附录4　常用的消毒灭菌操作方法教学设计及课堂实录

附录4 《常用的消毒灭菌操作方法》 教学设计

教学目标：

（一）知识与技能

了解消毒灭菌的基础知识；掌握干热灭菌的操作方法、高压蒸汽灭菌的操作方法和紫外线灭菌的操作方法。

（二）过程与方法

分析各种灭菌的原理，分析各种操作的注意事项，归纳共性，分析差异，增加印象，模拟操作过程，达到熟练操作。

（三）情感、态度与价值观

提高实验安全意识，规范操作意识。形成勇于实践、严谨细致的科学态度和精神。

教学重点：干热灭菌、高压蒸汽灭菌的操作和注意事项。

教学难点：干热灭菌、高压蒸汽灭菌

的操作方法。

教学方法：问题推进，讨论合作，实践操作。

教学过程：

一、

温故知新：1、消毒和灭菌的区别是什么？2、举例说出几种消毒的方法。3、说出几种灭菌的方法。

二、

引入新课

思考判断：以下材料或用具需要消毒或灭菌哪种方法。⑴培养细菌用的培养基与培养皿；⑵玻棒、试管、烧瓶和吸管；⑶实验操作者的双手。具体操作是怎样的呢？我们今天主要学习几种常见的消毒灭菌操作方法。

三、进行新课

（一）、简单介绍灼烧灭菌法。

（二）、干热灭菌的操作方法：

1、

简单介绍干热灭菌箱的构造。

2、

让学生阅读教材85页内容。

3、学生分组讨论以下问题：

（1）、干热灭菌的原理是什么？

（2）、干热灭菌的温度为多少？灭菌时间是多少？ （3）、干热灭菌操作的注意事项有哪些？

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（4）、通常哪些物品可以用干热灭菌法灭菌？ 4、学生分组抢答问题，教师小结给各组打分。

（1）、干热灭菌的原理是什么？

通过加热空气温度升高，使微生物内的蛋白质凝固变性，达到灭菌目的。

（2）、干热灭菌的温度为多少？灭菌时间是多少？ 160-170℃，加热1-2小时。150℃需要加热3-4小时。

（3）、干热灭菌操作的注意事项有哪些？①物品摆放不能太挤，以免妨碍热空气流通；②灭菌物体不能与灭菌箱内壁铁板接触，以免包装纸烤焦起火；③拨动开关，打开灭菌箱排气孔，让温度逐渐上升。当温度升至100℃时，关闭排气孔；④当温度升达到160～170℃时，保持此温度2h;或者保持150 ℃3-4h；⑤干热火菌过程，操作者不能离开灭菌箱；⑥待灭菌箱内温度降到70℃以下后，打开箱门，取出灭菌物品，防止玻璃炸裂；

（4）、通常哪些物品可以用干热灭菌法灭菌？

玻璃器皿或者金属仪器。

5、教师演示操作。

6、学生实践操作：1、用报纸将培养皿包扎好；2、模拟干热灭菌操作。教师和学生点评。

（三））、高压灭菌的操作方法

1、

简单介绍高压蒸汽灭菌锅的组成结构，老师模拟演示操作。

2、学生分组讨论以下问题：

（1）、高压蒸汽灭菌的原理是什么？

（2）、高压蒸汽灭菌的温度为多少？灭菌时间是多少？

（3）、高压蒸汽操作的注意事项有哪些？ （4）、到灭菌时间后，自然降温降压，是不是时间越长越好？ 3、学生抢答，教师补充更正。引导学生总结出干热灭菌法和高压蒸汽灭菌法的区别和联系。

（1）、高压蒸汽灭菌的原理是什么？（高压蒸汽灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时由于蒸汽不能溢出，而增加了灭菌器内的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。）

（2）、高压蒸汽灭菌的温度为多少？灭菌时间是多少？（100Kpa，121℃，20分钟灭菌。）

（3）、高压蒸汽操作的注意事项有哪些？（1、包裹不要装的太挤；锥形瓶与试管口不要

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与筒壁接触，以免冷凝水淋湿包裹瓶口的纸而透入棉塞；拧紧螺栓时，要注意同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，不漏气；要彻底排出冷空气；预热、升温、保温三个环节一定要注意温度和时间；要让锅内温度自然下降，压力表的压力降到0时，再打开盖子，取出灭菌物体。） （4）、到灭菌时间后，自然降温降压，是不是时间越长越好？（不是，不可久不放气，会引起培养基成分变化。放置过久，会由于锅内有负压，盖子打不开。对高压灭菌后不变质的物品，如无菌水、栽培介质、接种用具，可以延长灭菌时间或提高压力。而培养基要严格遵守保压时间，既要保压彻底，又要防止培养基中的成分变质或效力降低，不能随意延长时间。） 4、实践操作：学生模拟高压蒸汽灭菌操作，教师更正强调。

（四）、紫外线灭菌的操作方法

1、学生阅读电子白板紫外线灭菌的操作方法。（表面灭菌和空气灭菌等使用

紫外线

灭菌法，所用器械是

紫外灯

。照射30min，可先喷洒石炭酸或煤酚皂溶液加强消毒效果。）

2、阅读紫外线灭菌的原理。（原理：紫外线杀菌机制主要是因为它诱导了胸腺嘧啶二聚体的形成，从而抑制了DNA的复制。

）

3、教师强调紫外线灭菌的注意事项。（注意事项：由于紫外线对眼结膜及视神经有损伤作用，对皮肤有刺激作用，所以，不能直视紫外线灯光，更不能在紫外线灯光下工作。）

四、学生进行课堂总结

五、课堂巩固练习：

1.下列措施中不属于消毒的是（ ） A.酒精擦拭双手

B.向水中通入少量Cl2 C.皮肤受伤处涂紫药水 D.灼烧接种环

2、细菌培养过程分别采用了高压蒸汽、酒精

、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法

依次用于杀灭哪些部位的杂菌（

）

A.接种环、手、培养基 B.高压锅、手、接种环 C.培养基、手、接种环 D.接种环、手、高压锅

3、将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞后包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入________中灭菌，压力为________，温度为______，时间__________，灭菌完毕拔掉电源，待锅内压力____________，再打开排气阀放气，将试管取出。

4、使用高压蒸汽灭菌锅时注意,先向锅内倒入 ______，把锅内水加热煮沸并将其中原有冷空气彻底排除后将锅密闭。

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