒法；

（2）对一些不耐高温的液体，则使用巴氏消毒法（作简要介绍）；（3）对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒石炭酸或煤酚皂等溶

液以增强消毒效果，然后使用紫外线进行物理消毒。

（4）实验操作者的双手使用酒精

进行消毒；

（5）饮水水源用

氯气

进行消毒。

8灭菌方法：

（1）接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法；

（2）玻璃器皿、金属用具等使用

干热灭菌法，所用器械是干热灭

菌箱；

（3）培养基、无菌水等使用

高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸

汽灭菌锅

。[来源:学科网ZXXK]

（4）表面灭菌和空气灭菌等使用

紫外线灭菌法，所用器械是紫外

灯。

思考6：对接种环灭菌时要用酒精灯的哪一个层火焰灼烧可能伸入试管或培养皿的部位？

思考7：利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的

是什么？

思考8：物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是？

【补充】培养基的配制原则：

①目的要明确

②营养要协调

③pH要适宜

实验操作

倒平板

接种划线

思考1：锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么？

思考2：倒平板的目的是？

思考3：若皿盖和皿底之间粘有培养基，则该平板能否培养微生物？为什么？

思考4：配制斜面培养基中，试管要加塞棉塞的目的是？

思考5试管培养基形成斜面的作用是？

补充

取菌种前灼烧接种环的目的是消灭接种环上的微生物；除第一次划线外，其余划线前都要灼烧接种环的目的是消灭接种环上残留菌种；取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行，其目的是防止高温杀死菌种；最后灼烧接种环的目的是防止细菌污染环境和操作者。

在第1次划线后都从上次划线末端开始的目的是获得由单个细菌形成的标准菌落。

稀释涂布平板法：将菌液进行一系列梯度稀释，并将不同稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培养基上进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的标准菌落。

系列稀释操作：

①取盛有9mL水的无菌试管6支，编号101、102、103、104、105、106。

②用灼烧冷却的移液管吸取1mL菌液注入编号为101试管中，并吹打3次，使之混匀。

③从101倍液中吸取1mL菌液注入到编号为102试管内吹打均匀，获得102倍液。依此类推。

结果分析与评价

1．培养未接种培养基的作用是对照，若有菌落形成，说明培养基灭菌不彻底。

2．在肉汤培养基上，大肠杆菌菌落呈白色，为圆形，光滑

有光泽，边缘整齐。

3．培养12h和24h后的菌落大小不同（相同、不同）；菌落分

布位置相同（相同、不同）。原因是时间越长，菌落中细菌繁殖越多，菌落体积越大；菌落的位置不动，但菌落数增多。

思考1：在某培养基上出现了3种特征不同的菌落，原因有哪些？

思考2：频繁使用的菌种利用临时保藏法保存，长期保存菌种的方法是甘油管藏法。前者利用固体斜面培养基培养后，保存在4℃冰箱中，每3～6个月转种培养一次，缺点是什么？后者将菌种与无菌体积等量混合后保存在多少度冷冻箱中？

（三）课堂总结、点评

课后探究

１、收集生活中与微生物有关的实例，并通过所学知识对其进行

解释

２、我们打针输液时，首先要用酒精擦拭针刺处，为什么？