课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教案教学设计

课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

教学设计

一、教学目标

1.研究培养基对微生物的选择作用

2.进行微生物数量的测定

3.形成无菌不在的概念，养成讲究卫生的习惯

二、教学重点

对土样的选取和选择培养基的配制

三、教学难点

对分解尿素的细菌的计数

四、教学方法

启发式教学。在教学过程中设置一系列让学生“跳一跳，够得着”的问题串，引发学生思考并回答，从而培养学生的探究能力。

五、教学工具

多媒体课件

六、教学过程

（一）导入新课

以课本资料导入，引起学生的兴趣

1、尿素是一种重要的氮肥，农作物不能直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为氨和CO2

，这是因为细菌能合成脲酶

。

2、从热泉中把耐热细菌筛选出来的原理同样适用于实验室中微生物的筛选：即人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、PH等），同时抑制或阻止其他微生物生长

。

3、生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用。所以通过配制选择培养基、控制培养条件等选择目的微生物。

（二）分析培养基成分，思考选择的机制

〖思考1〗在该培养基配方中，碳源、氮源是什么？琼脂的作用是什么？

〖思考2〗该培养基对微生物具有选择作用吗？如果具有，其选择机制是什么？

让学生思考讨论，分小组回答，并在在PPT中展示答案。

（三）统计样品中细菌数目的方法：稀释涂布平板法和显微镜直接计数法

〖思考3〗稀释涂布平板法的注意事项有哪些？你能解释这些注意事项吗？

答：①选择菌落数在30——300的平板进行计数。

②涂布三个或三个以上的培养基，计算出菌落平均数。

③设置对照：将不涂布的培养基置于相同条件下培养，作为空白对照。

④统计结果用“菌落数”表示。

〖思考4〗稀释涂布平板法测得的菌落数为什么比活菌数目少？

答：当两个或多个菌落连在一起时，平板上观察到的是一个菌落。

〖思考5〗显微镜直接计数法的缺点？

答：不能区分死菌与活菌；

不适于对运动细菌的计数；

需要相对高的细菌浓度；

个体小的细菌在显微镜下难以观察。

〖思考6〗课本P22两位同学的实验应如何改进？

答：甲只涂布了一个平板，没有设置重复组，因此结果不具有说服力。

乙有一个平板与另外两个平板相差很大，说明操作过程可能有误，必须重做实验。

（四）设置对照

〖思考7〗通过阅读P22、P23的实验案例，可以发现设置对照实验有何意义？

答：设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。

〖思考8〗如何对课本上案例进行对照实验设计？

答：方案1：其他同学用A同学的土样进行实验。

方案2：A同学以不接种的培养基作为空白对照。

（五）实验设计

1、实验设计的内容包括实验方案、材料用具、实施步骤和时间安排等。

2、步骤：

（1）土壤取样：土壤微生物主要分布在距地表3～8cm的近中性土壤中，约70％～80％为细菌。

（2）制备培养基

〖思考9〗如何设置对照培养基？

答：牛肉膏蛋白胨培养基——说明选择培养基的选择作用

（3）样品的稀释和涂布

分离不同的微生物采用不同的稀释度，其原因是不同微生物在土壤中含量不同，其目的是保证获得菌落数在30～300之间、适于计数的平板。细菌稀释度为104、105、106，放线菌稀释度为103、104、105，真菌稀释度为102、103、104。

（4）微生物的培养和观察

培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌一般在30～37℃培养1～2d，放线菌一般在25～28℃培养5～7d，霉菌一般在25～28℃的温度下培养3～4d。

菌落的特征包括

形状、大小、隆起程度、颜色

等方面。

（六）实验结果分析与评价

1、对照培养皿在培养过程中无菌落生长，说明培养基没被杂菌污染。牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目明显大于选择培养基的数目，说明选择培养基已筛选出一些菌落。

2、如果得到了2个或2个以上菌落数目在30～300的平板，则说明稀释操作比较成功，能进行菌落的计数。

3、如果学生选取的是同种土样，统计结果应该接近。如果结果相差太远，则可能操作有误，需要重做试验。

（七）菌种的进一步鉴定

1、对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助生物化学的方法。

2、在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨。氨会使培养基的碱性增强，PH升高。因此，我们可以通过检测培养基pH变化来判断该化学反应是否发生。

3、在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变红

，说明该细菌能够分解尿素

。

〖思考10〗测定饮水中大肠杆菌数量的方法？

答：是将一定体积的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到伊红美蓝培养基上培养，大肠杆菌菌落呈现黑色。

板书：

土壤人为

有利于目的菌株生长

分离筛选微生物的原理

中尿条件

抑制或阻止其他微生物生长

素分稀释涂布平板法

解菌微生物计数方法与原理

显微镜直接计数

的分对照设置与重复设置

离与计数

实验方案

实验操作

结果与分析

实验设计