课题3　分解纤维素的微生物的分离教案1

湘潭市中/小学教师统一备课用纸

科目

课题

生物

年级

高三

班级

时间

分解纤维素的微生物的分离

（2）

第

课时

教学目标：纤维素与纤维素酶及纤维素分解菌的筛选

、实验设计和课题延伸

纤维素与纤维素酶及纤维素分解菌的筛选、实验设计和课题延伸

重

点

纤维素与纤维素酶及纤维素分解菌的筛选、实验设计和课题延伸

难

点

教学工具

教材

课件

学习用具

教材

教师活动

教学过程

实验设计和课题延伸

1．实验设计流程

(1)土壤取样：选择富含纤维素的环境

学生活动

１、提示：由于生物与环境的相互依存关系，在富含纤维素的环境中，纤维素分解菌的含量相对较高，因此从这种环境中获得目的微生物的概率要高于普通环境。

２、提示：将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集，实际上是人工设置纤确保能够从样品中分离到所需要的微生物②操作方法：将土样加入装有30 mL(2)选择培养选择培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在摇床上，在一定温度下振荡培养1～2 d，直至培养液变混浊，也可重复选择培养(3)梯度稀释

①目的：增加纤维素分解菌的浓度，

(4)涂布培养：将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上

(5)筛选菌株：刚果红染色法，挑选产生透明圈的菌落

2．课题延伸——纤维素分解菌的鉴定

(1)为确定得到的透明圈中的菌落是纤维素分解菌，需要进行发酵产纤维素酶的实验，纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵两种。

(2)纤维素酶的测定方法，一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定。

讨论

1．为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌？

2．将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？

3．阅读教材P29旁栏中的纤维素分解菌选择培养基的成分回答下列问题：

(1)旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？

提示：是液体培养基，因为配方中无凝固剂。

(2)这个培养基对微生物是否具有选择作用？如果有，是如何进行选择的？

点难点：

1．对纤维素分解菌筛选流程的说明

(1)纤维素分解菌的选择培养基中无凝固剂，为液体培养基。利用液体选择培养基可以增加纤维素分解菌的浓度。

维素分解菌生存的适宜环境。一般应将滤纸埋于深约10 cm左右的腐殖土壤中。

３、提示：有(2)为确定得到的细菌是否是纤维素分解菌，还需进行发酵产生纤维素酶的实验。选择作用，本配方因为形成透明圈的菌落与其他微生物菌落可能出现混杂现象，而且产生透明圈的菌落可能是产生淀粉酶的微生物，也可能是降解刚果红的菌种。

中的唯一碳源是纤维素粉，所以能(3)流程中的“选择培养”是否需要，应根据样品中目的菌株数量的多少来确定。

分解纤维素的微(4)本实验流程与课题2的流程有一定的区别。课题2是将土样制成的菌悬液直生物可以大量繁接涂布在以尿素为唯一氮源的选择培养基上，分离得到菌落。本课题通过选择培养，殖。

使纤维素分解菌得到增殖后，再将菌液涂布在选择培养基上。其他步骤基本一致。

2．纤维素分解菌的筛选过程中所用两种培养基的比较

(1)纤维素分解菌的选择培养基为液体培养基，利用液体培养基能使营养成分充分消耗，以增加纤维素分解菌的浓度。

(2)纤维素分解菌的鉴别培养基为固体培养基，因为需要在培养基上形成我们肉眼可见的菌落。

(3)在上述选择培养基中能以纤维素作为碳源和能源的微生物可以正常生长，而其他绝大多数微生物不能正常生长；而在上述鉴别培养基中，绝大多数微生物都可以正常生长。

[特别提醒]

判断某个选择培养基是否具有选择作用时，应设立基础培养基进行对照；若判断所使用的培养基灭菌是否彻底，应设立不接菌种的该培养基进行空白对照。在微生物的分离及培养中经常用到这两种对照。