复习与测试教案和学案内容

微生物的实验室培养基础过关

班级

姓名

一、培养基的作用及分类

1、培养基要为微生物生长提供所需要的基本营养物质即

，

培养基还要满足微生物生长对

要求。如：

培养乳酸菌时需在培养基中添加

，培养霉菌时需将培养基的PH调至

，培养细菌时需将PH调至

。培养厌氧菌时需要提供

条件。

2、培养基的分类：

（1）按物理性质划分：有加入凝固剂琼脂的是

培养基，用于微生物的分离纯化；没有加入凝固剂琼脂的是

培养基，一般用于微生物的工业生产。只有在

培养基上才可观察到菌落。

（2）按用途划分：可分为

培养基与

培养基：只允许目的菌种生长，而抑制或阻止其他种微生物生长的培养基称作

培养基。如：培养基中加入青霉素可以选出

（细菌或真菌）；培养基中没有碳源可选出

（自养或异养）微生物。

3、牛肉膏与蛋白胨培养基都可以提供的营养物质有

。

二、获得纯净培养物的关键是：

。

比较项目

消毒

灭菌

实验操作空间、

操作者的衣着、手

微生物培养的器皿、

接种工具、培养基

防止杂菌污染的方法

具体的消毒或灭菌方法

接种室/箱——

操作者的手——

接种环/针——

试管口、瓶口——

培养皿、试管——

培养基——

处理方法

处理对象

的物理或化学方法

杀死物体表面或内部的

微生物（

芽孢和孢子）

的物理或化学方法

杀死物体表面或内部的

微生物（

芽孢和孢子）

为避免周围环境中微生物的污染

已灭菌处理的材料

用具

1、制备固体培养基的过程中，在溶化之后，分装灭菌之前要

。在倒平板步骤中，待平板冷凝后要将平板倒置的原因是

。

2、微生物接种常用的方法是

和

；在

（固体/液体）培养基上纯化微生物，纯化微生物常用的方法是

和

。

通过以上两种方法最终可培养得到

。

3、涂布器的灭菌方法是

。

菌种保藏方法

具体保藏过程

临时保藏法

法

保藏温度

的冰箱中

优缺点

保存时间不长，菌种易

将菌种接种到

培养基上，适宜温度下培养待长成菌落。

3~6个月要更换一次培养基。

1mL灭菌的

与1mL待保藏菌液放入

瓶中，充分混合。

1

的长期保存，不利于冷冻箱中

经常使用。

1、

，是研究和应用微生物的前提。

2、

培养基的配制原则有：①

；②

；③

。

3、

微生物培养实验后，所有用过的培养基、培养液等都需要统一进行

后再丢弃，以防造成环境污染和感染操作者本身。

4、

防止杂菌污染常用的方法有

。

5、

实验室常用的消毒方法有

；

实验室常用的灭菌方法有

。

6、培养基制备成功或培养基灭菌彻底的标准是：

。

注意：培养皿（含培养基的）在恒温箱中培养时也要

，以防水珠滴落污染培养基。

7、无菌操作符合要求的标准是：

。如果培养基上

，则说明在接种过程中，无菌操作还未达标。

8、培养基中不添加氮源，可选出

微生物，培养基中不添加碳源，可选出

微生物，培养基中添加的是有机碳源，培养的是

微生物。培养基中提供NH3培养的是

，NH3既是它的

又是它的

。

9、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是：①

②

③

④

⑤

。

10、待培养基冷却到

时，在

附近倒平板。若是试管要搁置成斜面培养基，这是为了

。

11、无论是倒平板还是进行系列稀释和涂布平板都要在

进行。为什么？

。

思考题：

1、无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还要什么目的？

2、为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？

3、在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？

4、在做第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？

5、怎样判断纯化大肠杆菌成功，即分离得到由一个细菌繁殖而来的菌落？

2