课题3　分解纤维素的微生物的分离教学设计及教案分析

分解纤维素的微生物的分离

考点要求

1．能简述纤维素酶的种类及作用，

2．能从土壤中分离出分解纤维素的微生物，了解这类微生物的应用。

3．能掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术。

双基过关

一、纤维素与纤维素酶

1．纤维素的化学组成： 三种元素，是一种 糖。

2．纤维素的分布： 是自然界中纤维素含量最高的天然产物，此外，木材、作物秸秆等也富含纤维素。

3．纤维素酶的作用：纤维素酶是一种 ，一般认为它至少包括三种组分，即 酶、 酶 酶，前两种酶使纤维素分解成 ，第三种酶将纤维二糖分解成 。

二、纤维素分解菌的筛选 1．筛选方法： 染色法。

2．筛选原理：刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成 ，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以 为中心的透明圈，我们可以通过 来筛选纤维素分解菌。

三、试验设计

土壤中纤维素分解菌的分离的实验方案

：

分解纤维素的微生物的分离的试验流程

、

、

、

、

1．土壤取样：采集土样时，应选择富含 的环境。 2．选择培养：

阅读资料二“选择培养基”，回答以下三个问题：

〖思考1〗纤维素分解菌选择培养基属于 培养基，原因是什么？。

〖思考2〗培养基选择作用机制是什么？

〖思考3〗若设置一个对照实验说明选择培养的作用，应控制的变量是什么？

(1)目的：增加纤维素分解菌的 ，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。

(2)制备选择培养基：参照课本旁栏中的比例配制。

(3)选择培养：称取土样20 g，在无菌条件下加入装有30mL培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在 上，在一定温度下振荡培养1～2 d，直至培养液变 。也可重复选择培养。

17（4）梯度稀释：

依次将培养液稀释10～10倍。思考是如何操作的？

(5)．将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上

<1>制备培养基：参照课本旁栏中的比例。 <2>倒平板操作。 <3>涂布平板：将稀释度为104～106的菌悬液各取0．1 mL涂布在平板培养基上，30℃倒置培养。

(6)．刚果红染色法：挑选产生 的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。

〖思考4〗本实验流程与尿素分解菌的分离实验流程有哪些异同？

3刚果红染色法：常用的刚果红染色法有两种即

。

阅读资料三“刚果红染色法”，填表比较两种染色法的各自的优缺点

染色法

方法一

优点

缺点

方法二

是 、 。

阅读资料三“刚果红染色法”，填表比较两种染色法的各自的优缺点：

〖思考5〗为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？

四：结果分析与评价

1为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行 实验，纤维素酶的

发酵方法有 发酵和 发酵。

2纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的 含量进行定量测定。

典例精析

类型一

纤维素酶的作用

【例1】纤维素酶可以将下列哪种物质分解…………( ) A．牛肉片 B．鱼片 C．滤纸条 D．塑料条

类型二

纤维素分解菌筛选的原理

【例2】在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是……………………( ) A．分解尿素的细菌 B．硝化细菌 C．分解纤维素的细菌 D．乳酸菌

类型三

选择培养基

【例3】本实验关于选择培养目的叙述正确的是…( ) A．可以增加纤维素分解菌的浓度 B．可以减少纤维素分解菌的浓度

C．所用培养基是固体培养基 D．所用培养基是平板培养基