课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教案设计（一等奖）

富顺三中“三五”问题式课堂教学模式

课题名称

：土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

〖学习目标〗

研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定

〖重点难点〗

1.对土样的选取和选择培养基的配制

2.对分解尿素的细菌的计数

〖导学过程〗

一．自主学习

（15分钟）

尿素是一种重要的氮肥，农作物

（能/不能）直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为

，这是因为该种细菌能合成

。

（一）筛选菌株

1.为什么Taq细菌能从热泉中被筛选出来？这是因为热泉70-80℃的高温条件淘汰了 ，而使耐热的Taq细菌被筛选出来。

2.实验室中微生物的筛选原理：人为提供有利于 生长的条件，同时 其他微生物生长。

选择培养基的定义：加入化学试剂抑制不需要的，促进需要的微生物生长；

3.该培养基的营养共有

类，其中，

是碳源，说明它的同化作用类型属于

；

是氮源，说明只有具有

的微生物才能生存，因此，该培养基可以用来筛选分解尿素的细菌。

（二）统计菌落数目

1.统计细菌数目常用方法：

；

2.理论依据：当样品的稀释度足够

时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液的

。

3.为了保证结果准确，一般选择菌落数在

平板进行技术。因此，用于稀释涂布平板法的样品稀释浓度一般是多个浓度梯度。

4.除了以上方法统计细菌数目以外，还可以用

直接计数测定；

（三）设置对照

1、设置对照的主要目的是

对实验结果的影响，提高实验结果的可行度。

班级

小组

姓名

实验设计

1．土壤中的微生物大约有 是细菌，绝大多数分布在 。

2．测定土壤中细菌的数量一般选用 倍的稀释液进行平板培养，一般在 温度下培养 天，每隔 ，小时统计一次菌落数目，选取 时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足导致遗漏菌落数目。

3．土壤中分解尿素的细菌的分离与计数操作中需要注意的问题是 ， ， 。

4．准确鉴定分解尿素细菌的方法是在以尿素为唯一氮源的培养基中加入 ，出现的现象是 。

二、小组合作学习 ( 20分钟) 1 ．什么是选择培养基

？

2.怎样证明此培养基具有选择性呢？

实验组

培养基类型

以尿素为唯一氮源的培养基

对照组

牛肉膏蛋白胨培养基

判断该培养基有无选择性

是否接种

目的

分离尿素细菌

结果

3.如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？

4.计数注意事项

①为了保证结果准确，一般选择菌落数在30——300的平板上进行计数。

②为使结果接近真实值可将同一稀释度加到三个或三个以上的平皿中，经涂布，培养计算出菌落平均数。

③统计的菌落往往比活菌的实际数目

。

5.分析资料回答问题

A同学用106稀释度在培养基中筛选出150个菌落，但其他同学用相同的稀释度只筛选出大约50个菌落，大家都人为A同学的结果有问题，你觉得有哪些因素导致了误差？

①、

；你的设计思路？

②、

；你的设计思路？

6.为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能

富顺三中“三五”问题式课堂教学模式

分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围相同吗？

7.分离不同的微生物采用不同的稀释度

8.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素。

三、课堂学习整合

（5分钟）

四、课堂训练评价

（5 分钟）

1.测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释，其原因是(

) A．细菌个体小，真菌个体大

B．细菌易稀释，真菌不易稀释

C．细菌在土壤中数量比真菌多

D．随机的，没有原因

2.．用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是(

) A．未接种的选择培养基新课标

B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基

C．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基

D．接种了的选择培养基

3.下列是关于检测土壤中细菌总数实验操作的叙述，其中错误的是(

) A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板

B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上

C．将实验组和对照组平板倒置，37 ℃恒温培养24～48小时

D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数

五、课外拓展练习

达标测试卷