课题2　月季的花药培养教案3

月季的花药培养

（一）引入新课

利用《美丽的月季》短视频导入新课，声情并茂，使课堂变得生动有趣。提问：想不想得到大量的月季花？我可以通过花药离体培养技术，短时间内满足你的要求。

（二）进行新课

1．基础知识

活动1：阅读“被子植物的花粉发育”，回答下列问题：

被子植物花粉的发育过程是怎样的？

〖思考1〗由此可见，被子植物的花粉的发育要经历

四分体

时期，

单核

期和

双核

期等阶段。

多媒体展示花粉形成过程图解，请同学填补空缺。

〖思考2〗小孢子四分体时期和以前讲过的四分体是不是一回事? 活动2：阅读“产生花粉植株的两条途径”，讨论并回答下列问题：

产生花粉植株的途径有哪些？

〖思考3〗产生花粉植株（即单倍体植株）的两种途径：一是花粉通过胚状体阶段发育为植株，二是通过愈伤组织阶段发育为植株。这两种途径的区别主要取决于培养基中激素的种类及其浓度的配比。

2．填写培育花粉植株的途径图解：多媒体展示

活动3：阅读“影响花药培养的因素”，回答下列问题：

1．影响花粉植株的主要因素：

材料的选择和培养基的组成等。

2．材料的选择：

①从花药来看，应当选择（初花期）的花药；

②从花粉来看，应当选择（单核期）的花粉；

③从花蕾来看，应当选择（完全未开放）的花蕾。

〖思考4〗除此之外，你认为影响花粉诱导成功率的因素还有哪些？

植物的种类、亲本生长条件、材料的低温处理、接种密度、培养基组成、培养的环境条件等。

〖思考5〗为什么不选择使用单核期之前或之后的花粉？

单核期之前，花药质地幼嫩，容易破碎；单核期之后，花瓣开始松动，消毒困难。

〖思考6〗花瓣松动会给材料消毒带来困难的原因是：

外界环境中的微生物容易侵入到花药中

。

2．实验操作

活动4：阅读“材料的选择”，回答下列问题：

1．选择花药时一般通过镜检来确定花粉发育时期，此时需要对花粉细胞核进行染色，最常

用的染色剂是醋酸洋红溶液和焙花青－铬钒溶液

，它们分别可以将细胞核染成红色和蓝黑

色。

2．在使用焙花青－铬钒溶液时，需要首先将花药用卡诺氏固定液处理20min。该试剂的配制方法是将无水酒精和冰醋酸按体积比为

3：1 的比例混合均匀。

活动5：阅读“材料的消毒”，填写下列流程图：

活动6：阅读“接种和培养”，回答下列问题：

1．剥取花药：消毒后的花蕾，要在无菌条件下除去花萼、花瓣。

〖思考7〗剥取花药时，一是注意不要损伤花药，原因是

容易从受伤部位产生愈伤组织

；二是要彻底除去花丝，原因是花丝不利于愈伤组织或胚状体的形成

。

2．接种花药：剥取的花药要立刻接种到培养基上。每个培养瓶接种

7～10 个花药。

3．培养：花药培养利用的培养基是

MS 培养基，pH为

5.8 ，温度为

25 ℃，幼苗形成之前（不需要）光照。幼小植株形成后才需要光照。

〖思考8〗在花药培养基中，用量最高的激素是

IAA ；在诱导丛芽或胚状体培养基中，用量最高的激素是

BA ；在诱导生根的培养基中，用量最高的激素是

IAA 。

4．培养20－30d后，花药开裂，长出

愈伤组织

或释放出

胚状体

。前者还要转移到分化培养基上进行分化培养成再生植株；后者要尽快分开并转移到新的培养基上。

5．通过愈伤组织形成的植株，常常会出现染色体倍性的变化，因而需要鉴定和筛选。

〖思考9〗为什么通过愈伤组织形成的植株会发生染色体倍性的变化？

有些是由花粉发育形成的单倍体花粉植株，有些是由花粉壁细胞发育形成的二倍体花药壁植株。

（三）课堂总结、点评

本课题有一定难度，成功率较低。全部完成课题不仅耗时较长，又有季节限制。最好课前做好时间规划，以提高工作效率。建议教师提前做好相关环节的准备，如花蕾的选择、培养基配方等。同时对于兴趣较高的同学可以安排在课外动手尝试，教师提供相关的技术指导。

【板书设计】