课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课堂实录【1】

课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

一、教学目标：

研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物的数量的测定。

二、教学重点：

对土样的选取和选择培养基的配制

三、教学难点：

对分解尿素的细菌的计数

四、教学工具

多媒体，光盘

五、教学过程

（一）引入

上节课我们学习了培养基的配制和接种技术。下面我们在此基础上继续学习如何利用培养基进行细菌的分离，获得所需要的目的菌株。

（二）新课

1．

引导学生看“课题背景”，并提问：尿素是一种重要的 肥，农作物 直接吸收利用。

土壤中的细菌将尿素分解为 ，

因为细菌能合成 。反应式

： 。

2 、引导学生看“筛选菌株”，并提问：科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来是因为

热泉的 条件淘汰了绝大多数微生物

，而使目的菌株脱颖而出。这样的方法也适用于实验室中微生物的筛选，原理是人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括 等），同时 其他微生物生长

。

特别指出：生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用。所以可以通过配制选择培养基

筛选出目的菌株。

分析22页培养基配方，提问： 1、在该培养基配方中，

碳源是 ，

氮源

是 。

2、该培养基对微生物是否具有选择作用？如果有，其原理是：该培养基以尿素作为 ，

只有能够分解尿素的微生物才能在该培养基上生长。

3、引导学生看“统计菌落数目”，并提问：常用来统计样品中活菌数目的方法是 。除此之外， 也是测定微生物数量的常用方法。两者的不同是 。

1．稀释涂布平板法统计菌落数的原理是：培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中一个 。通过统计平板上的菌落数

，就能推测出样品中

活菌数。为了保证结果准确，一般选择菌落数在 的平板进行计数。

2、

（平均菌落数÷涂布的稀释液体积）×稀释倍数

。

3、

书上这两位同学的实验需要改进的操作是：第一位同学需设置 实验组；第二位同学统计的三个菌落数相差太大，说明操作有误，需 实验。

4、统计的菌落数比活菌的实际数目 。这是因为 。因此，统计结果一般用 来表示。

5、设置对照的主要目的是

： 。

4．实验设计

1、根据图示2－7填写实验流程： 。

2、

土壤微生物主要分布在距地表 cm的近 性土壤中，约70％～80％为细菌。分离不同的微生物采用不同的稀释度，

是因为不同微生物在土壤中含量不同，

以保证获得菌落数在 之间

的平板。细菌稀释度为 、放线菌 ，真菌 。

3、培养不同微生物需要不同培养温度和时间：

细菌 ℃ d，放线菌 ℃ d，霉菌 ℃ d。

4、本实验在

计数时，每隔 h统计一次菌落数目。选取菌落数目 时的记录作为结果，原因 。

5、菌落的特征包括 等方面。

5、操作提示

1）取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要 。

2）应在 称取土壤 。 3）在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在 进行。

4）实验时要对培养皿作好 。 5）为了提高效率，

应当事先 。

6．结果分析与评价

1、

对分离的菌种作进一步的鉴定，还需借助 方法。

2、

细菌合成的 将尿素分解成了 。氨会使培养基的碱性增强

，PH 升高

。因此，我们可以通过检测培养基 来判断该化学反应是否发生。可在以 为唯一氮源的培养基中加入 。

如果

指示剂将变 ，说明该细菌能够

分解尿素

。

（三）课后小结

六、作业布置