课题3　血红蛋白的提取和分离第一课时评课稿

互

助

一

中

教

师

教

案

课题：

血红蛋白的提取与分离

课型:

新课

知识与技能: 1、尝试从血液中提取和分离血红蛋白

2、了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理

教学目标

过程与方法: 体验血红蛋白提取和分离的实验的严格要求，注意按照操作提示进行相关步骤

情感态度价值观: 初步形成科学的思维方式，发展科学素养和人文精神

教学重点

凝胶色谱法的原理和方法

教学难点

样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填

教

学

流

程

教师活动

学生活动

从DNA提取到血红蛋白

二次备课

展示

第一课时

学习目标：凝胶色谱法原理

学习

导

目标

提取分析目的物质的差别

粒外面，在了里之间迅速通过。

B.（1） 蛋白质 混合物上柱；

（2）洗脱开始， 相对分子质量小 的蛋白质扩散进入凝胶颗粒内； 的蛋白质被排阻于凝胶颗粒之外；

（3）

相对分子质量大

的蛋白质被滞留；

相对分子质量大 的蛋白质被向下移动。

（4） 相对分子质量 不同的蛋白质分子完全分开；

（5） 相对分子质量大 的蛋白质行程较短，已从 层析柱 中洗脱出来， 相对分子质量小 的蛋白质还在行进中。

高考年份及考题内容

2016江苏．凝胶色谱技术是一种快速而又简单的分离技术，设备简单、操作方便，不需要有机溶剂，对高分子物质有很高的分离效果，目前该技术不但应用于科学实验研究，而且已经大规模地用于工业生产。据图回答问题：

(1)a、b均为蛋白质分子，其中先从层析柱中洗脱出来的是_____，原因是_________ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。

(2)自己制作凝胶色谱柱时，在色谱柱底部d位置相当于多孔板的结构可由___________ 高考

链接

_____________________________________替代。

(3)装填凝胶色谱柱时，色谱柱内不能有气泡存在，原因是________________。

(4)洗脱用的液体应尽量与浸泡凝胶所用的液体______(填“相同”或“不同”)，洗脱时，对洗脱液的流速要求是_______________________________________________。

(5)若选用SephadexG-75，则“G”表示

________________________________________ ________________________________________________________________________，“75”表示_______________________________。

解析：(1)原理：不同蛋白质的相对分子质量不同，相对分子质量较大的蛋白质不能进入凝胶内部通道，只能在凝胶外部移动，路程短，速度快，易洗脱；相对分子质量较小的蛋白质则进入凝胶内部通道，路程长，速度慢。(2)凝胶色谱柱的制作：底部橡皮塞的凹穴上覆盖尼龙网和100目的尼龙纱，相当于多孔板。(3)凝胶色谱柱的装填：装填

时尽量紧密，不得有气泡存在，因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果。(4)样品的加入和洗脱：洗脱时和浸泡凝胶时所用液体均是物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液，洗脱时，对洗脱液的流速要求保持稳定。

答案：(1)a

a相对分子质量较大，无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快

(2)尼龙网和尼龙纱

(3)气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果

(4)相同

保持稳定

(5)凝胶的交联程度，膨胀程度及分离范围

凝胶得水值，即每克凝胶膨胀时吸水

7.5 g

教学

反思