课题3　分解纤维素的微生物的分离PPT配套教学设计内容

学习目标

1．能简述纤维素酶的种类及作用，

2．能从土壤中分离出分解纤维素的微生物，了解这类微生物的应用。

3.能掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术。

学习重点

掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术。

学习难点

掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术。

课前预习

使用说明与学法指导

生物选修一专题二课题三

知识准备

搜集筛选分解纤维素菌的方法及鉴定

教材助读

一、纤维素与纤维素酶

1．纤维素的化学组成： 三种元素，是一种 糖。

2．纤维素的分布： 是自然界中纤维素含量最高的天然产物，此外，木材、作物秸秆等也富含纤维素。

3．纤维素酶的作用：纤维素酶是一种 ，一般认为它至少包括三种组分，即 酶、 酶 酶，前两种酶使纤维素分解成 ，第三种酶将纤维二糖分解成 。

二、纤维素分解菌的筛选 1．筛选方法： 染色法。

2．筛选原理：刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成 ，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以 为中心的透明圈，我们可以通过 来筛选纤维素分解菌。

三、试验设计流程

、 、 、 、 。

[来源:学科网][来源:学|科|网Z|X|X|K]1．土壤取样：采集土样时，应选择富含 的环境。 2．选择培养：

阅读资料二“选择培养基”，回答以下问题：

若设置一个对照实验说明选择培养

(1)、目的：增加纤维素分解菌的 ，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。

(2)、制备选择培养基：参照课本旁栏中的比例配制。

(3)、选择培养：称取土样20 g，在无菌条件下加入装有30mL培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在 上，在一定温度下振荡培养1～2 d，直至培养液变 。也可重复选择培养。

17（4）、梯度稀释：

依次将培养液稀释10～10倍。思考是如何操作的？

(5)、将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上

<1>制备培养基：参照课本旁栏中的比例。 <2>倒平板操作。

<3>涂布平板：将稀释度为104～106的菌悬液各取0．1 mL涂布在平板培养基上，30℃倒置培养。

(6)、刚果红染色法：挑选产生 的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。

刚果红染色法：常用的刚果红染色法有两种即 .

预习自测题

[来源:Z+xx+k.Com]

课内探究

质疑探究

探究一：纤维素分解菌选择培养基属于 培养基，原因是什么？

探究二：培养基选择作用机制是什么？

探究三：若设置一个对照实验说明选择培养的作用，应控制的变量是什么？

探究四：本实验流程与尿素分解菌的分离实验流程有哪些异同？

[来源:Zxxk.Com]归纳总结

纤维素分解菌的筛选

（1）、筛选方法：刚果红染色法。能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选。

（2）、刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理

刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红－纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。这样，我们就可以

通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

分离分解纤维素的微生物的实验流程

土壤取样→选择培养（此步是否需要，应根据样品中目的菌株数量的多少来确定）→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落

（1）、土壤采集 选择富含纤维素的环境。

（2）、刚果红染色法分离纤维素分解菌的步骤 倒平板操作、制备菌悬液、涂布平板

（3）、刚果红染色法种类

一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是在倒平板时就加入刚果红。

知识网络图

分

纤维素与纤维素酶

解

纤刚果红染色法

筛选原理

维

素土壤取样

选择培养

梯度稀释

实验设计

的

微挑选产生

生将样品涂布到鉴别纤维素分解菌透明圈的物的培养基上

一、

菌落

的操作提示

分

离

当堂检测

1、纤维素分解菌的选择培养基有选择作用，原因在于其含有

A．NaNO3 B．KCl C．酵母膏 D．纤维素粉

2、下列哪种生物能产生纤维素酶

A.纤维素分解菌 B．牛 C．羊 D．兔

3、选择培养时应将锥形瓶固定在

A．桌子上 B．温箱里 C．窗台上 D．摇床

4、选择培养的结果：培养液变 A．清澈 B．浑浊 C．红色 D．产生透明圈

5、刚果红染色时，加入刚果红可在

①制备培养基时 ②梯度稀释时 ③倒平板时 ④涂布时 ⑤培养基上长出菌落时

A．①③ B．②⑤ C．③⑤ D．④⑤

6、两种刚果红染色法的结果是 A．均会出现透明圈

B.均不会出现透明圈

C.方法一出现方法二不出现

D.方法一不出现方法二出

课后反思 请将学习总结写在下面

课后训练

1．培养流感病毒时，应选用

A．固体培养基B．含有多种无机盐的培养液 C．活的鸡胚D．无菌的牛肉汤

2．以下关于微生物对氧的需求的叙述中正确的是

[来源:学科网ZXXK]

A．产甲烷杆菌属厌氧呼吸，但氧的存在不影响其生存

B．链球菌进行厌氧呼吸，不能接触空气

C．黄色短杆菌在氧气充足时才能产生谷氨酸

D．谷氨酸棒培育杆菌是厌氧呼吸

3．可以使微生物细胞内蛋白质、核酸发生不可逆破坏的环境因素是

A．高温 B.营养成分的变化 C.氧含量 D.温度、pH、氧的共同作用

4．微生物（除病毒外）需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖。下列有关微生物营养的说法正确的是

A．乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的 B．微生物生长中不可缺少的一些微量的无机物称为生长因子 C．培养基中的营养物质浓度越高对微生物的增殖越有利

D．生长因子一般是酶或核酸的组成成分，微生物本身合成这些生长因子的能力往往不足

5．下列有关味精生产的一些措施的叙述，正确的是 A．常用的菌种是谷氨酸棒状杆菌和金黄色葡萄球菌 B．培养基是含有五种营养成分的合成培养基 C．在发酵中要控制的只是温度、pH、通气量 D．味精是谷氨酸经Na2CO3中和后，再经过过滤、浓缩、离心分离而成

6．菌落形成的根本原因是

A．细菌有鞭毛 B．细菌能运动 C．培养基有琼脂 D．子细胞成为群体