附录4　常用的消毒灭菌操作方法获奖说课稿

选修一附录4 生物学中常用消毒和灭菌方法介绍

教学重点：1。

理解消毒杀菌的概念

2。掌握物理消毒的方法

教学难点：1. 区别物理消毒和化学消毒

课时安排：两课时

教学过程：导入新课在微生物培养中为什么要在酒精灯附近操作，理解消毒对生物实验的影响。

（一）定义：

消毒——杀死或清除传播媒介上的病原微生物，使之达到无害化的处理。

灭菌——将传播媒介上的所有微生物全部杀灭或清除，达到无菌的程度。

利用物理因子作用于病原微生物，将其杀灭或清除。

多利用加热、过滤和各种辐射等方法处理。

优点：作用较快速，且不留下残余的有害物质。

(二)机械消毒：

采用机械方法从物体表面、水、空气、人、畜体表除掉污染的有害微生物。常用的方法为冲洗、刷接、抹、扫、铲除、通风和过滤。这些方法虽然不能将病原微生物杀灭，但可大大减少其数量，减少人群受感染的机会。

如用肥皂刷洗、流水冲净等，可消除手上大部分，甚至全部细菌。

使用多层口罩可防止病原体自呼吸道排出或侵入；

应用通风装置过滤器可使手术室、实验室空气保持无茵状态。

（三）热力消毒：

包括火烧、煮沸、流动蒸汽、高热蒸汽、干热灭菌等。能使

病原体蛋白质凝固，使其失去正常代谢机能。

(四)辐射消毒：

非电离辐射：紫外线、红外线和微波，红外线和微波主要依靠产热杀茵。

电离辐射：包括两种射线和高能电子束(阴极射线)。电离辐射设备昂贵，对物品及人体有一定伤害，故使用较少。

应用最多为紫外线，可引起细胞成分，特别是核酸、原浆蛋白和酶发生变化，导致微生物死亡。

紫外线是一种低能量的电磁辐射，其能量只有5eV，穿透力很差。

紫外线可分为长波段(320.0~400.0 nm)、中波段(275.0~320.0nm)与短波段(180.0~275.0 nm)三组,短波段中240.0~280.0 nm波长的紫外线杀菌力较强，

一般多以253.7nm作为杀菌紫外线波长的代表，由于紫外线灯使用较方便，并有一定杀菌作用，所以在卫生防疫、医疗和工业消毒中使用均较普遍。

紫外线照射能量较低，不足以引起原子的电离，仅产生激发作用，使电子处于高能状态而不脱开。当微生物被照射，此作用可引起细胞内成分，特别是核酸、原浆蛋白与酶的化学变化，从而使之死亡。

紫外线灯在使用中，可产生臭氧。产生臭氧作用最强的为184.9nm紫外线。

(五)使用化学消毒剂进行消毒，称为化学消毒法。

化学消毒剂的分类方法：根据化学消毒剂对病原体蛋白质的作用可分为以下6类

1．酚类：主要有酚、来苏儿、六氯酚等，具有特殊气味，杀菌力有限。可使纺织品变色，橡胶类物品变脆，对皮肤有一定的刺激性，故目前少用。

2．酸类：如盐酸、乳酸等，对细茵繁殖体及细茵芽胞均有杀灭作用，但易损伤物品，

故一般不用于居室消毒。

3．醇类

乙醇(酒精)其75％浓度可迅速杀灭细菌繁殖体，对一般病毒作用较慢，对肝炎病毒作用不肯定，对真菌抱于有一定杀灭作用，对细菌芽胞无作用。用于皮肤消毒和浸泡体温计。

主要为碱性药物，常用的有氢氧化钠、石灰等。

包括含氯消毒剂和过氧化物类消毒剂，因其消毒力强，故目前在医疗防疫工作中应用最广。

1．漂白粉

应用最广，其主要成分为次氯酸钙[Ca(OCl2)]，含有效氯25％一30％，性质不稳定，可被光、热、潮湿及co2所分解，故应密闭保存于阴暗干燥处，时间不超过1年。

*有效成分次氮酸可渗入细胞内，氧化细胞酶的硫氢基因，破坏脑浆代谢。酸性环境中其乐茵力强而迅速，高浓度能杀死芽胞。粉剂可用于粪、痰、脓液等消毒。

*因其有腐蚀及漂白作用，故不宜用于金属器械及有色纺织物。如其存放大久，应按实际有效氮含量配制。

含氯消毒剂是指溶于水中可产生次氯酸的消毒剂。

本类消毒剂分为无机化合物类与有机化合物类。前者以次氯酸盐为主，杀菌作用较快，但性质不稳定；后者以氯胺类为主，性质稳定，但杀菌作用较慢。

含氯消毒剂的作用多与有效氯含量成正比，因此使用剂量一般按药物的有效氯含量计算．

含氯消毒剂杀菌谱广，对细菌繁殖体、病毒、真菌孢子及细菌芽胞都有杀灭作用。

2．次氯酸钠[NaOCl]别名高效漂白粉或次亚氯酸钠。纯品为白色粉末，通常为灰绿色结晶，在空气中不稳定。实验室可用电解食盐水法制取次氯酸钠溶液，含有效氯约1％。次氯酸钠有氯的气味，能与水混溶．溶液呈碱性．乳状原液的pH值高达12，随水溶液稀释度增加，pH值可降至7~9。性不稳定，遇热分解加速。对物品有漂白与腐蚀作用。

3．二氧化氯消毒液：有效含量为2％，商品名称百合兴。分子式为ClO2，易挥发。在-5~95°C下，质量稳定，不易分解。加入酸以后可被激活，产生游离二氧化氛。

杀菌机理和作用：具有很强的氧化作用，能使微生物蛋白质中的氨基酸氧化分解，导致氨基园断裂、蛋白质分解，从而使微生物死亡。它是一种高效消毒剂，可以杀灭各种微生物，包括细菌繁殖体、芽胞、真菌、病毒，甚至原虫等。

4．二氯异氰尿酸钠又名优氯净，为应用较广的有机氯消毒剂，含有效氯60％一64.5％，具有高效、广谱、稳定、溶解度高、毒性低等优点。水溶液可用于喷洒、浸泡、接抹，亦可用于粉直接消毒污染物、处理粪便等排泄物，用法同漂白粉。直接喷洒地面，其剂量为10一20g／m2。与多聚甲醛干粉混合点燃，其气体可用熏蒸消毒．也可与92号混凝剂(羟基氯化铝为基础加铁粉、硫酸、双氧水等合成)以1: 4混合成“遇水清”，可作饮水消毒用。并可与硝酸钠配制成各种消毒洗涤液，如涤静美、优氯净等，对肝炎病毒有杀灭作用。

过氧化物类消毒剂多依靠其强大的氧化能力杀灭微生物。

主要有过氧乙酸、过氧化氢

理化性状为无色透明液体，呈弱酸性，有刺激性酸味，易挥发，可溶于水或乙醇。分子式C2H4O3，分子量76.05，沸点110℃，国产过氧乙酸的有效成分含量为16％~20％。

杀菌作用：过氧乙酸的气体与溶液都具有较强的杀茵作用，是一种高效灭菌剂。

(1)浓度与作用时间：其杀菌作用随浓度的增加与时间的延长成正比。浓度减半时．消毒时间需增加为原来的2—5倍．

(2)有机物：可降低其杀菌效果，有20％血清保护细菌时，杀菌浓度密增加至原来的4一15倍。

(3)温度：温度低可减弱其杀菌能力。

(4)醇类：溶液中加入20％一70％醇类可加强其杀菌作用。

(5)相对湿度：相对湿度在40％一80％时，可有明显的杀菌作用。

对地面、墙壁、门窗消毒

：0.2％—0.5％的过氧乙酸溶液装入喷雾器中喷雾消毒

对房屋空间消毒

：用浓度为15％，用量为每立方米空间7毫升的过氧乙酸溶液（1克／立方米）熏蒸或用浓度为2％的过氧乙酸溶液（8毫升／立方米）气溶胶喷雾消毒

对衣服、被褥消毒

：用浓度为15％，用量为每立方米空间7毫升的过氧乙酸溶液（1克／立方米）熏蒸

对餐（饮）具消毒

：用浓度为0.5％的过氧乙酸溶液将餐（饮）具浸泡30分钟(1)配制过氧乙酸时忌与碱或有机物质混合，以免产生剧烈分解，甚至发生爆炸。

(2)配制消毒液的容器最好用塑料制品，以防腐蚀。原药应贮存在阴凉通风处。

(3)使用高浓度溶液时，谨防溅入眼内或皮肤上，如不慎溅及，应立即用水冲洗干净。

(4)稀释的过氧乙酸溶液分解较快，必须临用前配制，稀释液在常温下(15—25℃)保存不宜超过2天，最好用蒸馏水配制并加盖贮存。

(5)金屑器材与天然纤维纺织品经浸泡消毒后，应尽快用清水将药液冲洗干净。熏蒸消毒对物品损害虽小，但反复多次处理也可被腐蚀或漂白。需反复处理时，每次熏蒸后仍应将有关物品刷洗或用湿布擦净。

(6)新购或新配的原药每批宜测定其有效含量，然后按实际有效含量稀释成所需浓度的溶液使用。

直接口服过氧乙酸；

在消毒场所有人的情况下喷洒过氧乙酸；

用手压瓶喷出大液滴的过氧乙酸，大液滴很快沉降到地面，不能达到杀灭空气中病毒、细菌的效果，只能杀灭地面病毒、细菌；

配比浓度不正确，例如把１５％的过氧乙酸原液当成百分之百的原液加水进行稀释，造成浓度过小。

过氧乙酸不稳定，浓度大于２０％容易爆炸。运输中更不能过浓，浓度大于１６％就比较危险，要防止摇摆、震荡和高温。

色同饮料易误食。液体过氧乙酸为无色或淡黄色透明液体，易与矿泉水、饮料等混淆，容易被儿童误食。而且过氧乙酸是强酸性、强腐蚀性的化学品，误食后果严重。天津、福建、广州等地都已发生数起儿童、老人误食液体过氧乙酸的事件。

配兑操作不易掌握。液体过氧乙酸配兑使用时对“量”的要求很严格，浓度太低达不到杀菌效果，浓度太高容易刺激呼吸道

。

主要有季铵盐类。高浓度能凝固蛋白，低浓度能抑制细茵代谢。其毒性和刺激性小，无漂白及腐蚀作用，具有无臭、稳定、水溶性好等优点，但杀苗力不强，尤其对细茵芽胞效果欠佳，受有机物影响较大，配伍禁忌较多。

国内生产有新洁尔灭、消毒宁(度米芬)和消毒净，以消毒宁杀菌力较强。常用浓度为0.5％~1.0％。可用于皮肤、金属器械、餐具等消毒。不宜作排泄物及分泌物消毒。

戊二醛：作用似甲醛。在酸性溶液中较稳定，但杀菌效果差，在碱性溶液中能保持2周，但可提高杀菌效果，故通常于2％戊二醛内加0.3%碳酸氢钠，校正pH值为7.5~8.5，称为碱性戊二醛。

强化酸性戊二醛：其杀菌效果增强，可保持稳定性18个月，无腐蚀性，有广谱、速效、低毒等优点，可广泛用于杀灭细茵、细菌芽胞和病毒。不宜用作皮肤、粘膜的消毒。

甲醛

环氧乙烷

碘

洗必泰：为双胍类化合物，对细菌有较强

的消毒作用。可用于手、皮肤、医疗器械、衣物等消毒，常用浓度为0.2％~1％。