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课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一课题背景1、尿素的利用尿素是一种重要的农业氮肥。尿素不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素分解成氨之后才能被植物利用。土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶。脲酶O+ CO2CO(3+ H2NH2、实验室中微生物的筛选原理:人为提供有利于目的菌株生长的条

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课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数ppt课件课堂实录

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正文

课题2

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

一课题背景

1、尿素的利用

尿素是一种重要的农业氮肥。尿素不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素分解成氨之后才能被植物利用。土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶。

脲酶

O

+

CO2

CO(

3

+ H2

NH

2、实验室中微生物的筛选原理:

人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。

要分离一种微生物,必须根据该微生物的特点,包括营养、生理、生长条件等;

方法:

⑴抑制大多数微生物不能生长

⑵造成有利于该菌生长的环境,

结果:培养一定时间后,该菌数量上升,再通过平板稀释等方法对它进行纯化培养分离。

3、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基:

5、培养基选择分解尿素的微生物的原理

培养基的氮源为尿素,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素,缺乏氮源而不能生长发育繁殖,而受到抑制,所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。

㈡.统计菌落数目:

1、显微镜直接计数:

利用血球计数板,在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。

缺点

不能区分死菌与活菌;

不适于对运动细菌的计数;

需要相对高的细菌浓度;

个体小的细菌在显微镜下难以观察;

2.间接计数法(活菌计数法)

⑴原理:在稀释度足够高时,微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的,即一个菌落代表原先的一个单细胞。

⑵常用方法:稀释涂布平板法。

每克样品中的菌落数=(C÷V)×M 其中,C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(ml),M代表稀释倍数。

注意事项

①为了保证结果准确,一般选择菌落数在30——300的平板上进行计数。

②为使结果接近真实值可将同一稀释度加到三个或三个以上的平皿中,经涂布,培养计算出菌落平均数。

③统计的菌落往往比活菌的实际数目低。

④涂布平板法所选择的稀释度很重要,一般以三个稀释度中的第二个稀释度所出现的平均菌落数在50个左右为最好。

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