课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数PPT专用课堂实录内容

课题

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

课时

第1课时

教学目标

研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定

教学重点

对土样的选取和选择培养基的配制

教学难点

对分解尿素的细菌的计数

教学过程

学习阶段

教师组织和引导

学生活动

导入

从教材课题背景导入，展示课题目标。

阅读、倾听。

背景材料：

1.尿素的利用:尿素[CO(NH2)2]——重要

的农业氮肥。只能被土壤中细菌分解为

NH3才能被植物吸收利用。

2.细菌利用尿素的原因：土壤中的含脲酶

的细菌能够分解尿素。

课题目标：

1.从土壤中分离出能够分解尿素的细菌

2.统计每克土壤样品中究竟含有多少这

样的细菌

探究新知一

1.知识目标

研究思路

（一）筛选菌株

1.实例

以PCR技术为例，引导学生探究问题的

解决方法。

PCR技术：一种在体外将少量DNA大量

复制的技术。此项技术要求使用耐高温

的DNA聚合酶。

提出的问题—如何寻找耐高温的DNA聚阅读、思考、回答。

合酶？

解决问题的思路—寻找耐高温环境。

原因：高温条件淘汰了绝大多数微生物。

获得启示：寻找目的菌种时要根据它对

生存环境的要求，到相应的环境中去寻

找

2.实验室微生物的筛选原理

引导学生根据上面实例归纳实验室微生

物的筛选原理：人为提供有利于目的菌

株生长的条件（包括营养、温度、pH等），

同时抑制或阻止其他微生物生长。

3.筛选分解尿素的微生物

培养基添加尿素，只有能合成脲酶的微

生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。

1

探究新知二

统计菌落数

缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。

4.选择培养基

（1）让学生分析本课题使用的培养基成分，回答问题。

KH2PO4

1.4g

NaHPO4

2.1g

MgSO4 .7H2O

0.2g

葡萄糖

10.0g

尿素

1.0g

琼脂

15.0g 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL。

问题1：该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质？

碳源：葡萄糖、尿素；氮源：尿素。

问题2：此配方能否筛选出产生脲酶的细菌？为什么？

能。只有产生脲酶的细菌才能利用尿素作为氮源而生存。

（2）共同归纳选择培养基概念

允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。

（3）举例说明选择培养基作用

加入青霉素的培养基：细菌不生长，酵母菌、霉菌等真菌能生长。

不加含碳有机物的无碳培养基：分离自养型微生物。

（二）统计菌落数目

1.显微镜直接计数

引导学生回忆血细胞计数板计数相关知识，讲解显微镜直接计数的原理、做法、优缺点。

2

分析、回答。

回忆、分析、回答。

优缺点：

优点：能准确统计微生物的实际数目。

缺点：不能区分死菌和活菌。

2.间接计数（活菌计数法）

引导学生回忆稀释涂布平板法相关知

识，讲解稀释涂布平板法计数的原理，

以例题讲解计数方法和设置重复组的重

要性。

（1）原理：当样品的稀释度足够高时，

培养基表面生长的一个菌落，来源于样

品稀释液中的一个活菌，通过统计平板

上的菌落数，就能推测出样品中大约含

有多少活菌。

（2）

计算公式：每克样品中的菌落数＝(C÷V)

×M C代表某一稀释度下平板上生长的平均

菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液

的体积(mＬ)，M代表稀释倍数。

例1：分别取0.1ML已稀释103倍的水样

分别涂布到三个固体培养基的表面进行

培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数演练、回答、归纳。

分别为55、56、57，则每升原水样中大

肠杆菌数为5.6*108

例2：【例2】两位同学用稀释涂布平板

法测定同一土壤样品中的细菌数。从对

应稀释倍数为106的培养基中，得到以

下两种统计结果。

1、甲同学在该浓度下涂布了一个平

板，统计的菌落数为230。

2、乙同学在该浓度下涂布了A、B、

C三个平板，统计的菌落数分别为21、212、256，该同学以这三个平板上菌落数的平均值163作为统计结果。

你认为这两位同学的作法正确吗？如果有问题，错在哪？

甲：没有重复实验（至少涂布3个平板）。

乙：A组结果误差过大，不应用于计算平均值。

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