课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数优秀教学设计说课稿

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

一、【课题目标】

（一）知识与技能利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数

（二）过程与方法分析研究思路的形成过程，找出共性和差异性【课题重点】对土样的选取和选择培养基的配制

二、【课题难点】对分解尿素的细菌的计数

三、【教学方法】启发式教学

四、【教学过程】

（一）引入新课上节课我们学习了培养基的配置以及接种技术。

（二）进行新课

1．基础知识

尿素是一种重要的氮肥，农作物不能直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为氨和CO2，这是因为细菌能合成脲酶。

科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来是因为热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物，这样也适用于实验室中微生物的筛选，原理是人为提供有利于目的菌株生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物生长。

思考1、在该培养基配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的什么物质？琼脂起什么作用？

思考2、该培养基的选择机制是什么？

在统计菌落数目时，常用来统计样品中活菌数目的方法是稀释涂布平板法。除此之外，显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法。

采用稀释涂布平板法统计菌落数目时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。

思考3、从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计算方法是什么？究竟怎么计数与计算才正确？

统计的菌落数比活菌的实际数目低。这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。因此，统计结果一般用菌落数来表示。

设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。

2.实验设计

实验设计的内容包括实验方案、材料用具、实施步骤和时间安排等。

土壤微生物主要分布在距地表3～8cm的近中性土壤中，约70％～80％为细菌。

分离不同的微生物采用不同的稀释度，其原因是不同微生物在土壤中含量不同，其目的是保证获得菌落数在30～300之间、适于计数的平板。不同微生物稀释度不同。

培养不同微生物往往需要不同培养温度。

在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。

菌落的特征包括形状、大小、隆起程度、颜色等方面。

实验过程：

1）取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。

2）应在火焰旁称取土壤10g。将称好的土样倒入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，塞好棉塞。

3）在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行。

4）实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。

5）为了提高效率，在操作时更加有条不紊，应当事先规划时间。

注意事项：在研究未知微生物时务必规范操作，以防被致病微生物感染，实验后一定要洗手。

3.结果分析与评价

对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助生物化学的方法。

在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨。氨会使

培养基的碱性增强，PH升高。因此，我们可以通过检测培养基pH变化来判断该化学反应是否发生。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素。

思考4、测定饮水中大肠杆菌数量的方法是将一定体积的水用细菌过滤器过

滤后，将滤膜放到伊红美蓝培养基上培养，大肠杆菌菌落呈现黑色，通过记述得出水样中大肠杆菌的数量。你认为在该实验中至少应取多少水样才能使数据更加准确。

（三）课堂总结、点评

五、【课余作业】某生物小组以空气中细菌含量为指标，调查校园内不同区域（教室、草场、校长室、卫生间）的空气质量状况。请你写出完整的实验调查方案。