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专题2 微生物的培养和应用课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数背景:不能直接被农作物吸收,它被细菌产生的酶分解成才可以被农作物直接吸收方程式:一、筛选菌株:例如:Taq酶在热泉中筛选培养基:本课题使用的是以为唯一氮源的培养基。二、统计菌落数目1、法。成功地统计菌落数目的关键是。公式:每克样品中的

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课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教案教学设计

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课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教案教学设计

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关键词:课题2 土壤中分�…教案教学设计

正文

专题2

微生物的培养和应用

课题2

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

背景:

不能直接被农作物吸收,它被细菌产生的

酶分解成

才可以被农作物直接吸收

方程式:

一、筛选菌株:

例如:Taq酶在热泉中筛选

培养基:本课题使用的是以

为唯一氮源的

培养基。

二、统计菌落数目

1、

法。成功地统计菌落数目的关键是

。

公式:每克样品中的菌落数=(C÷V)×M,C代表

,

V代表

,M代表

。

注:①选择菌落数为

的平板计数;

②统计的菌落数比活菌的实际数目

。原因是

。

2、 法。即血球板计数法

三、设置对照

1、目的:排除

组中

因素对实验结果的影响,提高实验的可信度。

2、设置对照:(目的)

(1)空白对照(相同条件下不接种):培养基是否有

。

(2)牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基对照(接种后):选择培养基是否有

作用。

★选择培养基上的菌落数较少。

四、实验设计

(一)土壤取样:一般要铲去3cm表层土,铁铲取样放入信封(铁铲信封都要灭菌)

(二)制备培养基:选择性培养基(以

为唯一氮源)和牛肉膏蛋白胨培养基

(判断选择培养基是否

)

(三)样品的稀释:

1、不同的微生物要采用不同的稀释度。

、如:细菌为104、105106,放线菌为103、104、105,真菌为102、103、104

。

2、每个稀释度需倒6个平板:4个选择性培养基,3个涂布,1个空白;

2个牛肉膏蛋白胨培养基,1个涂布,1个空白

3、分别取0.1 mL菌液接种到制备好的平板

①称取土壤和每一步稀释都应在火焰旁

②标记好培养皿、培养基种类、培养日期、

平板上样品的稀释度

(四)涂布培养及观察计数:

1、不同微生物需要不同的培养温度和时间

如:细菌

30~37℃

1~2d,

放线菌25~28℃

5~7d,

真菌

25~28℃

3~4d

2、选择菌落数在

之间、适于计数的平板

3、选取菌落数目

时的记录作为结果(防止因培养时间不足导致遗漏菌落数目)

4、统计并计算同一稀释度下3个平板菌落数目的平均数。

五、实验结果的分析、评价

1、空白对照(成功):对照培养基无菌落生长,无杂菌污染

2、选出菌落:牛肉膏蛋白胨培养基菌落数明显大于选择培养基

3、稀释成功:同一稀释度,获得30~300菌落数的平板,至少两个平板菌落数相近。

4、重复组实验结果相近

六、实验结果的鉴定

1、操作:在以_______为唯一氮源的培养基中加入

。(

培养基)

2、结果:细菌合成的

酶将尿素分解成

,使PH值

,酚红指示剂变

,初步鉴定该细菌能够分解尿素

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