课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数国家优质课一等奖

课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

一、课题目标

1、知识与技能

研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定。

2、过程与方法

分析研究实验设计思路。

3、情感、态度与价值观

培养学生微生物无处不在的生物理念，养成讲卫生的好习惯。

二、课题重点与难点

1、课题重点

对土样的选取选择培养基的配制。

2、课题难点

对分解尿素的细菌的计数。

三、教学方法

启发式教学

四、教学工具

多媒体教学

五、教学过程

1、

引入新课：

上节课我们已经学习了培养基的制备以及微生物的接种技术，这节课我们一起来学习对细菌的分离与计数。

2、

新课：（学生自主预习教材，完成基础知识填空）

一、研究思路

1．筛选菌株

尿素是一种重要的

肥，农作物不能直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为

和CO2，才能被植物利用，土壤中的这些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成

。可以利用这一特点，将其从土壤中筛选出来。

(1)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于______生长的条件(包括营养、

、pH等)，同时_____或

其他微生物生长。

(2)选择培养基：在微生物学中，将允许

的微生物生长，同时

和

其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。

点评：生物适应一定的环境，生物在适应环境的过程中，环境对生物也有一定的选择作用。所以可以通过配制选择培养基和控制培养条件对微生物进行选择。

思考1：在该培养基的的配方中，为微生物的生长提供碳源的是

，提供氮源的是

，琼脂的作用是

。

思考2：该培养基对微生物

（具有、不具有）选择作用。如果具有，它的选择机制是

。

2．统计菌落数目

(1)常用来统计样品中

数目的方法是___________ ________。即当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的

。通过统计平板上的

，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在

的平板进行计数。

通常统计出的菌落数比活菌的实际数目

。这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是

个菌落。因此，统计结果一般用

而不是活菌数来表

示。

(2)

也是测定微生物数量的常用方法。

(3)细菌的数目还可以通过

法来测定。例如，测定饮水中大肠杆菌的数量，可将

的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到

培养基上培养，大肠杆菌菌落呈现

色，可以根据培养基上

的数目，计算出水样中大肠杆菌的数量。在该实验中至少应取___个水样。

补充：显微镜直接计数法

思考3：从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计算方法是

。

思考4：利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是

。

思考5：第

二

位同学的结果接近真实值。你认为这两位同学的实验需要改进的操作是

。

3．设置对照

(1)设置对照的主要目的是排除实验组中___________对实验结果的影响，提高实验结果的

。例如为了排除培养基是否被杂菌污染了，需用__________________ ____________作为空白对照。

(2)对照实验是指除了

的条件外，其他条件都

的实验，其作用是比照实验组，排除任何其他可能原因的干扰，证明确实是所测试的条件引起相应的结果。

思考6：请设计本实验的对照实验组：

方案1：其他同学用A同学的土样进行实验。

方案2：A同学以不接种的培养基作为空白对照。

（学生自主学习填空之后，教师利用多媒体课件进行答案核对及更正）