课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数优秀课堂实录

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

一、教学目标

1．知识与技能

利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数。

2．过程与方法

体验无菌操作的实验过程。

3．情感、态度与价值观

关注我们身边周围都存在细菌，养成讲究卫生的良好习惯。

二、教学重点

对土样的选取和选择培养基的配制。

三、教学难点

对分解尿素的细菌的计数。

四、教学过程

教学内容

导入课题

教师讲解：我们上节学习了培养基的配置以及无菌操作技术，下面来学习如何进行细菌的分离，获得所需要的目的微生物。

学生回忆专题2微生物的实验室培养里面关于培养基及无菌操作的相关知识。

教师活动

学生活动

设计意图

创设情景，引入新课

研究思路

1、筛选菌株

1、教师让学生阅读课本P21，讲解实例：DNA1、学生讨论为什么通过教师讲解知识点，引导学多聚酶链式反应是一种在体外将少量DNA大量Taq细菌能从热泉中复制的技术，此项技术要求使用耐高温（93℃）筛选出来吗？

的DNA聚合酶，因为热泉温度70～80℃，淘汰了绝大多数微生物只有Taq细菌被筛选出来。引导学生得到启示根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找（即自然界筛选）。

2、实验室中微生物的筛选原理实验室筛选：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、

温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。

3、选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。目的是从众多微生物中分

2、学生阅读课本P22侧边栏关于本课题使

生对知识进行迁移学习，培养学生的逻辑迁移思维。

离所需要的微生物。

4、培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养用的培养基成分相关基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能

内容，讨论并回答提供

碳源和氮源的分别是什么物质。

够选择出分解尿素的微生物。

5、教师让学生阅读课本怕1图2-6，展示各种筛选菌株方法的多媒体图片：

通过观看图片，使学生由感性

黄石公园热泉

海底火山

大肠杆菌显色培养基

实验室筛选SARS

菌株

3、学生讨论培养基如何对微生物进行筛选。

认识过渡到理性认识。

4、学生观看教师展示的多媒体图片。

培养学生的学科素养。

2、统计菌落数目

1、直接计数法：最常用的显微镜直接计数

2、间接计数法：最常用方法稀释涂布平板法。

1、学生举例血球计数板属于直接计数法。

知识的迁移，培养学生的知识整合能力。

每克样品中的菌株数＝（C÷V）×M

2、学生讨论并区别：

稀释涂布平板法是用

3、设置对照

C：某一稀释度下平板上生长的平均菌落数

V：涂布平板时所用的稀释液的体积（ml)

M：稀释倍数

来计数的，而平板划线法是用来纯化的。

1、对照实验是指除了被测试的条件外，其他条学生设计实验方案：

件都相同的实验。满足该条件的称为对照组，未满足该条件的称为实验组。设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。

方案一：由其他同学用与A同学相同土样进行实验；

培养学生的怀疑精神，并根据自身设方案二：将A同学配制计实验的培养基在不加土样方案进2、实例：在做分解尿素的细菌的筛选与统计菌的情况下进行培养，作行验证。落数目的实验时，A同学筛选出约150个菌落，为空白对照，以证明培培养学但其他同学只选择出约50个菌落，分析其原因。教师要求学生设计实验方案。

以看出，实验结果要有说服力，对照的设置是必不可少的。

养基是否受到污染。

生的实验设计小结：通过这个事例可能力。

实验设计

1、教师讲解样品的稀释和稀释液的取样培养流学生讨论思考下列问程示意图。

题：

通过实1、如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？

验设计，培养学生设计实验方

案能力，

答：统计某一稀释度下培养学

操作提示

2、土壤取样：

从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的信封中。

平板上的菌落数，最好生的学能统计3个平板，计算科素养。出平板菌落数的平均体验无值，然后按课本旁栏的菌操作公式进行计算。

2、为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？

答：因为土壤中各类微的实验过程。

3、制备培养基和样品的稀释：

制备以尿素为唯一氮源的选择培养基，并按一定倍数稀释。

4、微生物的培养与观察：

每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果。

生物的数量（单位：株/kg）是不同的，为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离，同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。

1、无菌操作

培养学生的创新思维。

a、取土用小铁铲、盛土样信封在使用前都需要

c、在稀释土壤溶液的过程中，每步都要在火焰

旁操作。

2、做好标记

灭菌。

学生讨论实验过程的b、应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的注意事项。

土样倒入锥形瓶中，塞好棉塞。

注明培养基种类、培养日期、平板培养样品的稀释度等。

3、规划时间

结果分析与评价

2、样品的稀释操作是否成功

3、重复组的结果是否一致

课题延伸

在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示学生了解酚红指示剂1、培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是学生交流成果，分析自培养学否筛选菌落

己的成功之处和需要改进的地方。

生学会对别人评价和自我评价的能力

知识的剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将的作用，通过对比认清延伸与变红，说明该细菌能够分解尿素

颜色的区别。

迁移。

脲酶的检测