课题3　分解纤维素的微生物的分离教学设计及说课稿

课题3 分解纤维素的微生物的分离

学习目标

1.能简述纤维素酶的种类及作用，

2.能从土壤中分离出分解纤维素的微生物，了解这类微生物的应用。

3.能掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术。

学习重点

掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术。

学习难点

掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术。

课前预习

使用说明与学法指导

生物选修一专题二课题3 知识准备

搜集筛选分解纤维素菌的方法及鉴定

教材助读

一、纤维素与纤维素酶

1.纤维素的化学组成： 三种元素，是一种 糖。

2.纤维素的分布： 是自然界中纤维素含量最高的天然产物，此外，木材、作物秸秆等也富含纤维素。

3.纤维素酶的作用：纤维素酶是一种 ，一般认为它至少包括三种组分，即 酶、 酶 酶，前两种酶使纤维素分解成 ，第三种酶将纤维二糖分解成 。

二、纤维素分解菌的筛选 1.筛选方法： 染色法。[来源:学*科*网]

2.筛选原理：刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成 ，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以 为中心的透明圈，我们可以通过 来筛选纤维素分解菌。

三、试验设计流程

、 、 、 、 。

1.土壤取样：采集土样时，应选择富含 的环境。 2.选择培养：

阅读资料二“选择培养基”，回答以下问题：

若设置一个对照实验说明选择培养

(1)目的：增加纤维素分解菌的 ，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。

(2)制备选择培养基：参照课本旁栏中的比例配制。

(3)选择培养：称取土样20 g，在无菌条件下加入装有30mL培养基的锥形瓶中，将锥形瓶

固定在 上，在一定温度下振荡培养1～2 d，直至培养液变 。也可重复选择培养。

1

(4)梯度稀释：

依次将培养液稀释101～107倍。思考是如何操作的？

(5)将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上[来源:学|科|网]

<1>制备培养基：参照课本旁栏中的比例。 <2>倒平板操作。

<3>涂布平板：将稀释度为104～106的菌悬液各取0.1 mL涂布在平板培养基上，30℃倒

置培养。

(6)刚果红染色法：挑选产生 的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。

刚果红染色法：常用的刚果红染色法有两种即 。

预习自测题

1.下列材料中纤维素含量最高的是

A.杨树 B.小麦 C.玉米 D.棉花

2.纤维素酶能分解

A.纤维素的微生物 B.淀粉的微生物 C.纤维素 D.淀粉

3.刚果红能与哪项物质形成红色复合物

A.纤维二糖 B.纤维素 C.葡萄糖 D.麦芽糖

4.寻找纤维素分解菌应到

A.湿润的环境中 B.富含纤维素的环境中 C.富含无机物的环境中 D.池塘中

课内探究

质疑探究

探究一

纤维素分解菌选择培养基属于 培养基，原因是什么？

探究二

培养基选择作用机制是什么？

探究三、若设置一个对照实验说明选择培养的作用，应控制的变量是什么？

探究四

本实验流程与尿素分解菌的分离实验流程有哪些异同？

归纳总结

纤维素分解菌的筛选

（1）筛选方法：刚果红染色法。能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选。（2）刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理

刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红－纤维素的复合物就无

2 [来源:学科网ZXXK]

法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。这样，我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

分离分解纤维素的微生物的实验流程

土壤取样→选择培养（此步是否需要，应根据样品中目的菌株数量的多少来确定）→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落

（1）土壤采集 选择富含纤维素的环境。

（2）刚果红染色法分离纤维素分解菌的步骤 倒平板操作、制备菌悬液、涂布平板

（3）刚果红染色法种类

一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是在倒平板时就加入刚果红。

当堂检测

1.纤维素分解菌的选择培养基有选择作用，原因在于其含有

A．NaNO3

B．KCl C．酵母膏 D．纤维素粉

2.下列哪种生物能产生纤维素酶

A.纤维素分解菌 B．牛 C．羊 D．兔

3.选择培养时应将锥形瓶固定在

A．桌子上 B．温箱里 C．窗台上 D．摇床

4.选择培养的结果：培养液变 A．清澈 B．浑浊 C．红色 D．产生透明圈

5.刚果红染色时，加入刚果红可在

①制备培养基时

②梯度稀释时

③倒平板时

④涂布时

⑤培养基上长出菌落时

A．①③ B．②⑤ C．③⑤ D．④⑤

6.两种刚果红染色法的结果是 A．均会出现透明圈

C.方法一出现方法二不出现 课后训练

1.培养流感病毒时，应选用

A．固体培养基B．含有多种无机盐的培养液 C．活的鸡胚D．无菌的牛肉汤

2.以下关于微生物对氧的需求的叙述中正确的是

A．产甲烷杆菌属厌氧呼吸，但氧的存在不影响其生存 B．链球菌进行厌氧呼吸，不能接触空气 C．黄色短杆菌在氧气充足时才能产生谷氨酸

D．谷氨酸棒培育杆菌是厌氧呼吸

3.可以使微生物细胞内蛋白质、核酸发生不可逆破坏的环境因素是

A．高温 B.营养成分的变化 C.氧含量 D.温度、pH、氧的共同作用

4.微生物（除病毒外）需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖。下列有关微生物营养的说法正确的是

A．乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的

3 B.均不会出现透明圈

D.方法一不出现方法二出

B．微生物生长中不可缺少的一些微量的无机物称为生长因子 C．培养基中的营养物质浓度越高对微生物的增殖越有利

D．生长因子一般是酶或核酸的组成成分，微生物本身合成这些生长因子的能力往往不足

5.下列有关味精生产的一些措施的叙述，正确的是 A．常用的菌种是谷氨酸棒状杆菌和金黄色葡萄球菌 B．培养基是含有五种营养成分的合成培养基 C．在发酵中要控制的只是温度、pH、通气量 D．味精是谷氨酸经Na2CO3中和后，再经过过滤、浓缩、离心分离而成

6.菌落形成的根本原因是

A．细菌有鞭毛 B．细菌能运动 C．培养基有琼脂 D．子细胞成为群体

7.在接种操作的过程中，不正确的是

A.要将接种环灼烧灭菌B.取下棉塞后要将试管口灼烧灭菌

C.将接种环伸入试管内，先接触长菌多的部位D.接种后还要将管口灭菌加塞

8.高压蒸汽灭菌的原理是

A.高压是细菌DNA变性 B.高压是细菌蛋白质凝固变性C.高温烫死细菌 D.高温使细菌DNA变性

[来源:Zxxk.Com][来源:学科网]

4