课题3　分解纤维素的微生物的分离优质课教案整理

自辅教学案

科目：高二·生物

主备人：李方方 审核人：刘焕玲 授课时间：

课题：2-3分解纤维素的微生物的分离

第1课时（总第6课时）

课型：新授

【目标要求】

［学习目标］

1．简述纤维素酶的种类及作用。

2．阐明从土壤中分离出分解纤维素的微生物。

3．讨论分解纤维素微生物的应用价值。

［学习重点］

▲阐明从土壤中分离出分解纤维素的微生物。

［学习难点］：

阐明从土壤中分离出分解纤维素的微生物。

【过程与方法】

［自学提要］

一、基础知识

（一）纤维素与纤维素酶

1．纤维素是由 组成的 类物质， 是自然界中纤维素含量最高的天然产物，此外，木材、作物秸秆等也富含纤维素。

2．纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即 、 和

，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成 。正是在这三种酶的协同作用下，纤维素最终被水解成葡萄糖，为微生物的生长提供营养，同样，也可以为人类所利用。

3．在做纤维素酶分解纤维素的实验过程中，如果没有摇床，可以采用 方法代替。

（二）纤维素分解酶的筛选

4．筛选纤维素分解菌可以用 法，这种方法能够通过 直接对微生物进行筛选。刚果红是一种 ，纤维素+刚果红→ 复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红一纤维素的红色复合物无法形成，培养基中出现以纤维素分解菌为中心的 ，因此，可以通过是否产生 来筛选纤维素分解菌。

思考：利用刚果红染色的方法有几种？各自的优缺点是什么？

5.筛选中用到的两种培养基

培养基组分

含量

提供的主要营养

(1)如右图为纤维素分解菌的 培养

纤维素粉

5g

碳源

基，此培养基为 培养基。能够产 NaNO3

lg

氮源、无机盐

生 酶的微生物才能利用作为碳源Na2HP04.7H20 1.2 g

和能源物质；不能分解纤维素的微生物 KH2P04

0.9 g 由于缺乏 而不能正常生长繁殖， MgS04·7H20 0.5 g

无机盐

因此该培养基具有 作用。

KC1 O．5g

酵母膏

0.5 g 生长因子、碳源、氮源

水解酶素

0.5 g 氮源、生长因子

将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1000 mL

(2)鉴别纤维素分解菌的培养基（ 培养基）

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培养基组分

含量

CMC-Na 酵母膏

KH2P04

琼脂

土豆汁

lg 0.25 g 15 g 提供的主要营养

碳源、氮源、生长因子

无机盐

凝固剂

5～10 g 碳源

100 mL 碳源、生长因子

将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1 000 mL 二、实验设计

6．分离分解纤维素的微生物的实验流程图如下： → →梯度稀释→ → 。

思考：⑴此流程图与样品的稀释和稀释液的取样培养流程图有何异同？

⑵为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌？

⑶将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？

三、结果分析与评价

7．如何判断培养基的制作是否合格？如何判断选择培养基是否筛选出目的菌落？

对照的培养基在培养过程中 菌落生长，则说明培养基制作合格。如果鉴别培养基中观察到产生 的菌落，则说明可能获得了分解纤维素的微生物。

8．分离的结果是否一致？

能够分解纤维素的微生物种类很多，不仅有细菌，还有霉菌、放线菌等。这些微生物的菌落特征各不 ，分解纤维素的能力也不相同，所以形成的菌落大小、形态以及透明圈的大小并不相同。由于在土壤中细菌的数量远远高于真菌和放线菌的数量，因此最容易分离得到的是能够分解纤维素的细菌。但由于所取土样的环境不同，也可能得到能够分解纤维素的真菌和放线菌等不同的分离结果。

［自学反馈］

［探究释疑］

（14全国卷1）植物秸秆中的纤维紊可被某些微生物分解。回答下列问题：

(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将____ 分解成 。

(2)在含纤维素的培养基中加入刚果组(CR)时，CR可与纤维素形成 色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的____ 。

(3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：

酵母膏

无机盐

淀粉

纤维素粉

琼脂

CR溶液

水

+ + + + + - - + + + + + 培养基甲

+ 培养基乙

+

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注：“+”表示有，“一”表示无。

据表判断，培养基甲 （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是____ ；培养基乙 （填

“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是____ 。

［精练拓展］

1．下列不属于纤维素酶组分的是( )。

A．C1酶 B．CX酶 C．葡萄糖苷酶 D．半乳糖苷酶

2．微生物体内能够使纤维素分解成纤维二糖的酶是( )。

A．C1酶和CX酶 B．C1酶和葡萄糖苷酶

C．CX酶和葡萄糖苷酶 D．C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶

3．纤维素分解菌的筛选原理是( )。

A．刚果红可以与纤维素形成红色复合物

B．刚果红可以与水解的纤维二糖和葡萄糖形成红色复合物

C．刚果红可以与纤维素酶形成红色复合物

D．刚果红可以与纤维素分解菌结合形成红色复合物

4．在将样品稀释涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基之前，通常要进行选择培养，其目的是( )。A．分离纤维素分解菌 B．加快纤维素分解菌的生长速度

C．使纤维素分解菌均匀地分布在稀

D．增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物

5．要将能分解纤维素的细菌从土壤中分离出来，应将它们接种在( )。

A．加入指示剂的鉴别培养基上 B．含有蛋白胨的固体培养基上

C．只含纤维素粉而无其他碳源的选择培养基上 D．含四大营养要素的培养基上

6．使用刚果红染色时，加入刚果红应在( )。

①制备培养基时

②梯度稀释时

③倒平板时

④涂布时

⑤长出菌落时

A．①③ B．②⑤ C．③⑤ D．④⑤

7．分离土壤中纤维素分解菌所用到的方法是( )。

①稀释倒平板法

②涂布平板法

③单茵落挑取法

④选择培养基分离

A．①② B．②③④ C．②③ D．①③④

8．纤维素酶在工业生产中的应用是( )。

①饲料添加剂

②白酒的生产

③蔬菜生产

④纺织工业

A．①②③ B．①②④ C．②③④ D．①②③④

9．某同学进行纤维素分解菌的分离与鉴别，下列能说明实验操作规范的是( )。

A．未接种的培养基上长出了菌落 B．选择培养结束后，选择培养基澄清

C．在长出菌落的培养基上，覆盖CR溶液后，没有出现透明圈

D．在添加有CR溶液的培养基上，菌落周围出现透明圈

10.刚果红染色法有两种方法，下列关于这两种刚果红染色法的说法，不正确的是( )。

A．方法一先加刚果红进行颜色反应，然后再培养微生物

B．方法二等培养基上长出菌落后，再加入刚果红

C．方法一、方法二均出现透明圈

D．透明圈是纤维素水解产物与刚果红反应后形成的复合物

11.纤维素、纤维素酶和控制纤维素酶合成的物质，它们的基本组成单位依次是( )。

A．葡萄糖、葡萄糖和氨基酸 B．葡萄糖、氨基酸和核苷酸

C．氨基酸、氨基酸和核苷酸 D．淀粉、蛋白质和核酸

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12.纤维素酶在植物细胞工程方面有着广泛的应用，你认为在下列哪种生物体中提取纤维素酶比较合理？( ) A．发酵酵母 B．在腐木上生长的霉菌 C．高等植物细胞 D．白蚁体内的鞭毛虫

13.分析下面纤维素分解菌的鉴别培养基的配方，请回答问题。

(1)此配方为____培养基（根据物理状态划分）。

(2)若用此培养基鉴别纤维素分解菌，还应加入 染料。

(3)纤维素分解菌能否在不含纤维素但富含其他有机质的环境中生存？ (4)若通过实验测定该培养基用于鉴别纤维素分解菌的最适pH，仅凭一次实

验能否准确测出？____。原因是___ _ 。

14.植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题：

成分

含量

(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分CMC-Na 5～l0 g 组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将___ _分解成__ __。

lg (2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时，CR可与纤维素形成__ 酵母膏

__色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基KH2P04

0. 25 g 上会出现以该菌的菌落为中心的___ _。

琼脂、

15 g (3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同土豆汁

100mL 学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：

将上述物质溶解后，用蒸

酵母膏

无机盐

淀粉

纤维素粉

琼脂

CR溶液

+ + + - + 水

+ 馏水定容到1000 mL 注：“+”表示有，“一”表示无。

培养基乙

+ + + - + + +

据表判断，培养基甲____（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是_____ ___；培养基乙 （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是__ __。

15.随着环境污染的加剧和石油危机的出现，越来越多的国家使用乙醇作为燃料。实际生产中，玉米和麦草的秸秆可以用来生产燃料乙醇，已知秸秆的主要成分是纤维素，请回答下列相关问题。

(1)从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制____培养基，该培养基中需要加入 作为唯一碳源。纯化菌种时，为了得到单一菌落，常采用的接种方法有两种，即 和 。

(2)经过梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是____。当形成菌落以后，可以根据菌落周围是否产生 来筛选纤维素分解菌。当利用涂布器涂布平板之后，需要对涂布器进行____处理。

(3)产生葡萄糖后需要用 （微生物）发酵产生酒精，然后在酸性条件下使用___ _检测发酵产物是否为酒精，该试剂可与酒精反应，使溶液由橙色变成灰绿色。

培养基甲

+

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16.现在大力提倡无纸化办公，但是每年仍然不可避免地产生大量的废纸，其主要成分是木质纤维，人类正努力将其转化为一种新的资源——乙醇。下图是工业上利用微生物由纤维素生产乙醇的基本工作流程，请回答相关问题：

(1)①环节所需要的微生物在自然界中大多分布在__ __的环境中。将从土壤中获得的微生物培养在以___ _为唯一碳源、并加入__ __的培养基上筛选，选择周围有___ _ 的菌落。

(2)如上所述的筛选中获得了三个菌落，对它们分别培养，并完成环节②，且三种等量酶液中酶蛋白浓度相同，则你认为三种酶液的活性____ （填“一定相同”“不一定相同”或“一定不同”），可以通过对_ ___进行定量测定来验证。

(3)生产中可以满足④环节的常见菌种是_ ___，为了确保获得产物乙醇，⑤环节要注意___ _，④所示的操作过程要注意避免 ____。

【归纳整理】画出本节课的思维导图

【学/教反思】

专题二 微生物的培养与应用

考纲解读：

最新考纲

1．微生物的分离和培养

2．某种微生物数量的测定

3．培养基对微生物的选择作用

权威解读

利用平板划线法和稀释涂布平板法进行微生物的分离与培养

利用平板计数法或显微计数法测定某种微生物的数量

学会配制选择培养基，并尝试从土壤中分离某些细菌（如分解尿素的细菌和分解纤维素的细菌）

4．利用微生物发酵来生产特定的产尝试利用微生物的发酵来生产果酒、果醋、腐乳等特定的食品

物以及微生物在其他方面的应用

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思维导图

高考试题：

1．（2013江苏单科，18，2分）某研究小组从有机废水中分离微

生物用于废水处理。下列叙述正确的是 ( ) A．培养基分装到培养皿后进行灭菌

B．转换划线角度后需灼烧接种环苒进行划线

C．接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养

D．培养过程中每隔一周观察一次

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2．（2013安徽理综，6，6分）下图为通过DNA分子杂交鉴定含有某特定DNA的细菌克隆示意图。下列叙述正确的是( )

A．根据培养皿中菌落数可以准确计算样品中含有的活菌实际数目

B．外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制

C．重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接

D．放射自显影结果可以显示原培养皿中含有特定DNA的细菌菌落位置

3．（2012北京理综，5，6分）高中生物学实验中，在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是 ( ) A．将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中 B．将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上

C．将转基因植物叶片接种到无菌培养基上D．将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上

4．（2012山东基本能力，55，1分）除了高温加热以外，其他灭菌方法还有 ( ) A．紫外线照射 B．真空包装 C．用保鲜膜密闭 D．添加防腐剂

5．（2013课标，39，15分）临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。 回答下列问题：

(1)为了从样本中获取致病菌单菌落，可用 法或 法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。

(2)取该单菌落适当稀释，用 法接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24 h，使其均匀生长，布满平板。

(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A ；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B ；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明 ；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明 圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的 。

(4)根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素 。

6．（2013四川理综，10 ,12分）普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的a-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）。

(1)图甲中，过程①需要的酶

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有 。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以__ 作为唯一碳源。②、③过程需重复几次，目的是 。

(2)某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是 ；推测该同学接种时可能的操作失误是 。

(3)以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种 菌的发酵罐需要先排气，其原因是 。

(4)用凝胶色谱法分离a-淀粉酶时，在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较____ 。

7．（2011课标，39，15分）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：

(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲，该培养基属于 培养基。

(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 和

(3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力 。

(4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 和

。无菌技术要求实验操作应在酒精灯 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。

8．（2010山东理综，34，8分）生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗。科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。

(1)用于生产生物柴油的植物油不易挥发，宜选用 、 方法从油料作物中提取。

(2)筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供____，培养基灭菌采用的最适方法是 法。

(3)测定培养液中微生物数量，可选用 法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测 以确定其应用价值；为降低生物柴油生产成本，可利用 技术使脂肪酶能够重复使用。

(4)若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的 技术。

9．（2009宁夏理综，40，15分）(1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑 和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、

、 等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。

(2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行____（消毒、灭菌）；操作者的双手需进行清洗和 ；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能 。

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(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的 。

(4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的 。

(5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是 。

(6)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及培养物必须经过 处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

单元检测：

1．微生物的代谢速度与高等动植物相比快得多，下列哪项不是这一生命现象的原因( ) A．微生物表面积与体积比很大 B．微生物与外界环境物质交换迅速

C．微生物细胞直径小 D．微生物体内酶的活性比动植物高

2．下列有关微生物营养物质的叙述中，正确的是( )。

A．是碳源的物质不能同时是氮源 B．凡是碳源都能提供能量

C．除水以外的无机物只提供无机盐 D．有些无机氮源也能提供能量

3．培养SARS病毒时，应选用( ) A．固体培养基 B．含有多种无机盐的培养液 C．活的鸡胚 D．牛肉汤

4．下列叙述中不属于消毒方法的是( )。

A．在100℃下煮沸5—6 min杀死微生物的细胞和部分芽孢

B．用酒精擦拭双手 C．用氯气处理水源

D．用高压蒸汽锅将试管内外所有微生物的细胞、芽孢和孢子杀死

5．下面四种菌落分布图中，不可能是用稀释涂布平板法得到的是( )。

6．下列常用的无菌操作中错误的是( )。

A．无菌操作的目的是防止杂菌污染

B．用酒精擦拭双手的方法是对操作者的双手进行消毒

C．实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行

D．玻璃器皿（吸管、培养皿）可用酒精擦拭

7．下列叙述错误的是( )。

A．培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素

B．培养霉菌时需将培养基的pH调至碱性

C．培养细菌时需将pH调至中性或微碱性

D．培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件

8．分离土壤中分解尿素的细菌时，对培养基的要求是( )。

①加尿素 ②不加尿素 ③加琼脂 ④不加琼脂⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖

⑦加硝酸⑧不加硝酸盐 A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧ C．①③⑤⑧ D．①④⑥⑦

9．在接种的过程中，下列操作不正确的是( )。

A．将接种环灼烧灭菌 B．接种时，取下试管的棉塞后要将试管口灼烧灭菌

C．将接种环伸入菌种管内，先接触长菌多的部位

D．要将刚接完种的试管的管口灼烧灭菌后加塞

10.将圆褐固氮菌接种到彻底灭菌的固体培养基上经过一段时间培养，就能够得到( )。

A．菌丝 B．无一定形态的群体 C．单个细菌 D．菌落

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11.在涂布平板操作时错误的是( )。

A．将涂布器在酒精灯火焰上灼烧，直至烧红 B．取少量菌液滴加在培养基表面

C．将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8—10 s再用

D．涂布时可转动培养皿，使涂布均匀

12.某混合样品中微生物R含量极少，要得到大量的R比较理想的方法是采用( )。

A．天然培养基 B．稀释涂布平板法

C．利用适合R生长，但同时抑制或阻止其他种类微生物生长的选择培养基

D．用显微镜直接观察、寻找，再培养

13.将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是( )。

A．对比观察培养基有没有被微生物利用 B．对比分析培养基是否被杂菌污染

C．没必要放人未接种的培养基 D．为了下次接种时再使用

14.下列关于微生物的培养和分离的叙述中，不正确的是( )。

A．细菌能在液体培养基中以二分裂方式迅速扩增

B．噬菌体或大肠杆菌可在蛋白胨培养基中增殖

C．灭菌的目的是消灭与培养菌竞争的杂菌

D．稀释涂布平板法分散细菌得到单菌落的效果更好

45615.测定土壤中细菌的数量一般选10、10和l0倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的234数量一般选用10、10和10倍稀释液，其原因是( )。

A．细菌个体小，真菌个体大 B．细菌易稀释，真菌不易稀释

C．细菌在土壤中的含量比真菌高 D．随机的，没有原因

16.下列说法不正确的是( )。

A．科学家从70—80℃热泉中分离得到耐高温的Taq DNA聚合酶

B．统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1

、M2、M3、M4、M5作为该样品菌落数的估计值

C．设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度 D．同其他环境中的生物相比，土壤中的微生物数量大，种类最多

17.菌落特征常作为鉴定微生物种类的依据。下列关于菌落的叙述，正确的是( )。

A．-个菌落就是单个微生物在液体培养基上迅速生长繁殖，并以此母细胞为中心形成的子细胞团 B．不同种类的微生物其菌落特征完全不一样 C．同一种类的微生物其菌落特征完全一样 D．不同种类的微生物所表现出来的菌落差异是个体细胞形态差异的反映

18.给无氮培养基接种土壤稀泥浆的方法是( )。

A．打开培养皿盖，取一根接种环蘸取少许稀泥浆，轻轻地点接在培养基的表面上

B．取一根接种环在酒精灯的火焰上灭菌后蘸取少许稀泥浆，略微打开培养皿盖，在培养基的表面轻点 C．打开培养皿盖，取一根接种环在酒精灯的火焰上灭菌后蘸取少许稀泥浆，在培养基的表面轻点

D．略微打开培养皿盖，取一根接种环在酒精灯的火焰上灭菌，冷却后蘸取少许稀泥浆，在培养基的表面轻点

19.用稀释涂布平板法来统计样品中尿素分解菌的数目，为了提高实验结果的可信度，往往要设置对照实验，对于对照组的要求不包括以下哪项？( ) A．对照组培养基也严格灭菌，且不接种任何微生物

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B．对照组和实验组培养基放在相同条件下培养

成分

含量

成分

含量

C．所用培养基成分及pH大小完全与实验组一致

K2HP04

2g (NH4) 2S04

1.4 g D．培养基的量的大小与实验组必须绝对相同

20.下表为某种培养基的配方，根据表格可以判断出MgS04·7H20 0.3 g CaCl2

0.3 g ( )．

纤维素粉

20 g 琼脂

20 g A．此培养基可以用来筛选生产纤维素酶的菌种

水

1000mL pH 5.5 g B．此培养基因原料来源广泛，可用于工业生产

C．此培养基可以用来筛选自生固氮菌

D．此培养基中含有微生物所必需的五类营养要素

21.（2009．安徽理综）下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误是

A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板

456 B．取10、10、10倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上

C．将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24--48小时

D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数

22.做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是（ ）

A．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖

B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上

C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落

D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上

23（10分）下图表示利用平板划线法分离纯化细菌的示意图。根据所学生物学知识，完成下列问题。

(1)微生物所需的营养成分一般包括____ 、 、

水和无机盐。

(2)培养微生物时，除考虑微生物生长所需的营养外，还要考虑微生物生长所需的温度、

以及是否需要氧等。

(3)对培养基进行灭菌时，多采用___ _法，而对接种环或涂布器灭菌时则用 法。

(4)平板划线时，为保证每次划线都从上次划线末端的微生物浓度开始，每次划线前都要____ ，平板划线结束后，最后一次划的线不能与第一次划的线____ 。

(5)脲酶可以将尿素分解为NH3，从而使尿素溶液pH升高，这可用 试剂来检验。用纤维素作为唯一碳源的培养基培养微生物，得到的纤维素分解菌中可能还混有 。

24.（2012．上海高考）回答下列关于微生物和酶的问题。

高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图所示。

(1)①过程称为____ ，②过程是为了___ _。

(2)I号培养基称为___ _（按功能分）；该培养基中除了加入淀粉外，还需加入另一种重要的营养成分一。

A．琼脂 B．葡萄糖 C．硝酸铵 D．碳酸氢钠

(3)-般对配制的培养基采用高压灭菌，其中“高压”是为

校训：拒绝平庸 追求卓越 39 校风：务实创新 和谐有序

自辅教学案

科目：高二·生物

主备人：李方方 审核人：刘焕玲 授课时间：

了 。

25.（15山东）

乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，具有重要应用价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如下：

(1)筛选产乳糖酶的微生物L时，宜用__ 作为培养基中的唯一碳源。培养基中琼脂的作用是____ 。从功能上讲，这种培养基属于____ 。(2)培养微生物L前，宜采用____ 方法对接种环进行灭菌．

26.(15江苏)（8分）人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，提高秸秆的营养价值。为了增强发酵效果，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行了研究。

请回答下列问题：

(1)在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是 ___（填序号）。

①酒精灯 ②培养皿 ③显微镜 ④无菌水

(2)在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是 。 (3)向试管内分装含琼脂的培养基时，若试管口粘附有培养基，需要用酒精棉球擦净的原因是___ _。

(4)刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落（见下图）。图中降解圈大小与纤维素酶的____ 有关。图中降解纤维素能力最强的菌株是 （填图中序号）。

错题归纳：

校训：拒绝平庸 追求卓越 40 校风：务实创新 和谐有序