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专题5 课题3 血红蛋白的提取和分离(第一课时)甘肃省岷县第一中学 何小彪一、【课题目标】知识与能力目标1、尝试从血液中提取和分离血红蛋白。2、说出色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理。学科素养1、基础知识(从血液中提取和分离血红蛋白;色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理);2、基本技能(

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课题3 血红蛋白的提取和分离课堂实录【2】

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关键词:课题3 血红蛋白�…课堂实录【2】

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专题5

课题3 血红蛋白的提取和分离(第一课时)

甘肃省岷县第一中学 何小彪

一、【课题目标】

知识与能力目标

1、尝试从血液中提取和分离血红蛋白。

2、说出色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理。

学科素养

1、基础知识(从血液中提取和分离血红蛋白;色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理);

2、基本技能(通过体验血红蛋白提取和分离的实验的严格要求,注意按照操作提示进行相关步骤,培养学生理论联系实际的能力);

3、基本思想(通过体验血红蛋白提取和分离的实验的严格要求,初步形成科学的思维方式,发展科学素养和人文精神);

4、基本活动经验(通过色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理的学习,关注学生科学态度的教育,拓展学生视野)。

二、【课题重点】

凝胶色谱法的原理和方法

三、【课题难点】

样品的预处理;色谱柱填料的处理和色谱柱的装填

四、【教学方法】

启发式教学

五、【教学工具】

1

多媒体课件

六、【教学过程】

(一)引入新课

蛋白质是生命活动的主要承担者,是细胞内含量最高的有机化合物。对蛋白质的研究有助于人们对生命过程的认识和理解。所以需要从细胞中提取蛋白质进行研究。怎样提取蛋白质呢?

(二)进行新课

1.基础知识

蛋白质的理化性质:形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千差万别,由此提取和分离各种蛋白质。

1.1凝胶色谱法(分配色谱法):

(1)原理:(图5-13a)分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙,路程短,流动快;分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部,路程长,流动慢。

(2)凝胶材料:多孔性,多糖类化合物,如葡聚糖、琼脂糖。

(3)分离过程:(图5-13b)

混合物上柱→洗脱→大分子流动快、小分子流动慢→收集大分子→收集小分子

*洗脱:从色谱柱上端不断注入缓冲液,促使蛋白质分子的差速流动。

1.2缓冲溶液

(1)原理:由弱酸和相应的强碱弱酸盐组成(如H2CO3-NaHCO3,NaH2PO4/Na2HPO4等),调节酸和盐的用量,可配制不同pH的缓冲液。

(2)缓冲液作用:抵制外界酸、碱对溶液pH的干扰而保持pH稳定。

1.3凝胶电泳法:

(1)原理:不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同,在电场中受到的作用力大小、方向、阻力不同,导致不同蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同。

2

[思考]阅读教材后,填写下表:

(2)分离方法:琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等。

(优教提示:打开素材实验演示:琼脂糖凝胶电泳)

(3)分离过程:在一定pH下,使蛋白质基团带上正电或负电;加入带负电荷多的SDS,形成“蛋白质-SDS复合物”,使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小。

(三)课堂总结、点评

七、【课余作业】

1、你能描述血红蛋白分离的完整过程吗?

2、与其他真核细胞相比较,红细胞有什么特点?这对你进行蛋白质的分离和提取有什么意义?

八、【教学反思】

本课题重在让学生了解生物科学在蛋白质领域的进展,说明提取、分离高纯度的蛋白质的重要性和必要性,并学习一些蛋白质分离和提取的基本技术。教师可以发挥学生的主动性,让学生介绍当前有关蛋白质研究的新进展,激发学生的学习兴趣,然后指出本课题的学习意义,让学生初步体会分离纯化蛋白质的过程和方法。

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