附录4　常用的消毒灭菌操作方法优秀导入

《常用的消毒灭菌操作方法》教学设计

一、

教材分析

“常用的消毒灭菌操作方法”是新课程标准教材人教版生物选修1附录4的内容，是在前面学习了有关培养基配制基础上学习的。学生对于培养基的配制、培养基的作用、培养基的原料有所了解，通过本节的学习，让学生了解培养基配置完成之后如何进行灭菌。

二、

教学三维目标

1.

知识目标

（1）

了解消毒、灭菌的异同点

（2）

概述几种实验室常用的灭菌方法

2.

能力目标

（1）能够识别几种常用的灭菌仪器

（2）尝试在实验室中进行相应物品的灭菌操作

3.

情感目标

体验科学研究中严谨细致的科学态度以及科学家对真理不懈追求的科学精神，进一步激发学生辩证唯物主义世界观的树立。

三、

教学重点和难点

1.

教学重点

（1）消毒、灭菌的异同点

（2）实验室常用的灭菌操作方法

2.

教学难点

实验室常用的灭菌方法

四、

教学过程

导入：出示配置完成的培养基图片，提出问题：培养基配制完成后能直接用于微生物培养吗？学生阅读课本给出答案。（教学意图：培养学生科学思维能力）

1．基本概念

出示关于灭菌和消毒的基本概念，教师加以解释说明。提出问题：消毒和灭菌的异同点？实验室进行无菌操作的意义？（教学意图：培养学生提取处理信息的能力）

消毒（disinfection）：使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物，并不一定杀死细菌芽孢或孢子‘

灭菌（sterilization）：使用强烈的理化因素杀死物体内外所有微生物的方法，包括芽孢和孢子，达到无菌程度’

防腐（antisepsis）：体外防止或抑制细菌生长繁殖的方法，并不一定杀死微生物

无菌（asepsis）：不存在活菌的意思，多是灭菌的结果

无菌操作：防止细菌进入人体或者其他物品的操作技术

同学们学习以上概念，阅读课本，通过比较思考，得出消毒和灭菌的异同点。

2．消毒灭菌方法

介绍几种常用灭菌方法以及灭菌原理并且展示相关图片，学生阅读课本整理几种实验室常用灭菌方法的操作步骤。（教学意图：培养学生归纳总结学习能力）

物理灭菌法：热力灭菌法，辐射灭菌法，滤过除菌法，干燥与低温抑菌法

化学灭菌法：消毒剂杀菌

生物灭菌法：抗生素，细菌素，噬菌体

实验室常用的物理灭菌法中的热力灭菌和辐射杀菌以及滤过除菌法，本节中主要介绍热力灭菌以及辐射灭菌（紫外线灭菌）。

（1）热力灭菌法

灭菌原理：破坏菌体蛋白质与核酸，使其肽键断裂，蛋白质变形凝固，核酸解链崩裂，导致细菌死亡。

①

干热灭菌法

常用干热灭菌方法：焚烧，烧灼，红外线，干烤

A．焚烧，用焚烧炉燃烧，用于废弃污物、尸体等的灭菌；

B．烧灼，用火焰烧灼，用于接种环、接种针、试管口等的灭菌；

C．红外线，用红外线灭菌仪，应用电磁波热效应，用于医疗器械的灭菌；

D．干烤，用干热灭菌箱，用于玻璃器皿等耐高温的物品灭菌。

干热灭菌箱灭菌具体操作方法：装入待灭菌的物品

灭菌降温开箱取物

同学们阅读课本，思考回答问题：每一步的具体操作以及有哪些需要注意的细节？（教学意图：锻炼学生自主学习能力）

教师总结：第1步，装入待灭菌的物品，用牛皮纸或干净的报纸包裹严密待灭菌的物品，放入干热灭菌箱内。注意物品不能摆的太挤，以免妨碍热空气流通。同事，灭菌物品也不能与干热灭菌箱内壁的铁板接触，乙方包装纸烤焦起火；

第2步，干热灭菌160-170℃，当温度升到150℃时，保持3-4h；

第3步，关掉电源，自然降温；

第4步，等温度降到70℃以下后，取出灭菌物品。注意温度未降到70℃以前，切勿打开箱门，以免玻璃器皿炸裂。

②

湿热灭菌法

常用湿热灭菌方法：煮沸法，巴氏消毒法，间歇蒸汽灭菌法，高压蒸汽灭菌法

A．煮沸法，100℃沸水煮5-10分钟，用于饮水和食具的消毒；

B．巴氏消毒法，70-75℃

30分钟，或80℃

15分钟，用于牛奶、酒类的消毒（杀死病原菌，不破坏营养成分）

C．间歇蒸汽灭菌法，反复多次流动蒸汽灭菌，用于不耐高温、高压的物品

D．高压蒸汽灭菌法，高压蒸汽灭菌锅

103.4Kpa 121.3℃

15-20分钟，用于耐高温、耐湿物品的灭菌

教师：生物实验室最常用的湿热灭菌法就是高压蒸汽灭菌，采用高压蒸汽灭菌锅进行，如手提式高压蒸汽灭菌锅就是实验室常用的灭菌仪器之一。主要结构包括：安全阀（超过额定压力，释放压力）、压力表（指示压力显示）、固定螺栓（用于将锅盖固定在锅体上）、排气阀（排出锅内气体）、灭菌桶（盛放待灭菌的物品）。

同学们阅读课本，思考回答问题：高压蒸汽灭菌法，每一步的具体操作以及有哪些需要注意的细节？（教学意图：锻炼学生自主学习能力）

教师：介绍高压蒸汽灭菌锅的操作步骤。

灭菌锅内加水

放入待灭菌物品加盖加热灭菌锅切断电源，降温

教师总结：第2步，放入待灭菌的物品，不要装的太挤，以免妨碍蒸汽流通而影响灭菌效果，锥形瓶与试管口不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包裹口的纸而渗入棉塞；

第3步，拧紧固定盖子的螺栓，要同时旋紧相对的两个螺栓，是螺栓松紧一致，不漏气；

第4步，刚开始加热灭菌锅时打开排气阀，使水沸腾，排出锅内的冷空气，等冷空气完全排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐步上升；

第5步，灭菌完成后，切断电源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降到零时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出物品。如果提前打开排气阀，锅内压力突然下降，灭菌容器内的液体会冲出容器，造成污染。

设问：干热灭菌和湿热灭菌哪一种效果好？为什么？（教学意图：培养学生观察能力和分析问题的能力。）

学生思考讨论，回答问题。

教师讲解并给出答案：相同温度下湿热灭菌比干热灭菌效果好，原因有三点，第一，湿热中细菌菌体蛋白质较易凝固变性；第二，是湿热的穿透力比干热大；第三，湿热的蒸汽有潜热效应。

（2）辐射灭菌法（紫外线灭菌）

灭菌原理：紫外线在波长260-266nm的杀菌能力最强，它使DNA上相邻的T碱基通过共价键结合成二聚体，干扰DNA复制，导致细菌变异或死亡。

同学们阅读课本，思考回答问题：紫外线灭菌的适用范围？（教学意图：锻炼学生自主学习能力）

教师总结：紫外线的穿透力弱，只适用于表面灭菌和空气灭菌。实验中常用紫外线为接种室内的工作台灭菌，在工作台上方2m处悬挂1-2只30W紫外灯，每次开灯照射30min，就能达到室内空气灭菌的目的。再照射前，适量喷洒石碳酸等化学抑菌剂，可增强灭菌效果。

五、

板书设计

常用的消毒灭菌操作方法

一、基本概念

消毒

灭菌

防腐

无菌

二、消毒灭菌方法

热力灭菌法

辐射灭菌法

物理灭菌法

滤过除菌法

干燥与低温抑菌法

化学灭菌法：消毒杀菌剂

生物灭菌法

抗生素

细菌素

噬菌体

三、实验室常用灭菌法

①干热灭菌法

干热灭菌箱

②湿热灭菌法

高压蒸汽灭菌锅

③辐射灭菌法

紫外线灭菌

六、

当堂检测

1. 杀灭芽孢最常用和有效的方法是（

）

A. 紫外线照射

B. 煮沸5min

C. 巴氏消毒法

D. 高压蒸汽灭菌法

2. 常用于基础培养基灭菌的方法是（

）

A. 高压蒸汽灭菌法

B. 紫外线照射

C. 滤过除菌法

D. 巴氏消毒法

3. 常用于空气或物体表面消毒的方法是（

）

A. 高压蒸汽灭菌法

B. 紫外线照射

C. 滤过除菌法

D. 巴氏消毒法

4. 煮沸消毒法与巴氏消毒法的主要区别是（

）

A. 温度不同

B. 时间不同

C. 前者适于固体消毒，后者适于液体消毒

D. 没有区别

5. 细菌培养基常在121℃高压蒸汽锅中灭菌。如果只是在100℃温度下将细菌培养基灭菌，下列生物仍会存活的是（

）

A. 大肠杆菌

B. 一种青霉菌

C. 枯草芽孢杆菌的芽孢

D. 沙门氏菌

6. 下列操作属于灭菌的是（

）

A. 接种前用火焰灼烧接种环

B. 接种前用酒精擦拭双手

C. 将平板倒置，放入培养箱中培养

D. 接种在酒精灯的火焰旁完成

七、

教学反思

本节内容在专题2微生物的培养与应用的课题1微生物的实验室培养中涉及较多知识点，因此在课题1之前讲解便于学生学习理解。当中涉及较多实验器材，有条件的学校应该带领学生进入实验室，教师讲解仪器操作，并给学生演示，加强学生的感性认识和理性认识，同时激发学生的学习积极性，使学生不是被动

地接受知识。相对于传统的教师单一讲授，这样的方法学生更容易理解几种灭菌方法的异同，能够理解无菌操作的重要性，为后续微生物培养的相关内容学习打下基础。