课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数第二课时教案

大许中学高二生物教学案

2016-2017学年度第二学期

第_____周

第_____课时

日期：_____月_____日

编制：

陈尊民

学 生 活 动

教师/学生 笔记

第【学习目标】

2课时

微生物的分离和培养（2）

1.知识目标：了解有关无菌技术的操作和接种的基础知识。

2.能力目标：学会倒平板的操作以及平板划线和稀释涂布平板操作。掌握纯化大肠杆菌的一般方法。

3.情感目标：形成勇于实践、大胆操作、严谨求实的科学态度和科学精神。

【教学重点】倒平板的操作以及平板划线和稀释涂布平板操作

【教学难点】倒平板的操作以及平板划线和稀释涂布平板操作

【引导自学】

1.阅读教材第11-14页内容，简述斜面接种的操作步骤和平板划线的操作步骤。

2.阅读教材第10-14页内容，简述培养大肠杆菌的操作步骤以及分离和培养大肠杆菌的方法。

【疑难解析】

问题一：斜面接种

1.

斜面接种大肠杆菌的目的是__________________,___________________,_______________________。

2.

培养大肠杆菌的条件：

_______________，_______________，_________________，________________。

3.

接种的步骤：

（1）

准备接种

（2）

接种环灭菌

目的是：避免________________________________。

（3）

试管口灭菌

目的：___________________________________。

（4）

挑起少许菌体

先将接种环冷却：目的_________________________。

（5）

划线接种

划S型曲线而不是真线理由是____________________________。

（6）

试管口灭菌、塞好棉塞。

（7）

培养大肠杆菌

37℃,24h

问题二：平板的制作

平板划线的目的：_____________________________ 平板的制作：（倒平板）P13 培养基冷却至50℃左右，（不烫手）进行倒平板操作。

1.

打开瓶塞

2.

瓶口灭菌

3.

倒培养基：

将培养皿盖打开一条缝隙而不是全部打开。

4.

平板倒置

目的：_______________________________，____________________________。

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陈尊民

问题三：分离大肠杆菌

1.

平板划线法：p14 思考：

（1）在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？

（2）从第一区到第二区，接种环是否还灭菌？为什么？

（3）划线结束后，接种环是否灭菌？为什么？

（4）肉眼看到的菌落一定是由一个大肠杆菌生长和繁殖形成的吗？

2.

平板分离法P17 包括：_________________，_________________两种。

问题四：微生物混合培养的分离（选择培养基）P18 分离耐高温菌：

分离对某种抗生素有抗性的菌种

分离能分解纤维素的细菌

分离能固氮的细菌

分离能分解尿素的细菌

抑制细菌和霉菌

【达标测评】

1.下列制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，叙述错误的是(

) A. 操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌

B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯

C．将培养基冷却至50℃左右时进行倒平板

D．将平板冷却凝固约5～l0min后将平板倒过来放置

2. 有关倒平板操作错误的是

(

) A．将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上

B．使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰

C．将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌面上

D. 等待平板冷却凝固后需要倒过来放置

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3. 要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用(

)。

A. 固体培养基

B．液体培养基

C．加青霉素的培养基

D．加入高浓度食盐的培养基

4.产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是 （

） A.一个细菌、液体培养基

B.许多细菌、液体培养基

C.一个细菌、固体培养基

D.许多细菌、固体培养基

5.灭菌的标准是 （ ）

A.杀死所有的病原微生物 B.杀死所有的微生物

C.杀死所有微生物的细胞、芽孢和孢子 D.是病原菌不生长

6．下列常用的无菌操作中错误的是 ( ) A．用酒精擦拭双手 B．用氯气消毒水源

C．实验操作应在酒精灯火焰附近进行 D．玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭

7．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是 ( ) A．计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 B．计算、称量、溶化、倒平板、灭菌

C．计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 D．计算、称量、灭菌、溶化、倒平板

8.能排除培养基是否有杂菌污染的方法是

A、将未接种的培养基放在实验桌培养

B、将未接种的培养基放在窗台培养

C、将未接种的培养基放在恒温箱中培养

D、将已接种的培养基放在恒温箱中培养

9.（多选）有关平板划线操作正确的是 （ ）

A.使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌

B.将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红 C.将烧红的接种环在火焰旁边冷却

D.打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌，取出菌种后需要马上塞上棉塞

E.将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可

F.接种环在平板上划线位置是随机的

G.在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰

H.最后将平板倒置，放入恒温箱中培养

10. （多选）在涂布平板操作时错误的是 （ ）

A．首先将菌液进行一系列的梯度稀释

B.将涂布器在酒精灯火焰上灼烧，直到烧红 C.将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃待酒精燃尽后，冷却8～10 s再用

D.取少量菌液滴加在培养基表面

E.涂布时可转动培养皿，使涂布均匀

F．然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面

G．再放在适宜条件下培养 H．结果都可在培养基表面形成单个的菌落

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陈尊民

11．下图甲、乙是微生物接种常用的两种方法，请回答相关问题。

(1)图甲是利用______________法进行微生物接种，图乙是利用_______________法进行微生物接种。这两种方法所用的接种工具分别是___________________和_______________________；对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是_______________________和酒精消毒。

(2)对培养基进行灭菌的方法是_______________________，对培养皿进行灭菌的方法是______________________________________。

（3）右图是采用上述接种方法接种后培养的效果图解，其接种方法是_______________________(填图甲或图乙)。

教学反思：

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