复习与测试第二课时教案

江阴市青阳中学高三生物二轮复习学案

专题复习：微生物的培养技术

【复习目标】

1.

结合具体实例大肠杆菌的培养技术，理解微生物的培养与分离计数的一般过程及要领。

2.

在真实的科研情境中，学会理性分析问题，提升科学探究的能力。

3.

关注微生物对人体的影响，发展学生的生命观念。

4.

关注微生物的防治，养成社会责任。

【考纲要求】

1.

微生物的分离和培养B 2.

某种微生物数量的测定C 3.

微生物的应用B 4.

实验：微生物的分离与培养(b) 【复习导学】

水质细菌学检验是培水和污水水质分析工作中的一项重要指标，作为水质日常检测的七项指标（色度、浊度、细菌总数、大肠菌群、余氯、铁、锰）之一的细菌总数和大肠杆菌指数，能非常直观地反映水被细菌污染的程度。

活动一：大肠杆菌的培养

大肠杆菌LB培养基：蛋白胨 10g，酵母提取物 5g，NaCl 10 g，蒸馏水 1000ml，pH值7.2 （1）在配制培养基时，要注意营养成分齐全，一般含有 等营养物质，上述培养基中氯化钠的作用是 ，蛋白胨为大肠杆菌的培养提供了 。从培养基的物理形态来看，该培养基属于 培养基。

（2）配制培养基时，按照培养基的配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的 ，及时对培养基进行分装，并进行 灭菌。

（3）下面是关于高压蒸汽灭菌锅使用过程中的操作，正确的先后顺序是 。

①装入待灭菌物品②加盖③加热灭菌锅④打开排气阀⑤关闭排气阀⑥切断电源⑦压力表的压力降到零⑧打开盖子⑨取出灭菌物品

（4）某生物兴趣小组将菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中_____________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高________________的利用率。

活动二：大肠杆菌的分离与纯化

（1）从培养基的物理形态来看，分离纯化培养基应属于 培养基，配制时需在上述LB培养基中加入 。

（2）若采用平板划线法分离水样中的细菌，上图正确的操作顺序是 。操作时，接种环通过 灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是 。将接种好的培养皿在恒温箱中培养时应倒置，其目的是 。某同学接种后，在平板上没有得到菌落，最可能的原因是 。

（3）纯化过程中，在固体培养基上划线分离过程，正确的操作是 。

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A. 每次划线时，接种环都需要蘸菌液一次

B. 划线分离时，需要把接种环深入到培养基中进行接种

C. 划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连

D. 为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌

（4）纯化细菌还可以用稀释涂布平板法，用该方法接种时加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是 。

（5）进行上述实验还需要设置一个在相同条件下培养的“未接种的空白平板”作为对照实验，其目的是 。

（6）临时保藏菌种时，可将菌种接种到 上，在合适的温度下培养，待菌落长成后，将试管放入温度为 的冰箱中保藏。若要长期保存菌种，采用的方法是 。

活动三：大肠杆菌的鉴定与计数

（1）检测水样中的细菌含量可以用右图[ ] 法。将1 mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为 。该方法是通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数，其原理是 。除了上述的活菌计数法外， 也是测定微生物数量的常用方法。

（2）我国饮用水规定，细菌总数1ml水中不超过100个，大肠杆菌数1L水中不超过3个。下表中的伊红美蓝培养基可以用来检测自来水中的大肠杆菌的含量。

伊红美蓝培养基：蛋白胨10g，乳糖10g，磷酸氢二钾 2g，琼脂 20-30g，蒸馏水1000ml，伊红0.4g，

美蓝0.065g，pH 7.2

滤膜法:将已知体积的水过滤后，将滤膜放于伊红美蓝培养基上培养。在该培养基上，大肠杆菌菌落呈现黑色，可根据培养基上黑色的菌落数目，计算出水样中大肠杆菌的数量。

滤膜法是利用滤膜的直径 (选填“大于”或“小于”)大肠杆菌的直径，将大肠杆菌留在滤膜上进行计数。该方法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目 。原因是 。从功能上来看，该培养基属于 。 活动四：探究抗生素对大肠杆菌生长的影响

（1）为探究不同浓度的土霉素(一种抗生素)对水中大肠杆菌生长的影响，结合下图1实验结果，写出实验设计思路：

（2）图1实验结果表明，对大肠杆菌抑制作用最明显的是浓度为 (图中标号)的土霉素。

（3）某研究小组运用上述实验方法还研究了相同浓度的A、B、C三种不同抗生素对大肠杆菌生长的影响。请在图2中图示这一处理方案（可模仿图1加以必要的注解）。

（4）直接给牲口饮用自来水或河水，牲口易出现腹泻。在饮水中加土霉素可预防牲口出现大面积腹泻，但长期大量使用土霉素容易引起大肠杆菌产生抗药性，这一过程的实质是大肠杆菌种群的 发生了变化。

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