复习与测试教学设计

选修1 微生物的培养 专题练习

1．自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。

实验步骤：

(1)制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。

(2)为了得到更加准确的结果，你选用

法接种样品。

(3)适宜温度下培养。

结果分析：

(1)测定大肠杆菌数目时，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确可信的是

，其理由是

__。

A．一个平板，统计的菌落数是230 B．两个平板，统计的菌落数是220和260，取平均值240 C．三个平板，统计的菌落数分别是210、50和520，取平均值260 D．四个平板，统计的菌落数分别是210、300、240和250，取平均值250 (2)一同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每毫升样品中的菌落数是________(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL)。

(3)用这种方法测定的大肠杆菌密度，实际活菌数量要比测得的数量________，因为________________________________________________________________________。

2．白僵菌高孢粉是国家林业局推广的高效生物杀虫剂之一，应用于多种林木和农作物害虫的防治。白僵菌分生孢子附着在寄主表皮、气孔或消化道上，遇适宜条件开始萌发，生出芽管。同时产生脂肪酶、蛋白酶、几丁质酶等溶解昆虫的表皮，通过芽管入侵虫体，在虫体内生长繁殖，消耗寄主体内养分，产生各种毒素，形成大量菌丝和孢子，布满虫体全身。请回答下面的问题：

(1)从自然菌样中筛选较理想生产用菌种的一般步骤是：采集菌样

富集培养

性能测定。

白僵菌的菌样应从

处采集。

(2)分离白僵菌菌种的培养基属于

培养基。在配制白僵菌培养基时加入蔗糖、硫酸铵、硝酸钾等成分，蔗糖属于

营养物质。

(3)白僵菌纯培养常用的接种方法是

和

。

(4)分离与培养过程中，培养基和接种工具都要进行

处理，利用高温可以使微生物的

等物质发生变性。

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3．为了探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如下表所示，实验步骤如下图所示。请分析回答问题：

KH2PO4

Na2HPO4

1.4g 2.1g MgSO4·7H2O 0.2g 葡萄糖

1g 尿素

10g 琼脂

15 g 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000 mL (1)简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理：

。

(2)培养基中加入尿素的目的是筛选

_，这种培养基属于

培养基。

(3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的

和

，实验中需要振荡培养，原因是

。

(4)转入固体培养基时，常采用

接种，获得单菌落后继续筛选。

(5)实验结束后，使用过的培养基应该进行

处理后，才能倒掉。

4．下图为分离并统计分解纤维素的微生物的实验流程，据此回答有关问题：

(1)要从富含纤维素的环境中分离纤维素分解菌，从高温热泉中寻找耐热菌，这说明____________________________________________________________________________________。

(2)某同学根据需要，配制了纤维素分解菌的培养基如下，整个实验过程严格执行无菌操作。

纤维素粉

5g NaNO3

1g Na2HPO4 ·7H2O 1.2g KH2PO4

0.9g MgSO4·7H2O 0.5g KCl 0.5g 酵母膏、水解酪素

适量

如果将其中的纤维素粉换成

，菌落数__________________________________ _______________________________________，即可说明选择培养基的作用。

(3)接种微生物最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，本实验宜采用

法，原因是____________________________________________________________________________。

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5．选择培养是微生物学中最强有力的技术手段之一。该技术主要是利用不同微生物间生命活动特点的不同，制定环境条件，使仅适应该条件的微生物生长旺盛，从而使其在群落中的数量大大增加，人们能够更容易地从中分离到所需的特定微生物。选择条件可根据所需分离的微生物的特点，从物理、化学、生物及综合多个方面进行选择，如温度、pH、紫外线、高压、光照、氧气、营养等许多方面。下图描述了采用选择方法从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。

(1)本实验所需培养基为

_，碳源为

。

(2)实验原理是

。

(3)①③重复培养的目的是

。

(4)⑤的菌落中大部分是降解

的微生物。

(5)⑥为

组，⑦为

组，设置⑥的目的是___________________________ ________________________________________________________________________。

(6)⑤⑥采用

_法，接种到⑥的培养基中，在操作过程中为防止污染应注意的事项是______________________________________________________________________________。

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选修1 微生物的培养 专题练习答案

1：实验步骤：(2)稀释涂布平板

结果分析：(1)D

在设计实验时，一定要涂布至少三个平板作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性；在分析实验结果时，要考虑所设置的重复组的结果是否相当

(2)2.34×108

(3)多

当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落

解析：本题考查微生物的计数方法，可从两种接种方法的优缺点和统计菌落数目时应注意的问题入手解答该题。为了得到更加准确的结果，应用稀释涂布平板法接种样品。(1)选取多个菌落数相差不大的平板计数，取其平均值。(2)234÷0.1×105＝2.34×108。(3)因为菌落可能由两个或多个细菌连在一起生长而成，所以实际活菌数量要比测得的数量多。

2：(1)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，pH升高，使酚红指示剂变为红色

(2)目的菌

选择

(3)尿素

葡萄糖

为目的菌提供氧气

(4)稀释涂布平板法(或平板划线法)

(5)灭菌

解析：尿素是培养基中的唯一氮源，因此原则上只有能够利用尿素的微生物才能够在此培养基上生长。由于细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，pH升高，故在以尿素为唯一氮源的培养基中加入的酚红指示剂将变成红色；这种培养基属于选择培养基，可筛选目的菌；目的菌生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的尿素和葡萄糖；振荡培养的目的是提供氧气；固体培养基培养时的接种方法常用稀释涂布平板法或平板划线法；倒掉培养基之前应对其进行灭菌处理。

3：(1)纯种分离

感病昆虫

(2)选择

碳源

(3)平板划线法

稀释涂布平板法(或稀释混合平板法) (4)灭菌

蛋白质和核酸

解析：选择培养基用于选择分离菌种。蔗糖属于微生物的碳源。微生物分离培养过程中，培养基、接种工具都要进行灭菌处理，其原理是高温使蛋白质、核酸变性而使细胞失去活性。

4：(1)根据目的菌株对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找

(2)葡萄糖

明显多于选择培养基上的菌落数

(3)稀释涂布平板

平板划线法难以根据稀释体积计算每克样品中的细菌数

解析：(1)因为纤维素分解菌与耐热菌有不同的生活习性，生活在不同的环境中，故要根据目的菌株对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。(2)因为葡萄糖是能被微生物直接利用的有机小分子，所以如果将其中的纤维素粉换成葡萄糖，纤维素分解菌及其他细菌会生长繁殖得更快，故菌落数明显多于选择培养基。(3)因为稀释涂布平板法要将菌液进行一系列的梯度稀释，故该法可根据稀释体积计算每克样品中的细菌数，而平板划线法则不能这样，所以本实验宜采用稀释涂布平板法。

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5：(1)选择培养基

对羟基苯甲酸

(2)利用以对羟基苯甲酸为唯一碳源的选择培养基，经富集培养，选择出能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物

(3)增大分解对羟基苯甲酸微生物的比例

(4)对羟基苯甲酸

(5)对照

实验

说明通过富集培养的确得到了欲分离的目标微生物

(6)单细胞挑取

接种环在火焰上灼烧灭菌，烧红的接种环在火焰旁冷却，同时打开皿盖挑取菌落接种到试管中，并塞好棉塞，接种环在火焰上灼烧，杀灭残留物

解析：选择培养又称为增殖培养，主要是利用不同微生物的生长繁殖对环境和培养基的特殊要求进行富集培养和分离。要从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物，必须根据该微生物的特点，采用以对羟基苯甲酸为唯一碳源的培养基进行选择培养。设置对照实验的目的是说明通过选择培养的确得到了欲分离的目标微生物。

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