全章复习与测试优质公开课教案

微生物的培养与应用测试题

(时间：60分钟

满分：100分) 一、选择题(共15小题，1～10小题每小题3分，11～15小题每小题5分，共55分。每小题只有一个选项符合题意。) 1．下列关于微生物的分离和培养的有关叙述，错误的是(

) A．微生物培养前，需对培养基进行消毒

B．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度

C．测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法

D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源

解析：微生物培养前，需对培养基进行灭菌；为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离，同时还应当有针对性地提供选择培养的条件；当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活细菌；尿素分解菌中的脲酶能将尿素分解为氨，筛选分离时必须以尿素为唯一碳源。

答案：A 2．下列关于细菌的叙述，错误的是(

) A．硝化细菌能以NH3，作为氮源和能源物质

B．某些细菌可以利用光能固定CO2合成有机物

C．生长因子是某些细菌生长过程中需要额外补充的营养物质

D．含伊红和美蓝试剂的培养基不能用来鉴别牛奶中的大肠杆菌

解析：硝化细菌可以利用氧化氨释放的能量用来合成有机物，氨含有氮元素可以提供氮源；蓝藻可以利用光能进行光合作用；生长因子是一类对微生物正常代谢必不可少且不能用简单的碳源或氮源自行合成的有机物，它的需要量一般很少，生长因子一般有维生素、碱基、卟啉及其衍生物、氨基酸等，并不是所有的微生物都需要生长因子，某些微生物不能合成一些生长所必需的物质，必须从外界摄取这些营养物质；伊红和美蓝试剂的培养基可以用来鉴别牛奶中的大肠杆菌，如果菌落呈深紫色，并带有金属光泽，说明有大肠杆菌。

答案：D 3．下列有关微生物培养的说法，正确的是(

) A．制备固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、消毒、倒平板

B．分离能分解纤维素的细菌，要以纤维素作为培养基中唯一碳源

C．配置培养不同微生物的培养基时都要将pH调至中性或微碱性

D．在无氮培养基中加入酚红指示剂可用来鉴定尿素分解菌

解析：制备固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、灭菌、倒平板；分离能分解纤维素的细菌，要以纤维素作为培养基中唯一碳源；配置培养不同微生物的培养基时都要将pH调至能够满足该种微生物的需要；在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂可用来鉴定尿素分解菌。

答案：B 4．关于平板划线法和涂布平板法的叙述不正确的是(

) A．只能应用于固体培养基接种

B．都可以用于微生物的计数

C．接种培养后均可获得单菌落

D．接种用具都需进行严格灭菌

解析：平板划线法和稀释涂布平板法都只能用于固体培养基上接种；稀释涂布平板法又称活菌计数，是由一个单细胞繁殖可成单个菌落这一培养特征设计的计数方法，可对微生物进行计数，而平板划线法不能用于计数；接种换上的菌液经过连续划线或逐步稀释，菌液中的菌体越来越少，最后容易形成单菌落；接种环和涂布器都必须经过灭菌才能使用。

答案：B 5．关于微生物培养基的说法正确的是(

) A．牛肉膏不能提供碳源

B．培养硝化细菌可以不加有机碳

C．刚果红使纤维二糖染色

D．酵母菌酿酒时需持续供氧

解析：牛肉膏能给微生物提供碳源；硝化细菌属于自养型微生物，故培养硝化细菌可以不加有机碳；纤维素可以与刚果红染液反应呈红色；酵母菌酿酒时前期需要供氧，后期应该是严格的无氧发酵。

答案：B 6．为探究大叶木姜子多糖的抑菌效果，研究人员将下列4种菌分别用无菌水稀释成菌悬液，于固体培养基上制成含菌平皿，在平皿上放置经不同浓度大叶木姜子多糖溶液浸泡2～3小时的滤纸片，培养一段时间后，测定各供试菌的抑菌圈直径，结果如下表，相关叙述，错误的是(

)

多糖浓度/% 金黄色葡萄球菌

酵母菌

灰绿曲霉

黑曲霉

10.0 5.0 2.5 1.0 0.5 2.8[来源:学#科#网Z#X#X#K]

2.7 2.3 1.4 1.2 3.3 3.1 2.7 0.3 －

2.6 1.8 1.0 －

－

1.2 0.9 0.3 －

－

A.金黄色葡萄球菌与另外三种菌的主要区别是没有核膜

B．制备含菌平皿可用稀释涂布平板法或平板划线法

C．每个浓度每种菌重复多次实验，所得数据取平均值

D．大叶木姜子多糖对黑曲霉抑制效果最差

解析：金黄色葡萄球菌属于细菌，原核生物，其余三种微生物都是真菌，真核生物，前者没有核膜包被的细胞核，后者都有；根据题干接种使用的是菌悬液，最好应该使用稀释涂布平板法接种；为避免实验误差，每个浓度每种菌重复多次实验，所得数据取平均值；黑曲霉在含有不同浓度的大叶木姜子多糖上产生的抑菌圈的直径最小，抑制效果最差。

答案：B 7．有关平板划线操作不正确的是(

) A．将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红

B．接种环在平板上划线位置是随机的

C．在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰

D．最后将平板倒置，放入恒温箱中培养[来源:学#科#网Z#X#X#K] 解析：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他的金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌；在平板划线时，要划3～5条平行线，而不是随机的；在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰；将平板倒置放在恒温箱。

答案：B 8．如图为分离和纯化分解甲醛细菌的实验过程，其中LB培养基能使菌种成倍扩增，以下说法正确的是(

)

A．需要对活性污泥作灭菌处理

B．②中LB培养基应以甲醛为唯一碳源

C．目的菌种异化作用类型为厌氧型

D．经⑤处理后，应选择瓶中甲醛浓度最低的一组进一步纯化培养

解析：活性污泥不需要进行灭菌处理；②过程用完全培养基培养后，可以获得大量微生物，从而增加目的菌的菌群数量；③过程可以筛选出能分解甲醛的微生物，即培养出以甲醛为唯一碳源的细菌；目的菌种异化作用是需氧型；经⑤处理后，应选择瓶中甲醛浓度最低的一组进一步纯化培养。

答案：D 9．不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是(

) A．氮源为该微生物提供必要的氮素

B．碳源也是该微生物的能源物质

C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质

D．水是该微生物的营养要素之一

解析：以CO2为唯一碳源的自养型微生物需要的营养物质有碳源、氮源、水、无机盐和生长因子，对自养微生物而言，其氮源可以是有机氮，也可以是无机氮，都能为微生物提供氮素；碳源CO2只能为微生物提供碳素，不能为其提供能量，其能量可能来自光能或化学能。但对异养微生物而言，其碳源为有机碳，既可以为微生物提供碳素，又能为其提供能量。

答案：B 10．分离土壤中分解尿素的细菌的实验操作中，对于获得纯化的尿素分解菌的单菌落影响最大的是(

) A．制备浸出液的土壤取自土壤的表层

B．涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌

C．牛肉膏蛋白胨培养基中添加尿素作为氮源

D．接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒

解析：制备浸出液的土壤取自土壤的表层与纯化的尿素分解菌的单菌落有关但影响不大；涂布器未在酒精灯外焰上的烧灼灭菌可能会造成污染，与纯化的尿素分解菌的单菌落有关但影响不大；该培养基必须以尿素为唯一的氮源，不能使用牛肉膏蛋白胨培养基或在其中添加尿素作为氮源，该操作对实验影响最大；接种操

作的双手未用酒精进行消毒，可能会造成污染，但与纯化的尿素分解菌的单菌落有关但影响不大。

答案：C 11．甲、乙、丙是三种微生物，下表Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖；甲能在Ⅰ中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是(

) [来源:Zxxk.Com]

Ⅰ

Ⅱ

Ⅲ

＋

＋

＋

＋

＋

＋

＋

＋

＋

＋

－

＋

－

＋

＋

＋

＋

＋

＋

＋

＋

＋

＋

＋

粉状硫10 g K2HPO44 g FeSO40.5 g 蔗糖10 g (NH4)2SO4 0.4 g H2O100 mL MgSO49.25 g CaCl2 0.5 g

A.甲、乙、丙都是异养微生物

B．甲、乙都是自养微生物、丙是异养微生物

C．甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物

D．甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物

解析：从表中所列的三种培养基成分着手，培养基Ⅰ中缺少氮源，培养基Ⅱ中缺少有机碳，培养基Ⅲ中营养成分最全。由题意中所给的情况分析，只有甲能在培养基Ⅰ中生长，而乙、丙不能说明甲能自行固氮；乙能在Ⅱ中生长，说明乙可自行合成有机碳，是一种自养微生物；而丙只能在Ⅲ中生长，说明它既不能固氮也不能自行合成有机物。由此可知甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物。

答案：D 12．某生物兴趣小组以带有落叶的表层土壤(深5 cm左右)为实验材料，研究土壤微生物在适宜温度下的分解作用，对土壤处理情况见下表。与此有关的叙述不正确的是(

) 组别

1组

2组

3组

4组

土壤

处理

灭菌

湿润

不灭菌

湿润

灭菌

较干燥

不灭菌

较干燥

A.探究的问题是不同土壤湿度条件下，土壤微生物对落叶的分解作用

B．预期结果是1、3组的落叶不被分解，2、4组中的落叶被不同程度的分解

C．为了控制实验中的无关变量，作为实验材料的落叶也应进行灭菌处理

D．该实验的自变量为土壤是否灭菌处理，实验中的对照组是1和3 解析：实验组2组和4组可以形成对照，变量是土壤的湿润程度，来研究土壤微生物对落叶的分解作用；该实验的变量有两个，一个是灭菌、不灭菌，一个是湿润、不湿润。自变量是灭菌、不灭菌，在湿润条件下1、2形成对照，在干燥条

件下3、4形成对照，所以1、3分别是两组对照实验的对照组；为了控制实验中的无关变量，作为实验材料的落叶也应进行灭菌处理，消除微生物的影响；1组和3组由于没有微生物，落叶不被分解，2组和4组由于有微生物，落叶不同程度地被分解。

答案：D 13．通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出(

) ①大肠杆菌

②霉菌

③放线菌

④固氮细菌

A．④③②

B．④②③

C．④①②

D．④②①

解析：根据题意，固氮细菌的生长不需要从培养基上获得氮源，可在缺乏氮源的培养基上正常生长；加入青霉素的培养基上不能生长细菌和放线菌，则可收获霉菌和酵母菌；加入酚的培养基使细菌和霉菌不能正常生长，而放线菌却能利用酚作原料合成自身的产物。

答案：B 14．MRSA菌是一种引起皮肤感染的“超级细菌”，对青霉素等多种抗生素有抗性。为研究人母乳中新发现的蛋白质H与青霉素组合使用对MRSA菌生长的影响，某兴趣小组的实验设计及结果如下表。下列说法正确的是(

) 组别

培养基中的添加物[来源:学科网]

MRSA菌

1 2 3 100 μg/mL蛋白质H 20 μg/mL青霉素

2 μg/mL青霉素＋100 μg/mL蛋白质H 生长正常

生长正常

死亡

A.细菌死亡与否是通过光学显微镜观察其细胞核的有无来确定的

B．第2组和第3组对比表明，使用低浓度的青霉素即可杀死MRSA菌

C．实验还需设计用2 μg/mL青霉素做处理的对照组

D．蛋白质H有很强的杀菌作用，是一种新型抗生素

解析：细菌是原核生物，其细胞中无细胞核，因而不能通过光学显微镜观察其细胞核的有无来确定细菌的死亡与否；第2组和第3组对比说明使用低浓度青霉素和高浓度蛋白质H可杀死MRSA菌；第3组缺少2 μg/mL青霉素做处理的对照组；抗生素是由微生物产生的具有抗菌作用的物质，而蛋白质H是乳腺细胞产生，不属于抗生素。

答案：C 15．如表为某培养基的配方，有关叙述正确的是(

) 成分

牛肉膏

葡萄糖

K2HPO4

伊红

美蓝

青霉素

琼脂

蒸馏

含量

10 g 10 g 2 g 0.4 g 0.065 g 1万单位

适量

1000 mL

A.此培养基是天然鉴别培养基

B．能在此培养基上生长的大肠杆菌，拟核上有抗青霉素的基因

C．此培养基可以用于选育转基因大肠杆菌菌种的基因工程的操作过程中

D．此培养基可以用来检测自来水中细菌含量是否符合饮用水标准

解析：此培养基属于鉴定大肠杆菌的半合成培养基，另外有青霉素还具有选择作用，A错误；能在此培养基上生长的大肠杆菌，抗青霉素的抗性基因一般位于大肠杆菌的质粒上，B错误；大肠杆菌常作为基因工程的工程菌，此培养基可以用于选育转基因大肠杆菌菌种的基因工程的操作过程中，C正确；此培养基只能用来检测自来水中大肠杆菌含量是否符合饮用水标准，D错误。

答案：C 二、非选择题(共5小题，共45分) 16．(8分)在调查和分离湖水中耐盐细菌的实验中，先将10 L湖水水样浓缩至10 mL，然后各取浓缩水样1 mL，涂布到多个培养皿中培养。请回答：

(1) 可以通过提高培养基中________的浓度，筛选被调查细菌，这种培养基被称为________培养基。

(2) 要提高实验结果的可靠性，排除培养基未彻底灭菌的可能性，应该设置的对照组是________。为检验(1)中筛选方法的效果，可以设置的对照组是____________________________________。

(3) 在微生物的培养过程中，实验室对培养基灭菌常用的方法是________。为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿________培养。在培养基上产生的单个菌落在生态学中可以被称为________。

(4) 根据培养皿上菌落的平均数可以计算湖水中该种细菌的密度，但计算的数据要比实际活菌的数目少，原因是________________。

解析：(1)要分离耐盐细菌，需要在培养基中加盐来选择，因此可以通过提高培养基中的盐浓度，筛选耐盐细菌，该培养基有选择作用，属于选择培养基。(2)要提高实验结果的可靠性，排除培养基未彻底灭菌的可能性，可设置对照组不接种该耐盐菌，要证明选择培养基是否有选择作用，对照组不加高浓度的盐。(3)培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌。为防止冷凝水滴入培养基中，需将培养皿倒置放置。单个菌落是由该细菌繁殖形成的，属于一个种群。(4)当两个或多个细胞连在一起时，在平板上观察到的是一个菌落，所以统计的菌落数往往比活菌的实际数目偏少。

答案：(1)盐(或NaCl)

选择

(2)未接种(或接种等量无菌水)的培养皿

未加高浓度盐的培养液

(3)高压蒸汽灭菌

倒置

种群

(4)当两个或多个细胞连在一起时，在平板上观察到的是一个菌落

17．(8分)图甲是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，图乙是脲酶基因转录的mRNA部分序列。

图甲

图乙

(1)图中选择培养基应以________ 为唯一氮源；鉴别培养基还需添加________作为指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成________ 色。

(2)在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105 的土壤样品液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191。

该过程采取的接种方法是________ ，每克土壤样品中的细菌数量为________ ×108个；与血细胞计数板计数法相比，此计数方法测得的细菌数较________ 。

(3)现有一菌株的脲酶由于基因突变而失活，突变后基因转录的mRNA在图乙箭头所示位置增加了70个核苷酸，使图乙序列中出现终止密码(终止密码有UAG、UGA和UAA)。突变基因转录的mRNA中，终止密码为________ ，突变基因表达的蛋白质含________ 个氨基酸。

解析：(1)由于筛选产脲酶，脲酶能够催化尿素分解为氨，故应以尿素为唯一氮源，培养基中可以加入酚红指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成红色。

(2)用于计数细菌菌落数接种方法是稀释涂布平板法，统计的菌落数应介于30～300之间，故选择细菌菌落数为156、178和191的平板计数，每克土壤样品中的细菌数量为156＋178＋191÷0.1×105＝1.75×108。由于两个或多个细菌3连接在一起时，往往统计的是一个菌落，故用此方法测得的细菌数偏低。

(3)突变基因转录的mRNA中，终止密码为UGA，由于增加70个碱基，mRNA中碱基总数(由于终止密码子不编码氨基酸，故除去终止密码子含3个碱基)＝271＋2＋72＝345，由于mRNA上一个密码子含三个碱基决定一个氨基酸，故突变基因表达的蛋白质含345÷3＝115个氨基酸。

答案：(1)尿素

酚红

红

(2)稀释涂布平板法

1.75

少

(3)UGA 115 18．(8分)富集培养是微生物学中最强有力的技术手段之一。主要是指利用不同微生物间生命活动特点的不同，设定环境条件，使仅适应该条件的微生物旺盛生长，从而使其在微生物群落中的数量大大增加，人们能够更容易地从自然界中分离到所需的特定微生物。富集条件可根据所需分离微生物的特点，从物理、化学、生物及综合多个方面进行选择，如温度、pH、紫外线、高压、光照、氧气、营养等。下图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。

(1)实验原理是________________________________________。

(2)本实验所需培养基为________，碳源为__________________。

(3)①～③重复培养的目的是_____________________________。

(4)⑤的菌落中大部分是能降解____________________的微生物。

(5)⑥为________组，⑦为________组，设置⑥的目的是

_____________________________________________________。

解析：本实验基本原理、操作过程及操作注意事项都和分离纤维素分解菌类似。本实验所用培养基是以对羟基苯甲酸为唯一碳源的选择培养基，培养的微生物是能降解对羟基苯甲酸的微生物。经过①②③的重复培养，增大了分解对羟基苯甲酸的微生物的比例。最后通过设立对照及使用单菌落挑取法将培养基上的单菌落分别接种到含有对羟基苯甲酸及不含有该物质的培养基上，验证是否得到了目的微生物。

答案：(1)利用以对羟基苯甲酸为唯一碳源的选择培养基，经富集培养，选择出能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物

(2)选择培养基

对羟基苯甲酸

(3)增大分解对羟基苯甲酸微生物的比例

(4)对羟基苯甲酸

(5)对照

实验

说明通过富集培养的确得到了目的微生物

19．(8分)已知某细菌的两种突变类型细菌Ⅰ和细菌Ⅱ的营养条件和菌落特征都相同，但细菌Ⅰ能分解有机物A而不能分解有机物B，细菌Ⅱ能分解有机物B而不能分解有机物A。现有这两种类型细菌的混合液样品，要将其分离，有人设计了一种方案，部分操作步骤如图。

(1)步骤一使用的是牛肉膏蛋白胨培养基，其中含有细菌生长所需的水、

________等营养物质(至少写出3种)；该培养基是[

](多选)。[来源:学.科.网]

A．固体培养基 B．液体培养基

C．通用培养基 D．选择培养基

(2)步骤一采用 ________接种，此接种法可使接种细菌逐渐稀释，经适宜条件培养，可能形成单个、独立的 ________，最终可能得到纯种的细菌；步骤二各瓶中的培养基加入了A、B两种有机物的目的是

__________________________________________________。

(3)无论是培养基(液)，接种前除了要调节pH外，都必须对培养基进行

________ ；接种时必须在超净工作台及酒精灯火焰附近操作，原因是

______________________________________________。

(4)步骤三中，若对其中某瓶培养液中A、B两种有机物含量进行测定，预测可能的结果并推测结论：

①A与B两种化合物含量都明显下降，说明瓶中同时存在细菌Ⅰ和细菌Ⅱ，两者未分离。

②___________________________________________________。

③___________________________________________________。

(5)经步骤三后，若所有瓶中培养液的A、B化合物含量测定结果都下降，瓶中同时存在两种细菌，未分离的情况，则应 ________，再测定各瓶中A、B两种化合物的含量，直到分别获得每种类型细菌为止。

解析：(1)牛肉膏蛋白胨培养基中含有细菌生长所需的水、碳源、氮源、无机物、生长因子等营养物质；该培养基一般加琼脂制成固体培养基，并属于通用培养基。

(2)由图可知，步骤一采用平板划线法接种，此接种法可使接种细菌逐渐稀释，经适宜条件培养，可能形成单个、独立的菌落，最终可能得到纯种的细菌；步骤二各瓶中的培养基加入了A、B两种有机物的目的是筛选、分离两种类型的细菌。

(3)无论是培养基(液)，接种前除了要调节pH外，都必须对培养基进行灭菌；接种时必须在超净工作台及酒精灯火焰附近操作，原因是防止杂菌污染。

(4)若对其中某瓶培养液中A、B两种有机物含量进行测定，若A与B两种化合物含量都明显下降，说明瓶中同时存在细菌Ⅰ和细菌Ⅱ，说明两者未分离；若A含量明显下降，而B含量几乎未变，则得到细菌Ⅰ；若B含量明显下降，而A含量几乎未变，则得到细菌Ⅱ。

(5)经步骤三后，若所有瓶中培养液的A、B化合物含量都下降，说明两种细菌还未分开，则需要重复步骤一和步骤二再测定各瓶中A、B两种化合物的含量，直到分别获得每种类型细菌为止。

答案：(1)碳源、氮源、无机物、生长因子(任意三种，仅写出一种或两种即可) A、C (2)平板划线

菌落

筛选、分离两种类型的细菌

(3)灭菌

防止杂菌污染

(4)②A含量明显下降，而B含量几乎未变，则得到细菌Ⅰ

③B含量明显下降，而A含量几乎未变，则得到细菌Ⅱ

(5)重复步骤一和步骤二 20．(13分)Ⅰ.细菌常被应用于生产生活中，如有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的细菌。

(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 ________为唯一碳源的固体培养基上。为筛选出高效菌株，可比较单菌落周围清晰区域的大小。一般情况下，如图中清晰区域越大说明 ____________。

Ⅱ.另一同学将第一步筛选得到的甲、乙、丙三种细菌分别接种到A、B、C

三种培养液中，经培养后分别测得它们繁殖一代所需的时间，结果如表所示：

培养液成分

－A.葡萄糖、NaCl、PO34、MgSO4

－B.葡萄糖、NaCl、PO34、MgSO4、8种氨基酸

－C.葡萄糖、NaCl、PO34、MgSO4、19种氨基酸

繁殖一代所需的时间(分钟) 甲

43 28 25 乙

100 40 25 丙

－

－

80 注：“－”表示细菌没有生长。

(2)在A培养基中增殖较快的细菌是____________。丙细菌可以在C培养液中繁殖却无法在B培养液中繁殖，原因是 ___________。

(3)由于微生物的营养类型复杂，不同的微生物对营养物质的需求是不同的。如果培养能进行光合作用的微生物，培养基中的营养物质是 ________(多选题)。

A．碳源

B．氮源

C．生长因子

D．无机盐

E．水

Ⅲ.下面是有关某细菌G的四项实验：

实验1：将G接种于一般培养基上，结果出现菌落。

实验2：用一定剂量的紫外线处理G，产生突变种g1。将g1接种于一般培养基后，不出现菌落；但在培养基内添加营养物质甲后，就出现菌落。

实验3：用另一剂量的紫外线处理G，得突变种g2，将g2接种于一般培养基后，也不出现菌落；但在培养基内添加营养物质乙后，就出现菌落。

实验4：将g1和g2一起接种于一般培养基上，数日后出现菌落。

(4)细菌g1和g2分别接种于一般培养基，均不能生长。其原因是用紫外线处理导致细菌G发生了 ________，从而缺乏合成营养物质甲或乙的酶。

A．基因突变

B．基因重组

C．染色体畸变

D．不可遗传变异

(5)实验1至3表明，物质甲和乙均是细菌G在代谢过程中产生的代谢产物。在实验2和3中，它们是作为 ________加入一般培养基的。

A．碳源 B．氮源 C．生长因子 D．无机盐

(6)实验4中出现菌落的原因可能是 _____________________。

解析：(1)从实验目的欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的细菌，可以得出该培养基属于选择培养基，培养基的成分应以原油为唯一碳源。细菌可分解原油，分解能力越强，形成的透明圈越大，透明度越高，一般清晰区域越大说明该菌株的降解能力强。

(2)观察题图表格可以看出在A培养基中，能生长的细菌是甲和乙，甲繁殖一代需要的时间短，所以增殖较快。比较B、C培养基的成分可知，C培养基的氨基酸的种类比B培养基多，所以丙细菌可以在C培养液中繁殖却无法在B培养液中繁殖，原因可能是B培养液中缺乏丙细菌生长所必需的氨基酸。

(3)如果培养能进行光合作用的微生物，培养基中的营养物质中不需要添加碳源和生长因子。

(4)分析资料可知紫外线照射后发生了基因突变，突变后的g1不能合成甲物质，突变后的g2不能合成乙物质。所以细菌g1和g2分别接种于一般培养基，均不能生长。其原因是用紫外线处理导致细菌G发生了基因突变，从而缺乏合成营养物质甲或乙的酶。

(5)实验1至3表明，物质甲和乙均是细菌G在代谢过程中产生的代谢产物。在实验2和3中，它们是作为生长因子加入一般培养基的。

(6)实验4中出现菌落的原因可能是细菌g1能够合成营养物质乙，g2能够合成营养物质甲，因此一起培养可以互相支持保证必需的营养要素。

答案：(1)原油

该菌株的降解能力强

(2)甲

B培养液中缺乏丙细菌生长所必需的氨基酸

(3)B、D、E (4)A (5)C (6)细菌g1能够合成营养物质乙，细菌g2能够合成营养物质甲，因此一起培养可以互相支持保证必需的营养要素