课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数优秀获奖教案

石家庄市第一中学教案

教师 马超 学科

生物 年 月 日 第

周 高 年级 班

教材章节

选1第二专题 课题

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

课型

新授课

利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中知识有关微生物的计数。

内容

等级(A)识记

(B)理解

(C)应用

(D)分析

(E)综合

(F)评价

水平

能力能掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术

目标

过程与方法

体验无菌操作的实验过程。

教学目标

知识与能力情感态度

关注我们身边周围都存在细菌，养成讲究卫生的良好习惯。

与价值观

1.教学重点：对土样的选取和选择培养基的配制。

2.教学难点：对分解尿素的细菌的计数。

教学设计

重难点分析教学技术

多媒体课件

设备

学

习

目

标

课

题

概

述

1. 会使用筛选菌株原理。

2.知道实验流程

3.掌握各种试剂的作用

尿素是农业生产中常用的肥料，它可被土壤中的细菌分解，说明这种细菌能够合成分解尿素的酶。与生产生活实际相联系，体现了“科学、技术、社会”教育的丰富素材。

教学

环节

1

教学

环节

分析讲解

回忆专题2里我们上节学习了培养基的配置以及无菌操作技术，下面面关于培养基来学习如何进行细菌的分离，获得所需要的目的微生物。

及无菌操作的

相关知识。

课中

讨论为什么1、阅读课本P21，讲解实例：DNA多聚酶链式反应是一Taq细菌能从种在体外将少量DNA大量复制的技术，此项技术要求使用耐热泉中筛选出高温（93℃）的DNA聚合酶，因为热泉温度70～80℃，淘汰来？

了绝大多数微生物只有Taq细菌被筛选出来。引导学生得到

启示根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找（即

自然界筛选）。

实验室中微生物的筛选原理实验室筛选：人为提供有利

于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑

制或阻止其他微生物生长。

阅读课本P22选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物侧边栏关于本生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。目的课题使用的培是从众多微生物中分离所需要的微生物。

养基成分相关培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为内容，讨论并尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为回答提供碳源氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不和氮源的分别能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择是什么物质。

出分解尿素的微生物。

教师展示各种筛选菌株方法的多媒体图片：

观看图片。讨论培养基如何对微生物进行筛选。

黄石公园热泉

海

导入课题

2

教学

环节

分析讲解

底火山

大肠杆菌显色培养基

实验室筛选SARS菌株

2、统计菌落数目

（1）直接计数法：最常用的显微镜直接计数

（2）间接计数法：最常用方法稀释涂布平板法。

每克样品中的菌株数＝（C÷V）×M

C：某一稀释度下平板上生长的平均菌落数

V：涂布平板时所用的稀释液的体积（ml)

M：稀释倍数

3、设置对照

（1）对照实验是指除了被测试的条件外，其他条件都相同的实验。满足该条件的称为对照组，未满足该条件的称为实验组。设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对

讨论并区别：稀释涂布平板法是用来计数的，而平板划线法是用来纯化的。

设计实验方案：

方案一：由其他同学用与A同学相同土样进行实验；

实验结果的影响，提高实验结果的可信度。

方案二：将A（2）实例：在做分解尿素的细菌的筛选与统计菌落数目同学配制的培的实验时，A同学筛选出约150个菌落，但其他同学只选择养基在不加土出约50个菌落，分析其原因。教师要求学生设计实验方案。

样的情况下进小结：通过这个事例可以看出，实验结果要有说服力，行培养，作为对照的设置是必不可少的。

空白对照，以

证明培养基是

否受到污

染。

4、实验设计

3

教学

环节

分析讲解

讨论思考如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？

答：统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好能统计3

个平板，计算出平板菌落数的平均值，然后按课本旁栏的公为什么分离不式进行计算。

同的微生物要（2）土壤取样：

采用不同的稀从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右，释度？

再取样，将样品装入事先准备好的信封中。

（3）制备培养基和样品的稀释：

制备以尿素为唯一氮源的选择培养基，并按一定倍数稀

释。

（4）微生物的培养与观察：

每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记

录作为结果。

答：因为土壤中各类微生物的数量（单位：株/kg）是不

同的，为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进

行分离，同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。

讨论实验过程5、操作提示

的注意事项。

（1）无菌操作

a、取土用小铁铲、盛土样信封在使用前都需要灭菌。

b、应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入

锥形瓶中，塞好棉塞。

c、在稀释土壤溶液的过程中，每步都要在火焰旁操作。

（2）做好标记

注明培养基种类、培养日期、平板培养样品的稀释度

4 （1）讲解样品的稀释和稀释液的取样培养流程示意图。

教学

环节

分析讲解

等。

（3）规划时间

6、结果分析与评价

（1）培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选菌落

（2）样品的稀释操作是否成功

（3）重复组的结果是否一致

7、课题延伸

在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素

了解酚红指示剂的作用，通过对比认清颜色的区别。

5

当

堂

训

练

见学案

课

堂

小

结

课后作业

步步高相应章节

6

板

书

设

计

教

学

反

思

7