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第二章1、微生物实验中一定要防止杂菌污染,接种环、接种针常用灼烧的方法灭菌2、灭菌是为了杀死物体内外所有微生物(包括芽孢和孢子)3、消毒是杀死物体内外绝大多数的微生物(不包括芽孢和孢子)4、高压蒸汽灭菌的原理是使细菌蛋白质变性,不能使DNA变性。5、倒平板,刚倒好后由于培养基还没有凝固,不能倒过来放

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第二章

1、微生物实验中一定要防止杂菌污染,接种环、接种针常用灼烧的方法灭菌

2、灭菌是为了杀死物体内外所有微生物(包括芽孢和孢子)

3、消毒是杀死物体内外绝大多数的微生物(不包括芽孢和孢子)

4、高压蒸汽灭菌的原理是使细菌蛋白质变性,不能使DNA变性。

5、倒平板,刚倒好后由于培养基还没有凝固,不能倒过来放置

6、接种环灼烧后应冷却到室温后蘸取菌液,否则会造成菌种受热死亡

7、平板划线,由于每一次划线是从上次划线的末端开始,随着接种物的稀释,最后会出现单个菌落

8、平板划线法可用于微生物的分离,不能用来对菌落进行计数,可以用稀释涂布平板法进行计数

9、分离不同的微生物要采用不同的稀释度

10、观察菌落的特征可以用来进行菌种的鉴定

11、用于植物组织培养的培养基要加蔗糖,用于动物细胞培养的培养液要加血清

12、配制培养大肠杆菌的固体培养基之后还要对其进行灭菌

13、血细胞计数板法属于显微镜直接计数,统计的是总细胞数,而稀释涂布平板法属于活菌计数法,统计的是菌落数,因此结果有差异

14、测定土壤样品中的细菌数目,常用稀释涂布平板法进行菌落计数

15、在对微生物进行培养前,需要对培养基进行灭菌,以避免杂菌污染

16、酵母菌发酵过程产生的酒精,对其他微生物生长有一定的抑制作用

17、分离能分解尿素的细菌的选择培养基,要以尿素作为培养基中唯一的氮源

18、欲筛选出能分解石油的细菌,应以石油为唯一碳源的培养基筛选。不能用牛肉膏蛋白胨培养基,因为其天然培养基,成分是不明确。

19、平板划线法能对细菌分离纯化,但不能对细菌进行计数;稀释涂布平板法可以分离菌种还可进行计数

20、接种后须放在恒温培养箱中培养,光照不是必要条件

21、欲筛选出能降解原油的菌株,培养基中应只含有原油而无其它碳源,这样,不能降解原油的细菌在此培养基上不能生存,这类培养基属于选择培养基

22、分离纯化菌种时,需采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法,使聚集在一起的

分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落,以便纯化菌种

23、降解原油能力越强的菌株,在菌落周围形成的分解圈越大,反之,则小。

24、实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌(如接种环)、干热灭菌(如培养皿)、高压蒸汽灭菌(如培养基)25、平板划线时,每次划线都需要将接种环灼烧

26、在划线时,将已冷却的接种环伸入菌液中沾取一环菌液,在酒精灯火焰旁划线

27、划线时,最后一区的划线不能与第一区的划线相连。

28、在尿素固体培养基中,只有能分解尿素的微生物才能生长,不能分解尿素的微生物因缺乏氮源不能生长,能够筛选分解尿素的微生物

29、在尿素固体培养基中,筛选能够分解尿素的微生物

30、用纤维素为唯一碳源的培养基,只有能分解纤维素

的微生物才能生长,不能分解纤维素的微生物因缺乏碳源不能生长,能筛选分解纤维素的微生物

31、用纤维素为唯一碳的培养基,筛选能够分解纤维素的微生物

32、在培养基中加入不同浓度的氯化钠,筛选抗盐突变体植物

33、真空包装、添加防腐剂、用保鲜膜密闭都起到了抑菌作用,不能起到灭菌的作用。

34、紫外线照射使细菌的蛋白质变性,核酸受破坏,是消毒方法

35、使用已灭菌的接种环、培养皿,操作过程中还需灭菌,因为接种环会感染细菌

36、打开含菌种的试管需通过火焰灭菌,取出菌种后还需通过火焰灭菌,再塞上棉塞

37、将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线,还需盖上皿盖,防止空气中杂菌混入

38、平板划线操作最后将平板倒置,防止盖子水滴落引起污染,有利培养基水蒸发.

39、欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌,为防止土壤浸出液浓度过高,不能获得单菌落,要将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释

40、欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌,同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板,防止偶然因素对实验结果的影响

41、欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌,可以将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照,以判断培养基灭菌是否彻底

42、要想分离能降解石油成分“多环芳烃菲”的菌株,配制培养液时,必须用多环芳烃菲作为唯一碳源

43、选择培养需多次进行的目的是为了分离和纯化目的菌

44、用平板划线法纯化目的菌时,每次划线前都要灼烧

45、接种后需要将平板倒置过来培养,需要设置空白对照

46、菌落(colony)是由单个细菌(或其他微生物)细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度,形成肉眼可见的子细胞群落

47、噬菌体能使固体培养基上的细菌裂解,菌落变得透明

48、细菌和真菌在培养基上形成的菌落形态不同

49、各种霉菌在面包上生长形成不同颜色的斑块也是菌落

50、从混杂的微生物群体中选择优良的单一纯种的方法包括:根据微生物对碳源需要的差别,使用含不同碳源的培养基;根据微生物对特殊营养物的需求,在培养基中增减不同的特殊营养物;根据微生物对抗生素敏感性的差异,在培养基中加入不同的抗生素

51、高温高压会将所有细菌(包括需要的菌类)一起杀死,不能利用高温、高压筛选耐热性不同的微生物。

52、用稀释涂布平板法来统计样品中尿素分解菌的数目,为了提高实验结果的可信度,往往要设置对照。具体包括:对照组培养基也严格灭菌,且不接触任何生物;对照组和实验组培养基放在相同的条件下培养;所用培养基成分及PH大小完全与实验组一致;培养基的量的大小与实验组基本相同。

53、用来判断选择培养基是否起到了选择作用,自变量是培养基,对照组应采用没有选择作用的培养基,常见的为牛肉膏蛋白胨培养基,其他条件都相同

54、自养型微生物的培养基中不需要加碳源,可以利用空气中的二氧化碳,而异养型微生物必须添加有机碳源

55、自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是碳源。

56、由于病毒没有细胞结构,必须寄生在活细胞内才能生活,因此常用的培养病毒的培养基中必须含有活细胞

57、培养SARS病毒时,应选用活的鸡胚

58、牛奶一般采用巴氏消毒法最好,吸管一般采取干热灭菌,接种环采用灼烧灭菌法,培养基一般采用高压蒸汽灭菌;接种时,培养基瓶口进行灼烧灭菌;空气灭菌经常采用紫外线消毒法

59、培养基高压蒸汽灭菌后冷却到50℃再倒平板

60、接种环每次使用前后都要灼烧灭菌

61、接种后的培养皿培养时需要放到恒温箱中培养,不一定需要光照

62、不同微生物培养间隔观察时间不同,有的需要每天定时观察

63、不同种类细菌的生长需要不同碳源

64、常用固体或半固体培养基分离获得细菌单菌落

65、用只含尿素作为氮源的培养基可选择分离出能分解利用尿素的细菌

66、含有机磷农药的培养基可分离出降解有机磷农药的细菌

67、“脂肪的鉴定”实验中,用50%的酒精是为了洗去浮色

68、平板划线法和稀释涂布平板法均可分离和提纯细菌,平板划线法不能用来计数

69、使用血细胞计数板时,先放置盖玻片,然后使培养液从边缘处自行渗入计数室

70、用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌实际数目低,在统计菌落时,由于菌落可能重合等因素,因此统计的菌落数量比实际的要少

71、醋酸菌在缺少糖源的情况下,可将乙醇氧化为乙醛,乙醛进一步氧化为乙酸。为维持PH的相对稳定可以加入缓冲物质

72、在接种实验中为了避免微生物的污染应在酒精灯火焰附近进行整个操作

73、采用平板划线法进行接种,如果培养一段时间后发现一个培养皿中某部位的菌落分布呈沟槽状,最可能是操作时用力不均匀培养基表面被划破了

74、菌种临时保存在低温下使用试管斜面保存时除保存时间短外,菌种还易被污染或产生变异。较长时间保存菌种可以采用甘油管藏法

75、欲筛选出能降解原油的菌株,培养基中应只含有原油而无其它碳源,这样,不能降解原油的细菌在此培养基上不能生存,这类培养基属于选择培养基

76、分离纯化菌种时,常采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法,其目的都是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落,以便于纯化菌种

77、无菌操作技术要求在整个实验过程中的操作都在酒精灯火焰附近进行,以避免周围环境中微生物的污染

78、稀释涂布平板法和平板划线法接种都能够分离出所需要的微生物;若以纤维素为唯一碳源的培养基,能筛选出能分泌纤维素酶来分解纤维素的微生物

79、刚果红染料能把纤维素染成红色,因此可以刚果红染料鉴定纤维素是否被降解,如果被降解会出现透明圈;婓林试剂可以检测还原糖,葡萄糖属于还原糖

80、酵母菌用于生产果酒,醋酸杆菌用于制果醋,生产果酒时需要无氧条件,制备果醋时需要有氧条件

81、提取橘皮精油常用压榨法,为了使橘皮油易于与水分离,还要加入NaHCO3和Na2SO4,并调节pH到7~8。

82、微生物培养的过程中,培养基中应该含有微生物生长所需要的营养物质,即碳源、氮源、水和无机盐等

83、倒平板时为了防止杂菌污染应该在酒精灯火焰附近进行

84、将相对分子质量不同的蛋白质进行分离时,常常采用凝胶色谱法

85、植物组织培养的实验操作流程是:①制备MS培养基→②外植体消毒→③接种→④培养→⑤移栽→⑥栽培。

86、对培养基进行灭菌常用高压蒸汽灭菌法

87、苯胺是致癌物质,土壤中有分解苯胺的异养型细菌,培养基中的苯胺成分除了为目的菌提供能源外,还能提供碳源和氮源,这种培养基从作用看属于选择培养基。

88、制备固体培养基时调节PH在溶化后步骤后;

89、运用称稀释涂布平板法计的菌落常常比活菌的实际数目低,原因:部分菌落重叠。

90、在以尿素为唯一氮源的培养基中加酚红指示剂,可初步鉴定该种细菌能够分解尿素,原理用方程式表示为CO(NH2)2+H2O-脲酶-→CO2+2NH3。

91、榨取果汁的过程中

,

发现榨取的果汁非常浑浊

,解决的方法是

用果胶酶处理,该物质是多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶

92、果酒发酵结束后,为方便后续使用,可将菌液转移到

甘油中,与之充分混匀后,放在-20℃的冷冻箱中保存,此方法叫做甘油管藏

93、对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定,在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红,培养后如果PH升高,指示剂将变红,因为细菌合成的脲酶将尿素分解成氨,使培养基碱性增强

94、凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质,分子量大的移动快

95、大肠杆菌需要从培养基中获得碳源,因此其同化作用类型是异养型;大肠杆菌在生态系统的成分中充当分解者

96、微生物培养时,关键是防止外来杂菌的感染

97、对于培养基和培养皿需要进行灭菌处理,操作者的双手需要消毒处理

98、空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,同时还能破坏DNA的结构。

99、培养基配方中的伊红美蓝是鉴定大肠杆菌的试剂,从用途上划分,该培养基属于鉴别培养基

100、制备果酒使用的微生物是酵母菌;制作果醋使用的微生物是醋酸菌;制作泡菜使用的微生物是乳酸菌;制作腐乳的微生物是毛霉。酵母菌和毛霉属于真核生物,醋酸菌、乳酸菌和大肠杆菌都属于原核生物。

101、根据胡萝卜素容易溶于有机溶剂特点,用有机溶剂萃取胡萝卜素。根据色素在层析液溶解度不同,随层析液在滤纸条扩散速度不同进行色素种类鉴定。

102、配制培养基的基本程序是计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板

103、稀释涂布平板法计数样本菌落数时,由于定量实验存在误差,所以需要计数多次计算平均值,减小误差,使实验结果更加准确可靠。

104、大肠杆菌是细菌,属于原核生物。嗜盐菌、颤藻、螺菌属于原核生物,黏菌、霉菌是真菌,属于真核生物。

105、利福平的抑菌原理是抑制结核杆菌的转录

106、微生物培养时,培养基一般用高压蒸汽灭菌;细菌对抗生素敏感,培养基中若加入抗生素会在杀灭杂菌的同时,也会导致大肠杆菌死亡

107、病毒的遗传物质是DNA或RNA,体外扩增遗传物质常用PCR技术;鉴定DNA时可用DNA分子杂交,通过是否形成杂交带来确认

108、纤维素分解菌能产生纤维素酶,刚果红可以与纤维素复合物形成红色络合物,而和纤维二糖和单糖不能,可以形成以纤维素分解菌为中心的透明圈。所以用刚果红染色法,产生纤维素酶的菌落周围会出现透明圈

109、玫瑰精油难溶于水易溶于有机溶剂。橘皮精油提取前应用石灰水浸泡,可以防止压榨时滑脱,提高

出油率。胡萝卜萃取时要控制干燥的温度和时间,温度太高,时间太长会导致胡萝卜素分解。

110、在单核靠边期的花药培养成功率高,要得到该时期的花药应选择完全未开发的花蕾

111、倒平板操作,待平板冷凝后,要将平板倒置,其主要原因是防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染,并且可以避免培养基中的水分过快的挥发。

112、从土壤浸出液获得较纯的酵母菌,这一过程叫作酵母菌的分离。可采用稀释涂布平板法对初步筛选得到的酵母菌进行纯化并计数

113、酵母细胞常采用包埋法固定化,若想使这些酵母细胞能被反复使用,实验过程中一定要注意无菌操作(避免其他微生物的污染)。

114、培养酵母菌的过程中,对培养基、接种环常采用的灭菌方法分别是高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌。培养酵母菌要考虑营养、温度、pH、渗透压等

115、由于尿素分解细菌将尿素分解成了氨,氨会使培养基的碱性增强,PH升高,故在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,可以根据酚红指示剂的变化来分离尿素分解菌。由于刚果红和纤维素能形成红色复合物,当纤维素被分解后,红色复合物就无法形成,培养基中将会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,故可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

116、要鉴定分离得到的微生物,常需要借助生物化学的方法。如在以尿素为唯一碳源的培养基中加入酚红指示剂,可用来鉴定尿素分解细菌;在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入刚果红,可用来鉴定纤维素分解菌。

117、不论何种培养基,在各成分溶化后灭菌前,都要进行的是调PH

118、稀释涂布平板法统计样本菌落数时设置需要对照组,因为需要判断培养基是否被污染。

119、如分别取0.1 mL已稀释102倍的水样分别涂布到四个琼脂固体培养基的表面进行培养,培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为161、155、158、170,则每升原水样中大肠杆菌数为[1000x102/0.1]x[(161+155+158+170)/4]= 1.61×108个

120、筛选产耐高温淀粉酶的微生物应选择以淀粉为唯一碳源的培养基,并在高温条件下培养.筛选纤维素分解菌的方法是刚果红染色法,产生纤维素酶的菌落周围会出现透明圈

121、灭菌与调节pH的先后顺序是先调节PH,后灭菌;一般对配制的培养基采用高压蒸汽灭菌法灭菌。

122、醋酸菌是异养需氧型细菌,在缺少糖源的情况下,可将乙醇氧化为乙醛,进而生成醋酸。进行醋酸发酵时,可向培养液中加入缓冲物质,以维持醋酸发酵培养液pH的相对稳定

123、筛选接种时,为了避免环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近无菌区进行

124、采用平板划线法进行接种后,若发现培养皿中某部位的菌落分布呈沟槽状,可能是划线时该部位的培养基表面被划破。

125、鉴定菌种的依据通常包括菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等菌落特征。将鉴定的菌种进行临时保存时,可在低温下使用试管斜面保存,但该方法除保存时间短外,菌种还易被污染或产生变异;若需较长时间保存菌种,可用的方法是甘油管藏。

126、对于试管、培养皿等器具常用的灭菌方法是干热灭菌法,在干热灭菌箱中进行灭菌。

127、从污泥中分离菌株时,分离菌株的同时还可以计数,因此要采用稀释涂布平板法,而不能采用平板划线法

128、用液体培养基培养细菌时,振荡培养可以增大培养液和菌株的接触,从而提高培养液中营养物质的利用率;统计菌株数量,可以采用稀释涂布平板法统计菌落数目,也可以使用显微镜直接计数。

129、培养基中添加的氨水既能为细菌生长提供所需的氮源,又可以调节培养液的PH值

130、微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法;无菌技术主要通过消毒和灭菌处理来避免杂菌污染。纯化土壤中某目的菌时发现培养基上的菌落连成一片,可能的原因是菌液浓度过高或培养过程中被杂菌污染。

131、微生物计数可以采用细胞计数板,显微镜直接计数法或稀释涂布平板法。发酵过程中检测酵母菌数量可采用显微镜直接计数法或稀释涂布平板法计数。

132、在PCR技术中,需要能够耐高温的DNA聚合酶。PCR的每个循环包括变性、复性、延伸三步。

133、纤维素酶是一种复合酶,包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶

134、平板划线法常用的接种工具是接种环;对于接种环,实验操作时采用灼烧的方法灭菌。

135、刚果红可以与纤维素等多糖形成红色复合物,但并不与纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。常用的刚果红染色法有两种:第一种是先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应;第二种是在倒平板时就加入刚果红。第一种方法会使菌落之间发生混杂。

136、如果观察到产生透明圈的菌落,说明可能获得了纤维素分解菌。为了确定是纤维素分解菌,还需要进行发酵产纤维素酶的实验。纤维素酶的测定方法一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。

137、分离纯化菌种时,需要在酒精灯火焰旁附近,以防止空气中的杂菌污染

138、获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染;玻璃器皿(如培养皿)可以采用干热灭菌法;培养基适宜放在高压蒸汽灭菌锅内灭菌

139、微生物培养中的无菌技术主要包括消毒和灭菌

140、倒平板时要待培养基冷却至50℃左右,为了避免杂菌污染应在酒精灯火焰旁进行。

141、倒平板后将其进行倒置的主要目的是防止培养皿盖上的水珠滴入到培养基造成污染,同时也利于挥发

142、为了证明配制的培养基是否受到杂菌污染,可设置未接种的培养基(或接种等量无菌水的培养基)作为对照组

143、在进行酵母菌或醋酸菌种扩大培养过程中,锥形瓶的瓶口应用透气棉塞塞住,并适时振荡锥形瓶,振荡的目的是保证氧气的供应和使营养物质与目的菌充分接触。

144、不论何种培养基,在各成分都溶化后分装前,要进行的是调整pH和灭菌,倒平板时,一般需冷却至50 ℃左右,在酒精灯火焰附近操作。

145、果胶酶能够提高葡萄的出汁率并使浑浊的果汁变得澄清,其原因是果胶酶能够分解果胶,瓦解植物的细胞壁及胞间层

146、从发酵条件看,果酒和果醋的制作过程的不同之处主要是果酒制作需无氧条件,果醋制作需要充足的氧气

147、在培养基的配制过程中,正确的顺序为①称量 ②溶化

③调pH ④灭菌⑤分装⑥加棉塞⑦包扎;倒平板操作中,平板冷凝后,要将平板倒置,其主要原因是防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染。

148、外植体组织培养中要求无菌操作的目的是避免微生物在培养基上与离体培养的植物组织竞争

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