课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教案2

2.2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

教学目标：

（一）知识与技能

了解尿素在生产实践中的作用，学习利用选择培养基培养分离尿素分解菌，并计数。

（二）过程与方法

分析实验方法的设计过程，找出共性和差异性

（三）情感、态度与价值观

将生物理论知识与生活相互联系并应用实践. 教学重点：对土样的选取和选择培养基的配制

教学难点：对分解尿素的细菌的分离和计数

学情分析：

本节知识为人教版选修一内容,微生物是一个比较微观的存在，在高考中出现的概率比较大，学生看不见摸不着，缺乏生活实践的经历。由于条件限制，不能让学生亲自体验实验过程,再则学生基础比较差学习本节知识相对难度比较大，记忆东西比较多。

教学过程：

（一）引入新课

引导学生复习上节内容，上节课我们学习了微生物试验培养、培养基的配制以及接种方法。今天我们来学习如何进行细菌的分离与计数。

（二）新课-基础知识讲解

1 、尿素是一种重要的氮肥，农作物不能直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为氨和CO2，这是因为细菌能合成脲酶

。

2、学生观看教师展示的多媒体图片，利用热泉中分离了耐高温的细菌的例子，引入选择培养基的定义。

选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。

3、学生阅读课本P22侧边栏关于本课题使用的培养基成分相关内容，讨论并回答提供碳源和氮源的分别是什么物质。

碳源：葡萄糖 氮源：尿素（以尿素为唯一的氮源）

4、学生讨论培养基如何对微生物进行筛选，老师总结。

通过观看图片，使学生由感性认识过渡到理性认识。培养学生的学科素养。

（三）统计菌落数目

1、直接计数法：最常用的显微镜直接计数

2、间接计数法：最常用方法稀释涂布平板法。

每克样品中的菌株数=(C÷V)×M

C：某一稀释度下平板上生长的平均菌落数

V：涂布平板时所用的稀释液的体积(ml) M：稀释倍数

（四）设置对照

1、对照实验是指除了被测试的条件外，其他条件都相同的实验。满足该条件的称为对照组，未满足该条件的称为实验组。设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。

2、实例：

教材22到23页，学生相互讨论设计对照。

方案一：由其他同学用与A同学相同土样进行实验;

方案二：将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养，作为空白对照，以证明培养基是否受到污染。

小结：通过这个事例可以看出，实验结果要有说服力，对照的设置是必不可少的。培养学生的怀疑精神，并根据自身设计实验方案进行验证。培养学生的实验设计能力。

（五）实验设计

教师展示图片，学生讨论，尝试自己说出实验设计的思路。之后老师讲解样品的稀释和稀释液的取样培养流程示意图。

1、土壤取样：

从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的信封中。

2、制备培养基和样品的稀释：

制备以尿素为唯一氮源的选择培养基，并按一定倍数稀释。

3、微生物的培养与观察：

思考1：如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数?

统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好能统计3个平板，计算出平板菌落数的平均值，然后按课本旁栏的公式进行计算。

思考2：为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度? 因为土壤中各类微生物的数量是不同的，为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离，同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。

思考3：如何区别不同生物的菌落？

菌落形状、大小、颜色等。（展示图片）

操作提示

（一）、无菌操作

1、取土用小铁铲、盛土样信封在使用前都需要灭菌。

2、应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中，塞好棉塞。

3、在稀释土壤溶液的过程中，每步都要在火焰旁操作。

（二）、做好标记：

注明培养基种类、培养日期、平板培养样品的稀释度等。

结果分析与评价

1、培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选菌落

2、样品的稀释操作是否成功

3、重复组的结果是否一致

学生交流成果，分析自己的成功之处和需要改进的地方。培养学生学会对别人评价和自我评价的能力

课题延伸

在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素。（展示图片）

课堂总结