课题3　血红蛋白的提取和分离教案范文

课题3 血红蛋白的提取和分离

课标要求：通过尝试对血液中血红蛋白的提取和分离；

使学生能够体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法；

了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理。

教学目标：

知识：尝试从血液中提取和分离血红蛋白，了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理。

能力：体验血红蛋白提取和分离的实验的严格要求；

能按照操作提示进行相关步骤，学习蛋白质提取和分离的一些基本技术。

情感：初步形成科学的思维方式，发展科学素养和人文精神。

【重点难点】

重点：凝胶色谱法的原理和方法。

难点：样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填。

【课前预习】

1、凝胶色谱法也称做 ；是根据 分离蛋白质的有效方法。

2、凝胶色谱法的原理： (1)由 构成的凝胶，内部有许多贯穿的的 。

⑵当 不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量 的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程 ，移动速度 ，而相对分子质量 的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在 移动，路程 ，移动速度 ，从而使 不同的蛋白质分子得以分离。

3、缓冲溶液在一定范围内，能够抵制外界的 对溶液pH的影响，维持pH 。

4、缓冲溶液的配制：由 种缓冲剂溶解于 中配制而成，通过调节缓冲剂的 就可以得到不同pH范围内使用的缓冲液。

5、电泳指 在电场的作用下发生 的过程。

6、电泳的原理是指在一定的 下， 、 等生物大分子的可解离基团会带上 或 ，在 的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷 的电极移动。

7、电泳的作用：电泳利用了待分离样品中各种分子 的差异及分子本身的 、 的不同，使带电分子产生不同的 ，从而实现样品中 的分离。

8、常用的电泳方法有 和 。测定蛋白质分子量时通常使用 。

【我要提问】

【精讲点拨】

1、凝胶色谱分离法分离蛋白质时，凝胶的种类较多，但其作用的共同点是 （ ）

A．改变蛋白质分子通过凝胶的路径 B．吸附一部分蛋白质，从而影响蛋白质分子的移动速度 C．将酶或细胞固定在凝胶中 D．与蛋白质分子进行化学反应，从而影响其移动速度

2、凝胶色谱法分离蛋白质的原理依据是 （ ）

A、蛋白质分子与凝胶的亲和力的大小 B、蛋白质相对分子质量的大小

C、蛋白质所带电荷的多少 D、蛋白质溶解度的大小

3、凝胶色谱法中所用的凝胶的化学本质是 （ ）

A．糖类化合物 B．脂质 C．蛋白质 D．核酸

4、蛋白质的提取和分离过程包括

A. 样品处理、醋酸纤维薄膜电泳B. 样品处理、纯化

C. 样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定D. 样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定

5、科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白。这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。 (1)分离该抗菌蛋白可用电泳法，其原理是根据蛋白质分子的__电荷(或带电情况) ___、大小及形状不同，在电场中的__迁移速度_____ ___不同而实现分离。 (2)可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的体外抗菌特性。抗菌实验所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供__ 碳源 _____和___ 氮源 ___。 (3)分别在加入和未加入该抗菌蛋白的固体培养基中接种等量菌液。培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的__数量___ ____，确定该蛋白质的抗菌效果。 (4)测定微生物数量的方法有___ 稀释涂布平板法 _______、_____显微镜直接计数 。

【巩固练习】

1．凝胶色谱法是根据（ ）分离蛋白质的有效方法。

A分子的大小 B相对分子质量的大小 C带电荷的多少 D溶解度

2．缓冲液的作用是：在一定范围内，抵制外界的影响来维持（ ）基本不变。

A．温度 B． pH C．渗透压 D．氧气浓度

3．电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷（ ）的电极移动。

A．相同 B．相反 C．相对 D．相向

4．在血红蛋白的分离实验中，将搅拌好的混合液转移到离心管中，离心后，可以明显看到试管中的溶液分为4层，从上至下数，其中第3层是 （ ）

A．无色透明的甲苯层 B．脂溶性物质的沉淀层 C．血红蛋白的水溶液 D．其他杂质的暗红色沉淀物

5．利用凝胶色谱法分离蛋白质，最先洗脱的蛋白质特点是 （ ）

A．相对分子质量大的 B．溶解度高的 C．相对分子质量小的 D．所带电荷多的

6. 凝胶色谱法中所用的凝胶化学本质大多是 （ ）

A. 糖类化合物 B. 脂质 C. 蛋白质 D. 核酸

7．相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的进行过程可表示为图中哪一个 ( )

8．下列关于DNA和蛋白质提取与分离实验的叙述，正确的有（多选） （ ）

A．提取细胞中的DNA和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞

B．用不同浓度NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除蛋白质

C．蛋白质提取和分离过程中进行透析可去除溶液中的DNA D．蛋白质和DNA都可以用电泳的方法进行分离纯化