课题3　分解纤维素的微生物的分离ppt配套教案板书设计

§2.3《分解纤维素的微生物的分离》导学案

班级：高二（

）班

姓名：

【学习目标】

1.能简述纤维素酶的种类及作用。

2.掌握从土壤中分离出分解纤维素的微生物操作技术，了解这类微生物的应用。

【自主预习】

阅读教材27-30页，完成以下填空

一、纤维素酶及纤维素分解菌的筛选

1.纤维素与纤维素酶：

(1)纤维素：

①组成元素：____

___。基本组成单位：__

_____，

②分布：主要分布在植物________

___等器官的细胞壁。

(2)纤维素酶。

①组成：是一种

酶，至少包括三种酶，即_______、CX酶、___________。

②作用：

2.纤维素分解菌的筛选

（1）方法：_____________。

①方法一：先培养___

____，再加入___

____进行颜色反应。

②方法二：在_____

__时就加入刚果红。

(2)原理：

纤维素+刚果红→___

__复合物

↓_____________ 纤维二糖和葡萄糖，不能和刚果红形成红色复合物

↓出现

以_____________为中心的透明圈，通过______________来筛选纤维素分解菌。

二、尝试从土壤中分离出分解纤维素的微生物

1、分离分解纤维素的微生物的实验流程：土壤取样→ →梯度稀释→将样品涂布到 的培养基上→挑选产生 的菌落

2.菌种的进一步鉴定：

(1)鉴定原理：为确定透明圈内的菌落是纤维素分解菌，需要进行发酵产_________的实验。

(2)发酵方法：有___

__发酵和__

___发酵两种。

(3)纤维素酶的测定方法：一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的_______进行定量的测定。

1

【课堂探究】

【探究1】

如何设计实验证明纤维素酶能分解纤维素？

（材料：纤维素酶溶液、缓冲液、蒸馏水、滤纸）

实验思路：

【探究2】下面是分离分解纤维素的微生物的实验流程，结合教材知识，思考讨论相关问题

明确每一步的实验设计思路。

1、

土壤取样

(1)

最好选择怎样的环境采集土样？为什么？为什么将滤纸埋在土壤中可以提取到目的菌？

2、

选择培养

（2）选择培养的目的是什么？

（

3）该培养基是液体还是固体培养基？为什么？选用液体培养基有什么优势？包含哪些营养物质？C源、N源分别是什么？

（4）该培养基是否具有选择作用？如果具有，又是如何选择的？该如何证明？该培养基上只有分解纤维素的微生物吗？

（5）为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？

3、

梯度稀释

2

培养基配方

纤维素粉5 g、NaNO3 1 g、Na2HPO4·7H2O 1.2 g、KH2PO4

0.9 g、MgSO4·7H2O 0.5 g、KCl 0.5 g、酵母膏0.5 g、水解酪素0.5 g，蒸馏水定容到1 000 mL

4、鉴别培养

培养基配方

CMC-Na (水溶性羧甲基纤维素钠)

5~10g，酵母膏1g，KHPO0.25g，土豆汁100mL，琼脂15g,上述物质溶解后，加蒸馏水定容至1000mL

（6）该培养基是液体还是固体培养基？为什么？

（7）鉴别纤维素分解菌培养基中还应添加什么物质？那种添加方法更简单？

5、挑选产生透明圈的菌落

6、进一步的鉴定

（8）

用什么方法进一步鉴定纤维素菌？

结果分析与评价

【探究小结】比较选择培养基和鉴别培养基

特殊

成分

目的

用途

选择培养基

控制某一条件(如唯一氮源)或加入某种物质(如青霉素) 鉴别培养基

加入某种指示剂或化学药品

24

抑制其他微生物生长,促进目的微生与微生物的代谢产物或培养基中的成物的生长

分发生特定反应

培养、分离出特定微生物

鉴别不同的微生物

举例

培养酵母菌和霉菌,可在培养基中加可用伊红—美蓝培养基鉴定饮用水是入青霉素,抑制细菌生长;用以尿素否有大肠杆菌(若有,菌落呈黑色) 作唯一氮源的培养基来培养尿素分用刚果红染色鉴定纤维素分解菌（若解菌

有，出现（透明圈）

3

【课堂检测】

生物乙醇是以生物为原料生产的可再生能源。我国利用农作物废弃物(秸秆)生产乙醇，其技术流程为：纤维素酶解→酵母发酵→蒸馏→成品。纤维素酶的成本能否下降，是能否实现乙醇工业化生产的关键因素。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程：

土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。结合教材知识回答下列问题。

（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将

分解成

。

(2)下面是纤维素分解菌的选择培养基配方：纤维素粉5 g、NaNO3 1 g、Na2HPO4·7H2O 1.2 g、KH2PO4 0.9 g、MgSO4·7H2O 0.5 g、KCl 0.5 g、酵母膏0.5 g、水解酪素0.5 g(蒸馏水定容到1 000 mL)。该培养基能够增加样品中纤维素分解菌的浓度，其原理是___________________________________________

__。

(3)为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基上加入________染液，将筛选获得的菌液稀释后用______

__的方法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生________的菌落作为菌种进行扩大培养。

（4）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养（成分见下表）：

培养基甲

培养基乙

注：“＋”表示有，“－”表示无。

据表判断，培养基甲

（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，

原因是

；

培养基乙

（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，

原因是

。

4

酵母膏

＋

＋

无机盐

＋

＋

淀粉

＋

＋

纤维素粉

琼脂

＋

－

－

＋

CR溶液

＋

＋

水

＋

＋