课题3　分解纤维素的微生物的分离优质课教案内容

单元

教

学

目

标

二

教学内容

分解纤维素的微生物的分离

课时

1 一、纤维素分解菌的筛选

二、分离土壤中纤维素分解菌实验设计

教学

1．纤维素酶

重点

2．纤维素分解菌的筛选

难点

教具

学具

资料

准备

教师活动（老师导航）

一、纤维素分解菌的筛选

1．纤维素酶

(1)组成：一种复合酶，它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。

(2)作用

纤维素――→纤维二糖――→葡萄糖。

课

堂

教

学

设

计

2．纤维素分解菌的筛选

(1)筛选方法：刚果红染色法。

(2)筛选原理：刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

二、分离土壤中纤维素分解菌实验设计

1．分离纤维素分解菌的实验设计

(1)实验流程：土壤取样→选择培养(此步可省略)→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落。

(2)土壤取样

采集土样时，可以选择纤维素丰富的环境。

(3)选择培养

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C1酶、CX酶葡萄糖苷酶PPT课件

学生活动或师生互动（学程设计）

①目的：增加纤维素分解菌的浓度，确保能够从样品中分离到所需要的微生物。

②选择培养：称取土样20 g，在无菌条件下加入装有30 mL选择培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在摇床上，在一定温度下振荡培养1～2 d，直至培养液变混浊。也可重复选择培养。

③挑选菌落

a．刚果红染色法，挑选产生透明圈的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。

b．常用的刚果红染色法包括两种，一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是在倒平板时就加入刚果红。

2．课题延伸

(1)为确定得到的透明圈中的菌落是纤维素分解菌，需要进行发酵产纤维素酶的实验，纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵两种。

(2)纤维素酶的测定方法

一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。

一、纤维素酶及两种选择培养基

1．纤维素分解菌的筛选原理

即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

2．筛选过程中涉及的两种培养基

(1)纤维素分解菌的选择培养基

①配方

组分

纤维素粉

NaNO3

Na2HPO4·7H2O KH2PO4

MgSO4·7H2O KCl 第2页

含量/g 5 1 1.2 0.9 0.5 0.5 提供的主要营养

碳源、能源

无机盐

酵母膏

水解酪素

0.5 0.5 生长因子、碳源、氮源

氮源、生长因子

将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL ②该培养基为液体培养基，利用液体选择培养基可增加纤维素分解菌的浓度。

(2)鉴别纤维素分解菌的培养基

①配方

组分

CMC－Na 酵母膏

KH2PO4

琼脂

土豆汁

含量

5～10 g 1 g 0.25 g 15 g 100 mL 提供的主要营养

碳源

碳源、氮源、生长因子

无机盐

凝固剂

碳源

将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL ②此培养基为固体培养基——在其中加入刚果红可形成以纤维素分解菌为中心的透明圈，据此可筛选到纤维素分解菌。

作业

布置

一、纤维素分解菌的筛选

板

书

设

计

1．纤维素酶

2．纤维素分解菌的筛选

二、分离土壤中纤维素分解菌实验设计

1．分离纤维素分解菌的实验设计

教学

在教学过程中由于缺乏实际操作过程，学生对学习的实验操作要求的理解变得比反思

较困难。通过实验操作视频有所好转。

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