课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课程导入

课题：土壤中分解尿素的细菌的分离和计数

课型设置【自研·互动45分钟+展示45分钟】

一、【学习主题】（1分钟）1.土壤中分解尿素的细菌的分离和计数 2. 分解纤维素的微生物的分离

二、【定向导学·互动展示·当堂反馈】

自研自探环节

自

学

指

导

（内容·学法·时间

30分钟）

【板块一】研究思路

(一)

筛选菌株

展示提升

总结归纳环节

质疑评价环节

互

动

策

略

展

示

方

案

随

堂

笔

记

内容·形式·时间）

（内容·方式·时间

30分钟）

（成果记录·知识生成·同步演练

）

研究思路

展示单元一：

①检查自研笔记，(一)

筛选菌株

方案预设：1. 定义的讲解注合作探究环节

意关键字词的标注（黄粉笔）不要大段的摘抄。

2.按顺序展示

分享自研成果，相①从什么的环境中筛选TaqDNA聚合酶？筛选互等级评定。（2分菌株的原理是什么？

②分析P22页培养基配方，碳源和氮源分别是钟）

什么？并分析该培养基是否具有选择作用？如

何选择？

③设计对照试验验证课题中的选择培养基确实

起到了筛选的作用？

③十人共同体：

（二）统计菌落数目

①

使用的是接种方法是什么？能使用平板划组长主持，确定线法进行接种吗？

展示方案，参照②稀释涂布平板法计数时选择什么样的平板？

展示议题，分派③分析P22页“两位同学”

，分别存在哪些问题？如何改进 好任务，同时进④分析统计的菌落数目往往比活菌的实际数目行组内预演，准低的原因

（三）设置对照

备精彩展示！

你能通过设置两次对照，帮助A 同学排除上述（10分钟

两个可能影响试验结果的因素吗？

展示单元二：

方案预设：

1. 按顺序展示

2. 精讲脱稿讲

【板块二】试验设计

①

土壤取样注意哪些方面？

②

样品的稀释注意哪些方面？

③

请根据图2-7，写出详细的实验方案（重点描述实验过程）

展示单元三：

[来源:学|科|网Z|X|X|K]

（二）统计菌落数目

（三）设置对照

[来源学。科。网]试验设计

【板块三】操作提示

结果分析和评价

课题延伸

1、如何保证无菌操作？

2、每克样品中的菌株数计算公式

3、如何鉴定某种细菌能够分解尿素？

方案预设：

1. 按顺序展示

2. 精讲脱稿讲

操作提示 结果分析和评价 课题延伸

[来源:Z。xx。k.Com]

拓展性运用（知识生成、拓展提高、规律总结、知识框架）

1、在同一稀释度下，至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值，并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。如果某个平板的菌落数与其他差别甚远，说明该平板操作过程中出现失误，应舍弃。

2、对照原则的运用

(1)判断培养基中是否有杂菌污染，需将未接种的培养基同时进行培养。

(2)判断选择培养基是否具有筛选作用，需设立牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养，观察两种培养基上菌落数目，进行对比得出结论。

2．

统计菌落数目的方法

(1)显微镜直接计数法

方法：用计数板计算。缺点：不能区分死菌与活菌。

(2)间接计数法(活菌计数法) ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

②操作：a.设置重复组，增强实验的说服力与准确性。

b．为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。

知能转化：

1、

判断正误

(

)

(

)

(

)

(1)只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素

(3)统计样品中的活菌一般用平板划线法

(2)筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的唯一氮源

(4)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变蓝，则说明筛选到分解尿素的细菌

2．下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是(

) A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板

B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上

C．将实验组和对照组平板倒置，37 ℃恒温培养24～48小时

D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数

3．

平板划线法和稀释涂布平板法是接种微生物的两种常用方法，下列描述正确的是(

) A．都要将菌液进行一系列的梯度稀释

B．平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作

C．稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基进行培养

D．都会在培养基表面形成单个菌落

4．自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。实验步骤：

(1)制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。

(2)为了得到更加准确的结果，你选用____________法接种样品。

(3)适宜温度下培养。

结果分析：

(1)测定大肠杆菌数时，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确可信的是________________，其理由是______________________________________________________________________________________________________________。

A．一个平板，统计的菌落数是230

B．两个平板，统计的菌落数是220和260，取平均值240 C．三个平板，统计的菌落数分别是210、50和520，取平均值260 D．四个平板，统计的菌落数分别是210、300、240和250，取平均值250 (2)一同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每毫升样品中的菌落数是__________(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 mL)。

(3)用这种方法测定的大肠杆菌密度，实际活菌数量要比测得的数量____________，因为______________________________________________________________________________________________。

5．有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。

回答问题：

(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以________为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲，该培养基属于________培养基。

(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即____________和____________。

(3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力________________________________________________。

(4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、________和____________。无菌技术要求实验操作应在酒精灯________附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。

对子的等级评定