课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数优秀教案内容

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》教案

一、教学目标

研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定。

二、教学重点

对土样的选取和选择培养基的配制。

三、教学难点

对分解尿素的细菌的计数。

四、课时安排：3课时

五、教学过程

教学内容

教师活动

导入课题

教师讲解：我们上节学习了培养基的配置以及无菌操作技术，

学生活动

学生回忆专题2设计意图

创设情景，引入新课

下面来学习如何进行细菌的分离，获得所需要的目的微生物。

微生物的实验室培养里面关于培养基及无菌操作的相关知识。

一、

学生阅读课本P21，讲解实例：DNA多聚酶链式反应是一种1、学生讨论为通过教师讲解知识点，引导学生对知识进行迁移学习，培养学生的逻辑迁移思维。

通过观看图片，使研究思路

在体外将少量DNA大量复制的技术，此项技术要求使用耐高温什么Taq细菌能

（一）

（93℃）的DNA聚合酶，因为热泉温度70～80℃，淘汰了绝大从热泉中筛选筛选菌株

多数微生物只有Taq细菌被筛选出来。引导学生得到启示根据出来吗？

1、自然界筛选

2、实验室筛选

3、选择培养基

它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找即自然界筛选。

实验室筛选：实验室中微生物的筛选原理：

2、学生阅读人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），课本P22侧边栏同时抑制或阻止其他微生物生长。

选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。

培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿关于本课题使用的培养基成分相关内容，讨论并回答提供碳源和氮源的分别是什么物素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。质。

1

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缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。

教师让学生阅读课本图2-6，展示各种筛选菌株方法的多媒体图片：黄石公园热泉

海底火山

大肠杆菌显色培养基

实验室筛选SARS菌株

3、学生讨论培养基如何对微生物进行筛选。

4、学生观看教师展示的多媒体图片。

学生由感性认识过渡到理性认识。培养学生的学科素养。

（二）

统计菌落数目

1、直接计数法：最常用的显微镜直接计数 利用血球计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的1、学生举例血球计数板属于知识的迁移，培养学生的知识整合能力。

数量。缺点：不能区分死菌与活菌；不适于对运动细菌的计数；

直接计数法。

需要相对高的细菌浓度；个体小的细菌在显微镜下难以观察；

2、间接计数法：（活菌计数法）

⑴

原理：在稀释度足够高时，微生物在固体培养基上所形成2、学生讨论并区别：稀释涂布的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的，即一个菌落代表原先

平板法是用来的一个单细胞。

（2）最常用方法：稀释涂布平板法。

每克样品中的菌株数＝（C÷V）×M

C：某一稀释度下平板上生长的平均菌落数

V：涂布平板时所用的稀释液的体积（ml)

M：稀释倍数 注意事项：

①为了保证结果准确，一般选择菌落数在30——300的平板上进行计数。

②为使结果接近真实值可将同一稀释度加到三个或三个以上的平皿中，经涂布，培养计算出菌落平均数。

③统计的菌落往往比活菌的实际数目低。

④涂布平板法所选择的稀释度很重要，一般以三个稀释度中的计数的，而平板划线法是用来纯化的。

2

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 第二个稀释度所出现的平均菌落数在50个左右为最好。

学生设计实验方案：

设置对照

验。满足该条件的称为对照组，未满足该条件的称为实验组。

方案一：由其

设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的他同学用与A同学相同土样进

影响，提高实验结果的可信度。

行实验；

方案二：将A

同学配制的培

养基在不加土

实例：在做分解尿素的细菌的筛选与统计菌落数目的实样的情况下进行培养，作为空

验时，A同学筛选出约150个菌落，但其他同学只选择出约50白对照，以证明培养基是否受

个菌落，分析其原因。教师要求学生设计实验方案。

到污染。

小结：通过这个事例可以看出，实验结果要有说服力，对照（三）

对照实验是指除了被测试的条件外，其他条件都相同的实

二、

实验设计

1、土壤取样：

从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的信封中。

2、制备培养基

制备以尿素为唯一氮源的选择培养基，并按一定倍数稀释。

3、样品的稀释：

应在火焰旁称取土壤10g。在稀释土壤溶液的过程中，每一步都

3 培养学生的怀疑精神，并根据自身设计实验方案进行验证。培养学生的实验设计能力。

的设置是必不可少的。

1、教师讲解样品的稀释和稀释液的取样培养流程示意图。

学生讨论思考下列问题：

1、如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？

答：统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好能统计3个平板，计算出平板菌落数的平均值，然后按课本

通过实验设计，培养学生设计实验方案能力，培养学生的学科素养。体验无菌操作的实验过程。

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三、

要在火焰旁进行分离不同的微生物采用不同的稀释度

4、微生物的培养与观察：

每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果。

旁栏的公式进行计算。

2、为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？

1、无菌操作

学生讨论实验过程的注意事项。

培养学生的创新思维。

操作提示

a、取土用小铁铲、盛土样信封在使用前都需要灭菌。

四、

结果分析与评价

1、培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选菌落

2、样品的稀释操作是否成功

3、重复组的结果是否一致

b、应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中，塞好棉塞。

c、在稀释土壤溶液的过程中，每步都要在火焰旁操作。

2、做好标记

注明培养基种类、培养日期、平板培养样品的稀释度等。

3、规划时间 学生交流成果，培养学生分析自己的成功之处和需要改进的地方。

学会对别人评价和自我评价的能力

五、

在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细学生了解酚红知识的延课题延伸

菌后，如果PH升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素 指示剂的作用，伸与迁

脲酶的检测

通过对比认清颜色的区别。

移。

4

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六、板书设计

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